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小鼠胚胎干细胞培养相关影响因素的研究被引量：1: 2004年; 本实验主要探讨饲养层、白血病抑制因子(LIF)、水、血清对小鼠胚胎干细胞培养的影响。结果表明:饲养层细胞在小鼠胚胎干细胞的分化抑制过程中有一定作用,而起主导作用的是外源白血病抑制因子;;经亚沸处理的MilliQ水,能显著提高小鼠胚胎干细胞保持未分化状态的能力;;血清的品质对小鼠胚胎干细胞的培养效果影响显著(p<0.05)。; 蒙超衡黄奔石德顺黎强王殿君; 关键词：胚胎干细胞饲养层 LIF 血清

荧光染色及紫外照射(UV)对黄牛孤雌和克隆胚胎早期发育的影响被引量：6: 2005年; 探讨荧光染色及紫外照射对牛孤雌和克隆胚胎体外发育的影响。结果发现,1/4倍UV照射20、30、40 s的卵母细胞孤雌激活后囊胚发育率都极显著低于UV照射0 s和10 s组;以1、1/4、1/8、1/32倍的UV强度照射黄牛卵母细胞20 s,其中1/4倍UV照射组的分裂率与1/8、1/32倍UV照射组无显著差异,但囊胚率间差异显著。以1倍UV强度照射组的分裂率与囊胚率均显著低于1/8、1/32倍UV强度照射组;观察培养24 h后原核形成情况,发现1倍UV强度照射组原核形成也显著滞后于其它处理组;比较1、1/8倍UV强度照射引导去核胞质构建的重组胚体外早期发育情况,发现1倍UV强度照射引导去核胞质重组胚的卵裂率及囊胚率极显著低于1/8倍UV照射强度引导去核胞质组。以上结果表明:1/4倍UV强度照射黄牛卵母细胞时间大于20 s,显著降低其孤雌激活后的卵裂和体外发育潜力;1、1/4倍UV照射强度可阻滞原核形成,降低UV照射强度可提高胚胎孤雌发育率;1/8倍UV照射强度可用于引导去核操作。; 韦精卫石德顺韦英明杨素芳陆凤花孟凡丽; 关键词：黄牛孤雌激活体细胞核移植

小鼠ES细胞神经分化的方法比较研究被引量：1: 2004年; 采用类胚体法(EB)的EB分化4-/4+程序和单层分化法研究不同的实验方法对胚胎干细胞神经分化的影响。用4-/4+分化程序进行胚胎干细胞的神经分化时,饲养层细胞的存在对类胚体的形成无影响,在神经分化的13d,仍可观察到46C细胞的Sox1-GFP绿色荧光,此时的免疫染色结果显示,分化细胞中除了有Nestin阳性的神经干细胞及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性的神经胶质细胞外,以β-tubulin 阳性神经元细胞最为多见,这些神经元呈现出多种形态;用单层分化法进行胚胎干细胞(ES)细胞的神经分化至13d时,分化形成的神经细胞种类与类胚体法相同,但神经元的细长纤维形成了复杂的网状结构,提示两种分化方法获得的神经元处于不同发育阶段。研究结果表明,两种分化方法均能为ES细胞提供从神经分化的起始到继续分化所需的环境,EB分化法适合于大量地获取分化的细胞,而单层分化法可直观地研究分化过程的细胞变化。; 蒙超衡石德顺韦力黄奔韦精卫; 关键词：胚胎干细胞神经分化

黄牛体细胞核移植初步研究: 2004年; 对牛体细胞核移植的有关影响因素进行了系统研究,结果表明,电场强度为100v/mm,电脉冲2次,脉冲时间为10μs的融合率显著高于30μs的融合率,囊胚发育率差异不显著;在耳部成纤维细胞的注核微滴中添加7%乙醇可提高重组胚的卵裂率,供体细胞的预激活可提高核移植效果;T 期(第二次减数分裂末期)去核卵母细胞核移植总囊胚率低于M 期(第二次减数分裂中期)去核卵母细胞的,T 期去核卵母细胞的核移植效果不如M 期去核卵母细胞的;成纤维细胞直接注射后3h用离子霉素(5μmol/L,5min)和6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP,2mmol/L,3h)激活处理的重组胚发育率显著高于注核后0h和6h激活的重组胚,供体细胞核与受体卵母细胞激活前的胞质因子互作一段时间,有利于核移植胚胎的早期发育。; 韦精卫孟凡丽韦英明杨素芳石德顺; 关键词：黄牛颗粒细胞血清饥饿核移植

水牛胎牛、青年牛和成年牛腔前卵泡的分离及培养被引量：3: 2003年; 本研究采用梳刮的机械法分离水牛胎牛、青年牛和成年牛腔前卵泡,并分别进行培养。每个胎牛、青年牛和成年牛的卵巢分别获得943.43±143.13、249.50±40.11和128.50±19.99个腔前卵泡,从胎牛卵巢获得的腔前卵泡,其数量明显多于青年牛和成年牛(P<0.01)。培养72h后青年牛和成年牛的腔前卵泡存活率分别为52.67%、52.03%,而胎牛仅有34.69%的腔前卵泡能够存活,其数量明显低于青年牛和成年牛(P<0.05)。结果表明,青年牛卵巢分离得到的腔前卵泡数量较多,且培养成活率高,是进行水牛腔前卵泡分离培养等研究的理想试验材料。; 潘红平石德顺冯贵雪; 关键词：水牛胎牛青年牛成年牛腔前卵泡

一例体细胞克隆黄牛肺脏的组织结构观察被引量：3: 2009年; 作者应用石蜡切片及HE染色技术对体细胞克隆黄牛的肺脏及其细胞类型和形态进行了详细的观察。结果表明,光镜下,该体细胞克隆黄牛肺脏的组织结构与自然繁殖的黄牛肺脏的组织结构基本一致,包括支气管、细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气管、肺泡管、肺泡囊及肺泡等结构,但体细胞克隆黄牛的细支气管管壁内的皱壁消失,其黏膜以单层立方上皮为主;肺泡处于半充容状态,肺泡腔狭小,肺泡膈较厚,其中含有较多胶原纤维和弹性纤维。肺泡壁的细胞结构不清,肺泡腔内有内容物,可能是发生病变引起。; 王晓丽韦精卫房慧伶孟凡丽辛立江向长剑石德顺; 关键词：体细胞克隆黄牛肺脏

兔细胞核移植研究(英文): 本研究对兔胚胎细胞核移植的有关影响因素进行了系统研究。当电场强度为100v/mm,15μs时,电脉冲3次和4次的融合率(81.7%和85.5%)显著高于电脉冲2次(64.1%,P<0.05),虽然融合后的分裂率(77.4...; 崔奎青刘庆友石德顺; 关键词：胚胎核移植; 文献传递

一例体细胞克隆黄牛肺脏的组织结构观察: 应用石蜡切片及HE染色技术对体细胞克隆黄牛的肺脏及其细胞类型和形态进行了详细的观察。结果表明:光镜下,该体细胞克隆黄牛肺脏的组织结构与自然繁殖的黄牛肺脏的组织结构基本一致,包括支气管、细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气...; 王晓丽韦精卫房慧伶孟凡丽辛立江向长剑石德顺; 关键词：体细胞克隆肺脏黄牛; 文献传递

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国家高技术研究发展计划(2002AA206605)