教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-11-0663)
- 作品数:6 被引量:45H指数:3
- 相关作者:王周平吴世嘉张维潇李响李向丽更多>>
- 相关机构:江南大学中山火炬职业技术学院张家港出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”江苏省科技支撑计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程医药卫生生物学理学更多>>
- 磁分离结合CdTe发光量子点标记黄曲霉毒素B1免疫检测新方法被引量:11
- 2013年
- 将发光量子点标记技术与磁分离富集技术相结合,基于竞争免疫分析,成功构建了黄曲霉毒素B1(AFB1)免疫检测新方法。首先合成了巯基丙酸包覆的CdTe发光量子点,同时采用水热法合成了氨基化磁性纳米粒子.通过TEM成像、荧光光谱、XRD、红外光谱等分别对其进行了表征。随后以AFB1人工抗原功能化磁性纳米粒子作为捕获探针,以发光量子点标记免疫球蛋白C(二抗)作为信号探针,基于磁性纳米粒子表面AFB1人工抗原和样品中AFBl与AFB1单克隆抗体之间的竞争免疫结合,建立了AFB1新型检测方法。实验优化条件下,荧光强度与黄曲霉毒素B。质量浓度在0.1~100ng/mL范围内呈良好的线性关系,检测限为0.03ng/mL。实际样品中加标回收实验结果表明.新方法准确性良好。
- 李响李向丽谭贵良吴世嘉王周平
- 关键词:磁分离黄曲霉毒素B1
- 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)鞭毛蛋白FlaA的重组表达与多克隆抗体制备
- 2013年
- 副溶血性弧菌是广泛存在于水产品中的革兰阴性致病菌。鞭毛蛋白FlaA是副溶血性弧菌的一种特异性的蛋白质,以该蛋白质作为抗原所制备到的抗体可以作为检测副溶血性弧菌的探针。该研究通过分子生物学方法构建了重组FlaA的表达载体pET28a-flaA,并采用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导实现FlaA的大量表达。该重组蛋白以可溶性形式存在,经Ni-NTA亲和柱纯化后对家兔进行免疫,得到浓度为24.32 mg/mL、效价为1∶125,000的抗FlaA抗体。通过间接ELISA实验,测得该抗体与副溶血性弧菌反应的灵敏度为1.0×104CFU/mL,且该抗体与5种其他常见致病菌无明显交叉反应。
- 夏雨王燕王周平
- 关键词:副溶血性弧菌鞭毛蛋白多克隆抗体
- 基于纳米金标记的金黄色葡萄球菌可视化检测方法研究被引量:5
- 2013年
- 目的以纳米金为载体,对金黄色葡萄球菌进行可视化检测。方法将与金黄色葡萄球菌目标序列互补的DNA1和DNA2连接到纳米金上,当体系中出现金黄色葡萄球菌目标序列时,两条短链DNA就会与目标序列杂交,使纳米金之间的距离拉近,从而使纳米金发生团聚,导致纳米金的颜色从酒红色变为蓝色。由于金黄色葡萄球菌目标序列浓度的不同,从而引起纳米金之间团聚的程度不同,纳米金就会相应的呈现出不同的颜色变化,这样就可达到可视化检测的目的。结果在最优实验条件下,本方法在检测金黄色葡萄球菌目标序列时,浓度在1~1000pmol/L范围内呈现良好的线性关系,检出限为0.5pmol/L;检测金黄色葡萄球菌时,线性范围为30~9800CFU/mL,检出限为25CFU/mL。结论通过特异性和加标回收实验,证明本方法可以用于实际样品的检测。
- 袁京磊俞晔李灿王周平
- 关键词:纳米金金黄色葡萄球菌
- 基于电沉积壳聚糖-碳酸钙-纳米金的有机磷农药生物传感器被引量:1
- 2012年
- 目的制备基于壳聚糖-碳酸钙-纳米金复合膜固定乙酰胆碱酯酶的新型电化学传感器。方法一步电沉积壳聚糖、碳酸钙和纳米金修饰到玻碳电极,由于电沉积过程有气泡产生,使沉积到电极上的碳酸钙微粒形成了三维多孔的结构,利于酶比较分散的固定在电极表面,提高检测效率;同时纳米金的引入不仅增大了电极比表面积,而且促进电子的快速传递,放大了检测信号。结果将制备的生物传感器用来检测有机磷农药乐果,检测限为2.5 pg/mL,检测时间只需要7 min。结论该生物传感器检测法实现了对有机磷农药快速、超灵敏的检测。
- 张伟龙贾飞何良兴王周平魏云潇
- 关键词:乙酰胆碱酯酶纳米金碳酸钙乐果
- 适配体及其研究进展被引量:27
- 2013年
- 综述了适配体的筛选方法以及近几年来在分析检测、食品安全、临床医疗等领域的应用。适配体是一类能与靶分子高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸单链。它可以通过指数级富集的配体进化技术(SELEX)从体外筛选而得。适配体类似于抗体而优于抗体,愈渐成为各种研究项目、检测方面等的重要课题之一。
- 王周平张维潇
- 关键词:适配体SELEX技术食品安全
- 基于Au/SiO_2信号放大的人免疫球蛋白G电化学检测新方法被引量:1
- 2015年
- 将人免疫球蛋白G(人IgG)固定到导电玻璃ITO表面,利用抗原抗体有特异性结合制备出一种电化学免疫传感器。在导电玻璃ITO表面进行氨基化戊二醛修饰处理后,链接羊抗人IgG;在二氧化硅微球表面进行氨基戊二醛化,2~5nm纳米金通过静电吸附在二氧化硅微球表面,利用H2O2进一步将纳米金还原后粒径变大,链接羊抗人IgG。基于Au/SiO2信号放大效应,利用人IgG对羊抗人IgG的特异性结合作用,人IgG分别与导电玻璃端和纳米材料端相结合,形成三明治夹心结构,建立了一种检测人IgG的电化学免疫新方法。电极表面的氧化还原峰电流值与人IgG的浓度在1~200ng/mL内呈良好的线性关系,线性回归方程为y=-0.5326x+409.2567,相关系数R2=0.9948,检测限为0.6ng/mL。该电化学免疫传感器实现了对人免疫球蛋白G低成本、超灵敏的检测,有望应用于人体血清检测。
- 倪郦丽宋靓婧马小媛吴世嘉段诺王周平
- 关键词:食品检验二氧化硅循环伏安法