国家教育部博士点基金(20070558281)
- 作品数：8 被引量：29H指数：3
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- 灵芝孢子油对N-甲基-N-亚硝酸脲诱导的大鼠视网膜损伤中Caspase-3表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的观察灵芝孢子油(ganoderma spore oil,GSO)对N-甲基-N亚硝酸脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导的视网膜外核层细胞损伤的作用及对Caspase-3时空表达的影响。方法50d♀SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、MNU造模(MNU)组、二十二碳六烯酸处理(DHA)组和灵芝孢子油处理(GSO)组。各组分别于MNU造模前0h及造模后1d、3d、7d、10d处死大鼠取材,采用RT-PCR、免疫荧光技术检测视网膜中Caspase-3表达和分布的变化,TUNEL法检测视网膜细胞凋亡情况。结果①RT-PCR检测:与NC组比较,MNU组1d、3d、7d视网膜Caspase-3表达增强(P<0.01);GSO组和DHA组1d、3d低于MNU组(P<0.01),1dGSO组表达较DHA组低(P<0.01)。②免疫荧光检测:在3d,GSO组和DHA组Caspase-3表达水平低于MNU组,GSO组较DHA组稍弱。③TUNEL法检测:NC组在视网膜各层均未发现凋亡细胞,MNU造模后可见外核层细胞凋亡。GSO组和DHA组在1d、3d外核层细胞凋亡百分率少于对应的MNU组(P<0.01),3d GSO组低于DHA组(P<0.01)。结论灵芝孢子油可能通过下调视网膜Caspase-3的表达,阻抑MNU诱导的视网膜外核层光感受器细胞凋亡的作用。
- 高杨邓新国孙倩娜何梅凤钟志强
- 关键词：光感受器细胞凋亡灵芝孢子油二十二碳六烯酸
- 碘酸钠诱导大鼠视网膜损伤的病理改变和SOD、CAT的变化被引量：12
- 2010年
- 目的:探讨不同剂量碘酸钠诱导大鼠视网膜损伤过程中的病理形态改变及抗氧化系统中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的改变。方法:SD大鼠80只,随机分为4组(每组20只),即40mg/kg、50mg/kg、60mg/kg碘酸钠造模组和正常对照组。在造模后第1、4、7、14d取大鼠右眼进行病理检查;取左眼视网膜,检测SOD和CAT的活性。结果:病理结果显示,与对照组比较,第1d,40mg/kg和50mg/kg碘酸钠造模组视网膜各层未见损伤,60mg/kg碘酸钠造模组出现视网膜色素上皮层损伤、外核层细胞排列紊乱;第4、7、14d,各剂量组均出现明显损伤,且损伤程度比第1d和对照组明显加重,呈现外核层细胞波浪状改变和外核层厚度减少(P<0.05或P<0.01)。生化检测结果显示,与对照组比较,第1、4d,60mg/kg碘酸钠造模组视网膜组织SOD、CAT的活性均显著下降(P<0.05);第7、14d,各剂量组视网膜SOD、CAT活性均呈明显下降趋势(P<0.05或P<0.01)。结论:40mg/kg、50mg/kg和60mg/kg的碘酸钠均可导致大鼠视网膜色素上皮层和外核层细胞损伤,并使大鼠视网膜抗氧化系统受损。碘酸钠用量越大,视网膜细胞损伤出现时间越早、程度越重。
- 朱颖婷邓新国高杨何梅凤李娜
- 关键词：视网膜色素变性过氧化氢酶
- N-甲基-N亚硝脲诱导的大鼠视网膜损伤过程中光感受器间维生素A类结合蛋白和恢复蛋白的表达变化
- 2013年
- 观察N-甲基-N亚硝脲（MNu）诱导的大鼠视网膜损伤对光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）和恢复蛋白（recoverin）在视网膜中的表达变化。方法雌性Sprague—Dawley大鼠30只随机分为正常对照组和MNU处理1、3、7、10d组，每组均为6只大鼠。不同时间MNU处理组大鼠按体重40mg／kg给予一次性腹腔注射MNU；正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水5ml／kg。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫荧光检测各组大鼠视网膜中IRBP和恢复蛋白的mRNA及蛋白表达。结果RT—PCR检测结果显示，与正常对照组比较，不同时间MNU处理组IRBP的mRNA表达水平随MNU作用时间增加而逐渐降低，差异均有统计学意义（P〈O．01）；恢复蛋白的mRNA表达水平随MNU作用时间增加而逐渐升高。MNU处理ld组恢复蛋白的mRNA表达水平与正常对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；MNU处理组3、7、10d组恢复蛋白的mRNA表达水平与正常对照组比较，差异均有统计学意义（P〈O．05）。免疫荧光显微镜观察结果显示，正常对照组大鼠视网膜IRBP主要表达在光感受器细胞内、外节；不同时间MNU处理组IRBP在视网膜各层均有表达并随MNU作用时间增加而逐渐降低。恢复蛋白阳性标记物主要见于视网膜内核层、内丛状层及节细胞层，随MNU作用时间增加恢复蛋白的表达逐渐增强。结论MNU可降低IRBP的表达，但增加恢复蛋白的表达。
- 高杨邓新国李娜
- 关键词：视网膜疾病病理生理学中毒载体蛋白质类
- MNU诱导的视网膜光感受器细胞损伤过程中视网膜VEGF表达的变化被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤过程中视网膜血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化。方法:50d龄雌性SD大鼠55只,随机分5组,正常组和造模组(分4个组),造模组40mg/kgMNU单次腹腔注射,在注射后1d、3d、7d和10d取眼球立即分离视网膜以提取总RNA,通过RT-PCR检测VEGF mRNA的表达情况;摘取眼球进行冰冻切片,免疫荧光技术检测VEGF蛋白质在视网膜中的表达以及分布的变化。结果:RT-PCR检测结果表明,与正常对照组比较,MNU造模后1d,VEGF mRNA的表达均较强,3dVEGF表达最高,P<0.01;7d和10d恢复正常,无明显差异,P>0.05。免疫荧光检测结果显示,VEGF蛋白质表达与RT-PCR检测结果基本一致,VEGF蛋白质在视网膜各层均有表达,造模后1d和3d,外核层损伤较重,外核层VEGF的表达明显增强。结论:MNU诱导的视网膜光感受器细胞损伤可使VEGF的表达增强,提示VEGF可能参与MNU诱导的视网膜光感受器细胞的损伤修复。
- 邓新国高杨何梅凤孙倩娜钟志强
- 关键词：N-甲基-N-亚硝脲光感受器
- Rhodopsin和S-opsin在MNU诱导的大鼠视网膜损伤过程中的表达变化被引量：1
- 2010年
- 目的:观察在N-甲基-N亚硝酸脲(MNU)诱导的大鼠视网膜外核层细胞损伤过程中视紫质(rhodopsin)和蓝光视蛋白(blue-sensitive opsin/S-opsin)在视网膜中的表达变化,分析其与MNU诱导的视网膜损伤的关系。方法:将30只SPF级50 d龄雌性SD大鼠随机分为正常对照组和MNU模型1、3、7、10 d组,每组各6只大鼠。模型组以腹腔注射MNU(40 mg/kg)建立MNU模型;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水(5 mL/kg)。右眼冰冻切片行苏木素-伊红(HE)染色判断视网膜损伤程度。通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光检测各组视网膜中rhodopsin和S-opsin的mRNA及蛋白表达情况。结果:病理检测确定造模结果与以往实验一致,各组病理分级之间的差异显著(2=16.838,P<0.01)。RT-PCR检测结果表明,与正常对照组相比,各MNU模型组rhodopsin和S-opsin的mRNA表达水平随MNU作用时间增加而逐渐降低且差异均显著(rhodopsin 1 d组P<0.05;S-opsin 1 d组P<0.01;3、7、10 d组rhodopsin和S-opsin均P<0.01)。免疫荧光检测结果显示,在正常大鼠视网膜rhodopsin主要在光感受器细胞外段表达,MNU作用后rhodopsin主要在外核层表达,少量在内核层表达,并随MNU作用时间增加而逐渐表达降低。S-opsin在正常视网膜各层均有表达,在各模型组随MNU作用时间增加S-opsin的表达逐渐降低,在外核层和光感受器细胞内、外段尤为明显。结论:MNU诱导的视网膜外核层细胞损伤可降低rhodopsin和S-opsin的表达,并与MNU选择性引起光感受器细胞丧失有关。
- 高杨邓新国李娜
- 关键词：SD大鼠视网膜视紫质
- 灵芝孢子油对N-甲基-N-亚硝脲诱导大鼠视网膜光感受器细胞损伤的影响被引量：8
- 2009年
- 目的探讨灵芝孢子油对N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的大鼠视网膜光感受器细胞变性动物模型的治疗作用,为防治视网膜变性提供一种有价值的现代化中药。方法大鼠随机分为5组,对照组、灵芝孢子油治疗组、二十二碳六烯酸(DHA)治疗组、灵芝孢子油+DHA治疗组和模型组,在造模前2 d用不同的药物ig给药,第3天采用40 mg/kg MNU单次剂量ip造模,造模后继续ig给药至第10天,造模后1、3、5、7、10 d进行视网膜电图(ERG)检查,并取眼球进行眼病理检查。结果不同用药组各时间点的b波振幅明显高于模型组(P<0.05、0.01);灵芝孢子油组的a波振幅明显高于模型组(P<0.05),但与DHA组和灵芝孢子油+DHA组相比较,无明显差异(P>0.05)。眼病理结果,不同用药组在各个时间点与相应的模型组比较,MNU诱导的大鼠视网膜光感受器损伤均明显减轻(P<0.05)。结论灵芝孢子油和DHA可减轻MNU对大鼠视网膜光感受器细胞的损伤程度,促进MNU诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤的功能恢复。
- 邓新国林晓峰高杨孙倩娜钟志强
- 关键词：灵芝孢子油光感受器细胞视网膜色素变性
- 盐酸川芎嗪滴眼液在兔眼房水中的药动学研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨兔眼局部应用盐酸川芎嗪滴眼液后在房水中的药代动力学特征。方法将新西兰白兔27只,随机分为9组,分别于兔眼滴入盐酸川芎嗪滴眼液50μL,并于不同时间点抽取房水。采用高效液相色谱法测定盐酸川芎嗪浓度,DAS2.1.1软件拟合药代动力学参数。结果兔眼滴用盐酸川芎嗪后,盐酸川芎嗪在房水中的浓度变化呈二室模型,盐酸川芎嗪在房水中的药代动力学参数分别为达峰浓度(Cmax),(16.202±2.564)μg/mL;达峰时间(Tmax),0.083 h;吸收相半衰期(t1/2α),(0.509±0.179)h;消除相半衰期(t1/2β),(0.857±0.278)h;曲线下面积(AUC),(14.584±2.950)μg.h/mL。结论盐酸川芎嗪滴眼后能快速渗透到房水中,且浓度较高,但消除也较快。
- 何梅凤邓新国吴伟高杨
- 关键词：川芎嗪房水
- 半胱氨酸蛋白酶3、bax和bcl-xl在N-甲基-N亚硝酸脲诱导的大鼠视网膜损伤后的表达被引量：2
- 2009年
- 目的观察N-甲基-N亚硝酸脲（MNu）诱导的大鼠视网膜损伤过程中凋亡相关分子半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、bcl-2相关X蛋白（bax）和B细胞淋巴瘤／白血病-xl（bcl-x1）在视网膜中的时空表达，探讨其在MNU诱导的视网膜损伤中的作用。方法将鼠龄50d的30只SPF级雌性SD大鼠随机分为MNU模型组（24只大鼠）和正常对照组（6只大鼠）。模型组按40mg／kg的剂量腹腔注射MNU建立MNU模型；正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水5ml／kg。模型组大鼠根据MNU注射后不同处死时间再分为1、3、7、10d组，每小组各6只大鼠。正常对照组大鼠注射后3d处死。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组视网膜中caspase-3、bax和bcl-xl的基因表达情况；免疫荧光技术检测其在视网膜中的表达以及分布的变化，并用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导dUTP缺口末段标记（TUNEL）法检测视网膜细胞凋亡的变化。结果经病理学检测确定造模成功。RT-PCR检测结果表明，[与正常对照组相比（caspase-3和bax的相对吸光度（RA）值为62．45±7．65、46．53±4．41]，MNU模型1d组caspase-3（83．23±8．11，P=0．009）和bax（72．73±9．46，P=0．004）的表达均增强，3d组二者表达水平均最高（caspase-3RA=140．48±18．40，P=0．000；bax RA=102．36±13．97，P=0．001），10d组caspase-3的表达水平（RA=47．32±5．37，P=0．027）低于对照组，而10dbax的表达（RA=48．27±4．40，P=0．997）基本恢复至对照组水平；bcl-xl在4个造模组中的表达水平（1dRA=63．29±4．29，P=0．000；3dRA=79．83±5．58，P=0．000；7dRA=70．19±4．42，P=0．000；10dRA=66．05±4．97，P=0．000）均高于正常对照组（RA=45．98±3．06），3d组的表达水平最高。MNu诱导后1、3、7d组的bax／bcl-xl比值（1d为1．15±0．14，P=0．143；3d为1．28±0．16，P=0．001；7d为1．17±0．08，P=0．079）大于对照组（1．01±0．09），
- 高杨邓新国孙倩娜何梅凤钟志强
- 关键词：半胱氨酸内肽酶类BCL-2相关X蛋白质
