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木那格葡萄快速繁殖及愈伤组织的诱导和继代被引量：4: 2006年; 研究了木那格葡萄快速繁殖并确定了木那格葡萄愈伤组织诱导和继代的适宜条件。将木那格葡萄种子无菌处理,获得无菌幼苗,以单芽茎段为外植体,对木那格葡萄快速繁殖条件进行优化；以叶片为外植体,确定愈伤组织诱导和继代的适宜条件。结果表明：使用70%乙醇灭菌30s,0．1%升汞灭菌3min,使用浸湿的滤纸培养,适宜木那格葡萄种子萌发,萌发率为70%；适宜单芽茎段不定芽再生的培养基为B5+6-BA 0．05mg/L+IBA 0．3mg/L+蔗糖30g/L,不定芽增殖倍数为1．25；适宜不定芽生根的培养基为B5+IBA 0．2mg/L+蔗糖30g/L,平均单芽生根数为5．09,平均根长2．97cm；适宜愈伤诱导的培养基为B5+6-BA1．5mg/ L+NAA 0．2mg/L+蔗糖30g/L,愈伤诱导率为100%；适宜愈伤继代的培养基为B5+6-BA 1mg/L+2,4-D 0．1mg/L+蔗糖30g/L。; 吕惠平王起才马纪; 关键词：葡萄快速繁殖愈伤组织

水浮莲无菌苗的获得及其培养体系的优化被引量：5: 2008年; 为了有效地进行水浮莲(Pistia stratiotes)的基因工程改造,达到利用水浮莲进行污染水体的植物修复,本研究建立了水浮莲无菌苗培养体系。采用二次消毒法获得水浮莲的无菌苗,并研究了萘乙酸(NAA)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、蔗糖、pH值对其生长的影响,确立了水浮莲的优化培养体系为:1/2 MS+6-BA 0.25mg/L+NAA 0.3mg/L+蔗糖20g/L,pH6.0。水浮莲在此培养基上可快速扩增和长期继代培养,无菌生长的水浮莲比温室中自然水浮莲的植株形态小,易于研究操作。; 蒋刚强王瑜兰海燕张富春马纪; 关键词：水浮莲无菌苗

准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5毕赤酵母表达产物的理化性质被引量：7: 2006年; 研究准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica Kasz抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物的功能及理化性质。首先用硫酸铵浓度梯度沉淀初步纯化酵母真核表达产物,然后通过细菌低温保护实验检测抗冻蛋白MPAFP5低温保护功能,同时探讨抗冻蛋白MPAFP5在酸碱环境和100℃时的稳定性,并通过等电聚焦凝胶电泳检测其等电点。研究表明MPAFP5真核表达产物在低温下能够提高细菌的存活率,能够耐受高温和一定程度的强酸强碱,其等电点约为5.8左右。准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物与赤翅甲抗冻蛋白(DAFP)的比较表明拟步甲类昆虫抗冻蛋白具有相似的理化性质。; 吕国栋孙洁马纪张富春; 关键词：准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白理化性质等电点

新疆准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因的克隆和抗冻活性分析被引量：35: 2005年; 根据GenBank中已发表的昆虫抗冻蛋白基因的保守序列设计引物,利用RT-PCR技术结合3’-RACE扩增的方法,从新疆荒漠昆虫准噶尔小胸鳖甲Microderapunctipenisdzunarica中获得了长约294bp不含信号肽的抗冻蛋白cDNA片段,命名为MpAFP5,其全长序列为363bp(GenBank注册号为AY821792)。基因测序结果表明,MpAFP5cDNA片段与加拿大拟步甲DendroidescanadensisAFP8基因片段、黄粉甲TenebriomolitorTHP4-9基因片段的核苷酸同源性分别达68.4%和71.8%,氨基酸序列同源性分别达70%和81%。将MpAFP5构建到原核表达载体pGEX4T-1中,重组质粒pGEX4T-1-MpAFP5在大肠杆菌BL21(DE3)中能够表达融合抗冻蛋白,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约为37kD,Western印迹分析证明MpAFP5在大肠杆菌中正确表达。细菌的抗冻实验结果显示准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白对细菌具有显著的抗冻保护作用,保护效果与抗冻蛋白剂量呈正相关性。; 赵干马纪薛娜杨长庚专芳芳张富春; 关键词：准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白 RT-PCR 抗冻活性

新疆荒漠昆虫光滑鳖甲cDNA文库的构建及功能基因筛选被引量：10: 2006年; 以过冬后早春的新疆荒漠拟步甲属昆虫光滑鳖甲(Anatolica Polita borealis)成虫为研究材料,应用SMARTTM cDNA Library Construction技术,通过总RNA提取,反转录合成cDNA,定向构建至噬菌体载体λTripEx2,经体外包装构建了光滑鳖甲的cDNA表达文库。测试结果表明库容量为2.2×106,重组率为84.8%。通过对cDNA文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析,获得28个光滑鳖甲表达序列标签(ESTs),包括17个EST(60.7%)与NCBI中已注册的已知功能基因相似性较高,另外的11个EST(39.3%)则没有发现与之相似的序列,推测可能是功能未知的新基因。同时,利用PCR扩增文库技术从cDNA文库中克隆获得了光滑鳖甲的抗冻蛋白基因,初步表明光滑鳖甲cDNA表达文库构建的成功,为深入研究新疆荒漠昆虫的抗冻机理及发现新的昆虫功能基因奠定了基础。; 杨长庚张富春马纪; 关键词：光滑鳖甲 CDNA文库表达序列标签抗冻蛋白

昆虫抗冻蛋白的结构与生物学特性研究被引量：3: 2006年; 抗冻蛋白(antifreeze proteins AFPs)是一类抑制冰晶生长的蛋白质,它能以非依数性形式降低溶液的冰点而对其熔点影响甚微,因而也被称作热滞蛋白。近几年来对于昆虫抗冻蛋白的研究取得了较快的发展,已有20多种昆虫抗冻蛋白被分离纯化。就昆虫抗冻蛋白的结构特征、生物学特性以及在农业、医学和食品工业等方面的应用进行介绍。; 马纪赵干; 关键词：昆虫抗冻蛋白热滞活性生物活性

光滑鳖甲热休克蛋白70基因的克隆及表达被引量：13: 2007年; 根据GenBank中发表的昆虫热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因的保守序列设计引物,利用PCR结合RACE扩增的方法,获得新疆荒漠昆虫光滑鳖甲Anatolica polita borealis热休克蛋白70基因,命名为APhsp70(GenBank注册号为EF569673)。测序结果表明,序列长为2 092 bp,由核酸序列推演出的蛋白质分子量为70 kD,含653个氨基酸残基。基因结构分析表明APhsp70不含内含子序列。通过Northern blotting和半定量RT-PCR技术研究昆虫在受到不同温度胁迫时该基因的表达规律,结果表明:在45℃处理时,昆虫体内该基因的表达水平显著上升。并且,当机体受到-5℃低温胁迫并在室温恢复15 min后APhsp70的表达量也显著升高;但是4℃和-10℃低温处理组APhsp70的表达未见明显变化。; 陈亮张富春黄萍马纪; 关键词：光滑鳖甲热休克蛋白70 克隆温度胁迫

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新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金(XJDX0201-200403)