河南省杰出青年科学基金(0512000800)
- 作品数：7 被引量：22H指数：2
- 相关作者：朱武凌范秉琳嵇晓辉蔡新华张红鸽更多>>
- 相关机构：新乡医学院郑州人民医院新乡医学院第三附属医院更多>>
- 发文基金：河南省杰出青年科学基金河南省高校杰出科研人才创新工程基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TCTP mRNA在肝再生中的表达及其生物学意义被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)mRNA在肝再生中的表达情况和生物学意义.方法:对健康成年雄性SD大鼠进行2/3部分肝切除以建立肝再生模型,分别于肝切除术后不同时间点收集再生肝组织,在显微镜下进行有丝分裂指数评价,利用流式细胞术分析细胞周期分布变化;半定量RT-PCR法检测TCTP mRNA的表达.结果:肝细胞有丝分裂指数在术后3～12h明显升高.细胞周期分析显示,肝切除术后1h呈现G0/G1向S期迁移,G2/M期细胞比例在3h呈现升高,6h升高最为显著.TCTP mRNA的表达在肝切除术后1h时轻微上调,在3～12h呈显著升高,之后下降至初始水平.结论:在肝再生组织中TCTP mRNA表达呈动态变化,可能与有丝分裂和细胞增殖密切相关.
- 朱武凌程海霞张伟丽张会勇林俊堂刘涌涛井长勤
- 关键词：肝再生有丝分裂细胞周期
- MicroRNA-100对肝癌细胞增殖活力和细胞周期的影响被引量：11
- 2013年
- 目的:探讨microRNA-100(miR-100)对肝癌细胞增殖活力和细胞周期的影响及其可能机制。方法:通过脂质体介导将人工合成的miR-100模拟物及其阴性对照转染人肝癌HepG2细胞,用细胞计数试剂盒8(CCK-8)方法检测转染后HepG2细胞的增殖活力,用流式细胞术判定细胞周期分布,并进一步用实时荧光定量RT-PCR和Western blotting分析Polo样激酶1(Plk1)的表达水平。结果:荧光显微镜下观察到经阳离子脂质体介导的细胞转染效率大于85%。转染miR-100模拟物的实验组细胞的增殖抑制率在24、48和72 h分别为(43.5±12.2)%、(46.5±3.7)%和(52.1±0.2)%,均显著高于对照组细胞(P<0.01),并且在72 h实验组细胞增殖指数(35.8±1.4)低于阴性对照组(39.2±1.0)和单纯脂质体组(40.7±2.0)(P<0.05)。同时与对照组相比,实验组细胞Plk1 mRNA和蛋白表达水平在转染miR-100后72 h明显降低(P<0.05)。结论:miR-100可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与其下调Plk1的表达有关。
- 嵇晓辉范秉琳张红鸽蔡新华朱武凌
- 关键词：肝肿瘤POLO样激酶1
- 胎儿肝脏发育早期肝细胞一氧化氮合酶的表达被引量：2
- 2010年
- 目的探讨胎儿肝脏发育早期肝细胞中一氧化氮合酶的表达情况。方法取43例胎儿肝脏组织,经甲醛固定和石蜡包埋,行HE染色。显微镜下观察胎儿发育不同时段肝脏的组织学表现,免疫组织化学及图像分析方法分别检测其一氧化氮合酶异构体(nNOS、iNOS、eNOS)的表达水平。应用SPSS12.0软件进行统计学分析。结果在6～9周胚胎中未见肝细胞,第12周时可见大量肝细胞及肝索,16周时肝小叶已显现,但无汇管区,28周时肝脏正常结构形成。免疫组织化学结果显示,在胎肝发育第12周时,nNOS、iNOS和eNOS在肝细胞中均呈阳性表达;在第16周和28周时,nNOS无表达,iNOS表达呈明显下降趋势,而eNOS表达则显著升高。结论肝细胞NOS表达在胎肝发育早期呈时间差异性,对肝组织的成熟可能起重要作用。
- 朱武凌李继煜毛会丽李玉洁
- 关键词：胎儿肝脏发育肝细胞一氧化氮合酶
- Polo样激酶1基因在大鼠肝再生和肝卵圆细胞增殖中的差异表达被引量：1
- 2013年
- 肝脏具有很强的再生能力，当发生轻、中度肝损害时，肝细胞可经增殖和分化等复杂过程完成肝再生；而在肝细胞大量损害或肝细胞增殖能力被抑制时，卵圆细胞可增殖并分化为肝细胞或胆管细胞。然而，目前研究结果已初步证实肝细胞癌的发生也源起于卵圆细胞，其分子机制仍有待深入研究[1-3]。
- 范秉琳张伟丽杜梅红朱武凌
- 关键词：癌前状态肝再生肝卵圆细胞
- miRNA-100下调polo样激酶1表达促进肝癌HepG2细胞凋亡被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨microRNA-100(miR-100)对人肝癌HepG2细胞中polo样激酶1(polo-like kinase 1,Plk1)表达和细胞凋亡的影响。方法:通过oligofectamine介导,将miR-100 mimics转染入HepG2细胞中,RT-PCR和细胞免疫荧光法检测Plk1 mRNA和蛋白的表达,并采用AnnexinⅤ-FITC试剂盒检测HepG2细胞的凋亡情况。结果:miR-100 mimics成功转染HepG2细胞,转染效率为(88.75±2.22)%。转染48 h后,miR-100 mimics组HepG2细胞Plk1 mRNA的表达水平明显低于阴性对照组、空白对照组和脂质体组[(0.71±0.01)vs(0.95±0.01)、(0.92±0.02)、(0.93±0.02),均P<0.01];转染72 h后,miR-100 mimics组Plk1蛋白几乎不表达,同时其细胞凋亡率明显高于阴性对照、空白对照组和脂质体组[(26.95±6.72)%vs(15.03±5.12)%、(6.88±3.71)%、(9.00±3.37)%,均P<0.05]。结论:miR-100能够抑制Plk1基因的表达,从而促进肝癌HepG2细胞的凋亡。
- 张红鸽范秉琳嵇晓辉蔡新华朱武凌
- 关键词：肝癌HEPG2细胞POLO样激酶1
- 肝癌细胞微小RNA-100对细胞有丝分裂的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨微小RNA(micro RNA-100,miR-100)对人肝癌HepG2细胞有丝分裂的影响。方法:采用实时荧光定量PCR法检测HepG2细胞中miR-100和Polo样激酶1(Polo-like kinase1,Plk1)mRNA的相对表达水平。以脂质体介导的方法将化学合成的带有Cy3荧光标记的miR-100模拟物瞬时转染至HepG2细胞,采用FCM法检测磷酸化组蛋白H3(phospho histone H3,PHH3)标志的转染后细胞的有丝分裂指数,光学显微镜观察细胞的有丝分裂情况,免疫细胞化学法分析转染后细胞中Plk1蛋白表达的变化。结果:同正常肝细胞比较,肝癌HepG2细胞的miR-100水平降低(P<0.05),而Plk1mRNA水平明显升高(P<0.01)。在转染miR-100模拟物48h后,显微镜下可见有丝分裂细胞数较对照组明显减少,且细胞有丝分裂指数明显低于对照组细胞[(0.62±0.48)%vs(10.34±0.77)%,P<0.01]。同对照组相比,miR-100转染组细胞中Plk1mRNA水平在转染后48h时显著降低(P<0.01),且有丝分裂中晚期和末期位于细胞核内的Plk1蛋白基本消失。结论:肝癌细胞中miR-100水平升高可导致细胞有丝分裂阻滞,这可能与细胞核内Plk1蛋白缺失密切相关。
- 范秉琳刘涌涛嵇晓辉朱武凌
- 关键词：微RNAS有丝分裂蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶POLO样激酶1
- MiR-100对肝癌细胞有丝分裂阻滞及Polo样激酶1蛋白表达的作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨microRNA-100(miR-100)对肝癌细胞有丝分裂阻滞及Polo样激酶1(PLK1)表达的作用。方法采用实时定量PCR和免疫荧光方法检测miR-100和PLK1在人肝癌细胞HepG2中的表达。利用Oligofectamine脂质体介导将Cy3荧光标记的miR-100模拟物瞬时转染HepG2细胞,分析细胞有丝分裂和PLK1蛋白表达情况。结果肝癌细胞HepG2的miR-100表达量低于正常肝细胞,而PLK1 mRNA和蛋白表达却异常升高。在miR-100模拟物转染后48h,实验组细胞有丝分裂指数显著小于对照细胞,经Western blotting分析显示,实验组细胞PLK1蛋白表达水平较对照组细胞均显著减低。同时免疫细胞化学检测发现,在有丝分裂中晚期和末期位于细胞核内的PLK1蛋白基本消失。结论 miR-100具有抑制PLK1蛋白表达的作用,可引起肝癌细胞有丝分裂阻滞。
- 范秉琳嵇晓辉朱武凌
- 关键词：肝癌有丝分裂POLO样激酶1实时定量PCR免疫印迹法免疫荧光
