中央高校基本科研业务费专项资金(CDJZR10290002)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：余泉友张泽房守敏鲁成左伟东更多>>
- 相关机构：重庆大学西南大学西华师范大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 家蚕谷胱甘肽-S-转移酶基因BmGSTz1的克隆、序列分析及组织表达特征被引量：7
- 2010年
- 谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)是一个功能广泛的超基因家族,其中Zeta家族在动物、植物和细菌中均有分布。在哺乳动物中,Zeta GSTs具有马来酰乙酰乙酸异构酶(MAAI)活性,参与苯丙氨酸/酪氨酸的代谢过程。本研究对家蚕Bombyxmori基因组中预测的GST基因(BmGSTz1)进行了表达序列标签的搜索,经拼接后获得一条含有3′和5′非翻译区在内的长度为1239bp的cDNA序列,其3′端含有AATAAA加尾信号。BmGSTz1基因含有4个内含子,外显子/内含子边界均符合GT-AG规则。经TA克隆证实,BmGSTz1基因编码区序列全长648bp,共编码215个氨基酸。BmGSTz1推定的分子量为24.8kD,等电点pI为8.06。BmGSTz1与其他昆虫和哺乳动物GSTz1的氨基酸序列高度保守,进化分析表明家蚕BmGSTz1与黑腹果蝇Drosophila melanogaster、冈比亚按蚊Anopheles gambiae、意大利蜜蜂Apismellifera和赤拟谷盗Tribolium castaneum的GSTz1形成1∶1∶1∶1∶1的直系同源关系。RT-PCR和基因芯片数据表明BmGSTz1在家蚕5龄第3天幼虫各组织中都有表达。序列和组织表达特征分析结果提示家蚕BmGSTz1可能具有MAAI活性,这将为进一步深入研究BmGSTz1基因的功能提供参考。
- 余泉友房守敏左伟东张泽鲁成
- 关键词：家蚕谷胱甘肽-S-转移酶CDNA克隆
- 家蚕谷胱甘肽-S-转移酶研究进展被引量：1
- 2010年
- 谷胱甘肽-S-转移酶在内外源有毒物质的代谢中起着重要作用。家蚕既是重要的经济昆虫,也是重要的模式生物。家蚕作为鳞翅目昆虫的模式生物,研究家蚕谷胱甘肽-S-转移酶,对于阐明谷胱甘肽-S-转移酶与杀虫剂抗性的关系,防治农林害虫有着重要的理论意义。本文就谷胱甘肽-S-转移酶在家蚕中的研究现状作了归纳,希望对今后谷胱甘肽-S-转移酶的研究能有所帮助。
- 刘劲房守敏赵敏余泉友
- 关键词：谷胱甘肽-S-转移酶抗药性害虫防治家蚕
- 家蚕羧酸酯酶基因Bmae35的克隆、序列分析及表达被引量：3
- 2011年
- 昆虫羧酸酯酶是一类能对外源化合物解毒和气味分子降解的重要酶系。本研究选取在家蚕Bombyx mori幼虫嗅觉感器中有表达,并与蛀茎夜蛾Sesamia nonagrioides触角酯酶基因Snon-EST可能为直系同源基因的Bmae35进行克隆和外源表达研究。结果表明:该基因编码区长1581bp,共编码526个氨基酸。与其他昆虫触角酯酶的多序列比对分析发现,Bmae35编码的蛋白具有酯酶活性必须的催化残基Ser191,Glu313和His429,也保持着α-酯酶家族特征基序Gly-x-Ser-x-Gly。RT-PCR分析显示,Bmae35在家蚕5龄第3天各组织中均有表达,其中在头、脂肪体、马氏管、体壁和丝腺中的表达量较高。Bmae35在雌蛾性信息腺中表达,并与性信息素合成呈正相关,暗示其在信息素合成中起重要作用。构建Bmae35与pET28(a)重组载体,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,电泳检测发现该基因以包涵体形式表达,以镍亲和层析柱纯化,Western blotting鉴定证实Bmae35在大肠杆菌Escherichiacoli中正确表达并得以纯化。本实验通过对家蚕Bmae35基因的克隆、原核表达与纯化,为进一步深入研究其表达定位和气味降解等功能奠定基础。
- 杨微齐登伟余泉友张泽
- 关键词：家蚕羧酸酯酶基因克隆原核表达蛋白免疫印迹
- 家蚕中肠羧酸酯酶基因的克隆及用槲皮素和有机磷杀虫剂诱导后的表达变化被引量：1
- 2013年
- 昆虫羧酸酯酶(carboxylesterases,COEs)在昆虫降解杀虫剂和代谢植物次生物质的过程中起重要作用。克隆了家蚕中肠特异表达的4个羧酸酯酶α-家族基因Bmae2、Bmae17、Bmae18和Bmae27。序列分析表明Bmae2和Bmae17编码的蛋白质均具有酯酶活性必需的催化残基Ser、Glu、His以及α-酯酶/β-酯酶家族的特征基序Gly-x-Ser-x-Gly,而Bmae18与Bmae27编码蛋白质的Ser残基分别突变为Asp和Gly残基,推测Bmae2和Bmae17具有酯酶的水解活性。4龄起蚕分别添食4种浓度的槲皮素(quercetin)后,通过半定量RT-PCR和定量PCR检测4个COEs基因在各处理组家蚕中肠中的表达均有显著上调,最大诱导表达量分别为对照组的6.90、2.21、1.30、8.78倍。分别用亚致死剂量的有机磷农药辛硫磷、敌敌畏和毒死蜱处理5龄第2天幼虫,检测中肠COEs活性均显著增强。通过半定量RT-PCR和定量PCR检测发现:Bmae17和Bmae27在低浓度辛硫磷处理的3 d内均上调表达,与酶活性检测结果基本一致,推测这2个基因可能主要参与了对辛硫磷的解毒作用;敌敌畏处理组家蚕只在处理第3天时中肠中的Bmae17、Bmae18和Bmae27的表达呈现诱导上调,在处理后的前2 d呈现出表达被抑制或与对照组无显著差异的现象,毒死蜱处理组也出现了类似现象,与酶活性检测结果不完全一致,推测与在中肠表达的其它COEs参与了对这2种农药的解毒作用有关。研究结果为进一步深入研究家蚕中肠COEs基因的解毒机制奠定了一定基础。
- 李国印余泉友张泽
- 关键词：家蚕羧酸酯酶基因克隆有机磷杀虫剂槲皮素
