国家自然科学基金(30571248)
- 作品数:5 被引量:49H指数:3
- 相关作者:冯从经董秋安吕文静符文俊陆剑锋更多>>
- 相关机构:扬州大学中国科学院上海生命科学研究院合肥工业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程更多>>
- 低温处理对亚洲玉米螟幼虫抗寒性的诱导效应被引量:21
- 2007年
- 室内条件下将亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis(Guen啨e)幼虫放置在5℃(LT1处理组)和0℃(LT2处理组)下低温处理2h后,分别测定了其低温诱导识别温度、存活率、抗寒性、过冷却点、体内水分和脂质含量百分率,并进行抗冻特异蛋白的诱导;利用SDS-PAGE方法分析了低温诱导后亚洲玉米螟5龄幼虫血清中抗冻特异蛋白。结果表明:亚洲玉米螟3、4和5龄幼虫的低温诱导识别温度分别为-13·5℃、-16·5℃和-18·5℃;3、4和5龄幼虫存活率LT2组>LT1组>对照组(P<0·05);随虫龄增加,幼虫抗寒性逐步增强;对幼虫过冷却点无明显影响(P>0·05);幼虫水分和脂质含量百分率为LT2组>LT1组>对照组,且随虫龄增加,虫体含水率和脂质含量百分率增高(P<0·05);低温诱导产生了一种分子量约为29·0kD的抗冻特异蛋白。研究结果表明低温诱导可以增强亚洲玉米螟幼虫的抗寒性。
- 冯从经吕文静董秋安陈俊符文俊
- 关键词:亚洲玉米螟抗寒性过冷却点
- 亚洲玉米螟幼虫酚氧化酶原基因序列的生物信息学分析被引量:4
- 2009年
- 酚氧化酶原PPO是昆虫免疫的关键酶,本文从生物信息学角度对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis Guen啨e幼虫PPO进行分析,为进一步研究其高级结构与功能的关系提供理论依据。利用我们已提交到GenBank的数据,采用在线分析及MEGA4和RasMol软件对亚洲玉米螟酚氧化酶原(Of-PPO)的核苷酸和氨基酸序列、系统发生关系和蛋白质三级结构进行分析。结果表明:Of-PPO全长cDNA序列有2686bp,包含一个2079bp的开放阅读框,其推导的693个氨基酸序列中包含6个组氨酸残基构成的2个铜离子结合位点,以及保守的硫羟酸酯区域。Of-PPO属于PPO2类群,其N端不含信号肽,无跨膜结构域区域,无糖基化位点,44个磷酸化位点均匀分布于整个多肽链中,有2段序列可能形成卷曲螺旋,有5个区域的氨基酸具较强疏水性,其二级结构中α-螺旋占22.54%,随机卷曲占56.79%。同源建模显示其三级结构为"α/β型"中的"滚筒结构",存在一个明显的空位,可能与该酶催化活性有关。本文可为Of-PPO的实验研究和应用开发提供有价值的信息。
- 冯从经陆剑锋黄建华郭晓丽桑守亮
- 关键词:亚洲玉米螟酚氧化酶原生物信息学分析同源建模
- 亚致死剂量双氧威和虫酰肼对亚洲玉米螟幼虫生长发育的影响被引量:21
- 2008年
- 测定亚致死剂量昆虫生长调节剂双氧威和虫酰肼对亚洲玉米螟5龄幼虫发育历期、化蛹率、体重、脂质含量及血清中糖和蛋白含量的影响。结果表明:双氧威LC30、LC20、LC10依次为22.23、14.75、4.37μg/mL,虫酰肼LC30、LC20、LC10依次为48.20、37.11、21.73μg/mL。LC30亚致死剂量双氧威处理可使5龄幼虫的发育历期延长至8.33±0.69天,而虫酰肼处理则使其缩短至5.49±0.66天。亚致死剂量双氧威和虫酰肼处理均使幼虫体重及化蛹率明显降低(P<0.01),其体内脂质含量和血清中糖和蛋白含量也低于对照组(P<0.01),同时5龄幼虫血清中储存蛋白的合成受到抑制。
- 冯从经陆剑锋董秋安符文俊
- 关键词:亚致死剂量虫酰肼亚洲玉米螟生长发育
- 一种酚氧化酶原组织定位的胶体金标记免疫电镜方法被引量:1
- 2010年
- 以亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis Guenée5龄幼虫的中肠和体壁组织为材料,采用Epon812常规包埋方法,以作者实验室制备的酚氧化酶原多克隆抗体为一抗、胶体金标记的羊抗鼠IgG为二抗,采用醋酸双氧铀-柠檬酸铅双染色体系,建立一种胶体金标记的特异性强且超微结构保存较好的亚洲玉米螟幼虫体内中酚氧化酶原免疫电镜定位方法。
- 冯从经吕文静
- 关键词:亚洲玉米螟酚氧化酶原胶体金免疫电镜
- 亚洲玉米螟幼虫血淋巴中酚氧化酶原的多克隆抗体制备及免疫学特性分析被引量:2
- 2009年
- 为探讨酚氧化酶原(PPO)的合成转运机制,采用硫酸铵沉淀、Blue Sepharose CL-6B亲和层析和Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析等方法从亚洲玉米螟幼虫血淋巴中纯化得到PPO,纯化倍数为369.85,回收率为35.34%。采用免疫印迹和酶联免疫吸附进行纯化PPO的免疫原性及其多克隆抗体的效价测定,并以透射电镜检测PPO在亚洲玉米螟幼虫体壁和中肠中的分布。结果表明,纯化PPO蛋白全酶相对分子量约为158 kD;免疫2只鼠后所得pAb间接ELISA效价均高达10-5,其中第2号小鼠pAb效价最高为1∶4.08×104;PPO多克隆抗体具有相对较高的特异性;在亚洲玉米螟5龄幼虫中肠和体壁组织中金颗粒呈团状和点状分布。
- 冯从经董长生吕文静董秋安郭晓丽桑守亮
- 关键词:亚洲玉米螟酚氧化酶原多克隆抗体酶联免疫吸附免疫电镜