国家自然科学基金(81200528)
- 作品数：7 被引量：39H指数：4
- 相关作者：孙吉平李利利尹爱萍张文静尹爱平更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学更多>>
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- 尿脱落足细胞与IgA肾病的相关性研究被引量：7
- 2014年
- 目的探讨尿脱落足细胞与IgA肾病患者临床、病理变化及其严重程度的相关性,以期指导治疗及评估预后。方法收集IgA肾病患者尿液,通过间接免疫荧光法检测尿中足细胞Podocalyxin蛋白表达判断尿脱落足细胞数量,并通过多因素逐步线性回归分析尿脱落足细胞与IgA肾病活动性或疾病进展的相关性。结果①尿脱落足细胞数量:IgA肾病患者显著高于对照组(P<0.01);不同程度蛋白尿组中尿中脱落足细胞数量有统计学差异(P<0.05);②相关性分析结果显示:尿脱落足细胞与IgA肾病活动性指标如破坏肾小球毛细血管袢活动性指数(dGAI)、肾小球慢性病变指数(GCI)、肾间质炎症细胞浸润指数(infI)、肾小管萎缩和肾间质纤维化指数(TCI)、小动脉慢性病变指数(VCI)、总评分、肾间质损害程度及肾间质评分之间均呈显著的正相关(R分别为0.225、0.325、0.243、0.335、0.226、0.409、0.511和0.262,P分别为0.003、0.001、0.017、0.001、0.027,<0.001、<0.001、<0.001);③逐步线性回归分析显示,24h尿蛋白定量、收缩压、舒张压、以及dGAI指数、TCI指数进入尿脱落足细胞回归方程。结论尿足细胞脱落在一定程度上可以提示IgA肾病的活动性病变,并与肾小管间质损害相关,有可能作为反映疾病进展的重要指标。
- 李利利杨浩杰张文静尹爱平孙吉平
- 关键词：IGA肾病
- 阻断Notch信号通路促骨髓间质干细胞体外分化为胰岛样细胞被引量：1
- 2014年
- 目的通过Notch信号途径抑制剂DAPT构建Notch信号敲除模型，探讨Notch信号通路在骨髓问质干细胞（BMSCs）体外分化为胰岛样细胞中的作用。方法体外分离培养BMSCs并鉴定，体外诱导其分化。用ν-分泌酶特异性抑制剂DAPT阻断Notch信号通路。采用双硫腙（DTZ）染色法鉴定胰岛细胞；间接免疫荧光染色，RT—PCR和Western印迹等方法检测诱导后细胞的胰岛素、胰高血糖素、胰十二指肠同源框1基因（Pdx-1）和神经元素3（Ngn3）的表达。ELISA法检测细胞葡萄糖刺激后分泌胰岛素水平。结果（1）BMSCs鉴定：间接免疫荧光染色结果显示：BMSCs表达CD59和CD90抗原，体外可表达神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）等神经细胞标记物，证实其具多向分化潜能。（2）MTr结果显示：ν-分泌酶抑制剂（DAPT）可抑制BMSCs增殖，其效应有时间和剂量依赖性。并以剂量和时间依赖性方式抑制Notch信号通路靶基因Hcsl的表达。用1、5、20μmol DAPT处理96h后细胞的Hesl表达分别为对照组的92．06％、71．40％、46．89％，提示其对Notch信号通路阻断率分别达到7．94％、28．6％和53．11％（均P＜0．05）。（3）间接免疫荧光结果显示：DAPT阻断组的胰岛素和胰高血糖素阳性细胞百分比较对照组明显增多[分别为（74．03±3．96）％比（36．49±3．24）％；（64．81±4．37）％比（37．50±3．69）％，均P＜0．051。提示阻断Notch信号通路后BMSCs体外分化效率增加。（4）RT-PCR和Western印迹结果提示：BSMCs诱导14d后可以检测到胰岛素、胰高血糖素表达，DAPT阻断后上述蛋白表达上调；BMSCs诱导早期（7d）即表达Pdx-1和Ngn3，14d后达到高峰，之后逐渐下降。DAPT阻断后Pdx-1和Ngn3的表达增加。（5）ELISA结果显示：诱导后细胞对葡萄糖刺激有分泌胰岛素反应，DAPT阻断后诱导细胞的反应更好。结论大鼠BM
- 张一婷尹爱平李利利孙吉平
- 关键词：间质干细胞骨髓胰岛NOTCH信号
- 淋巴细胞表型和细胞因子表达谱与IV型狼疮性肾炎患者免疫学发病机制被引量：8
- 2014年
- 目的:通过研究外周血淋巴细胞亚群表达及细胞因子表达谱,探讨IV型狼疮性肾炎(LN)免疫发病机制。方法:30例经肾活检证实为IV型LN患者及30例肾活检证实为V型LN患者、30例年龄、性别匹配的健康对照均留取静脉血,分离血清,通过抗体芯片技术同时检测4种Th1细胞因子(INF-γ,IL-1,IL-2和TNF-α)和5种Th2细胞因子(IL-4,IL-5,IL-6,IL-10和IL-13)的表达;流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚型表达;Pearson相关性分析研究淋巴细胞亚型和细胞因子表达与临床指标之间的相关性。结果:IV型LN患者存在明显的贫血(P<0.001)、低补体血症及低白蛋白血症(P<0.05)。IV型LN患者CD3+细胞比率和计数与对照组之间无明显改变,但CD4+细胞比率和计数明显低于对照组(P<0.01);由于CD8+细胞与对照组无显著差异,从而出现CD4+/CD8+比值倒置(P<0.01);CD20+细胞比率及计数略高于对照组(P<0.05);但CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞比率及计数显著低于对照组(P<0.001);与V型LN患者相比,IV型LN患者淋巴细胞表型异常更显著,尤其表现在CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)。与对照组相比,IV型LN患者体内存在广泛的细胞因子异常,检测的9种细胞因子中有7种明显升高,其中包括3种Th1细胞因子INF-γ(P<0.05),IL-2(P<0.05),TNF-α(P<0.01)和4种h 2细胞因子IL-4(P<0.05),IL-6(P<0.05),IL-10(P<0.01),IL-13(P<0.01);与IV型LN不同,V型LN仅有4种细胞因子表达上调,其中除IL-2属于Th1细胞因子外,其余3种为Th2细胞因子,包括IL-4,IL-10和IL-13。Pearson相关分析显示:调节性T细胞比率与多种临床指标之间存在负相关,包括24 h尿蛋白定量、antidsDNA滴度、疾病活动性指数等(r分别为-0.781,-0.746,-0.646;P<0.05);IL-5与anti-dsDNA滴度、血肌苷呈正相关(P<0.05),与补体C3呈负相关(P<0.05);IL-10与SLEDAI呈正相关(P<0.01),与尿蛋白、血红蛋白浓度均呈负相关(分别P<0.05和<0.001);IL-13与尿蛋白浓度呈负相关(r=-0.769,P<0.05);而V型LN患者
- 孙吉平赵菲张文静尹爱平
- 关键词：狼疮性肾炎TH1细胞因子TH2细胞因子淋巴细胞
- 不同性别原发性IgA肾病患者临床病理特征的对比分析被引量：9
- 2017年
- 目的探讨不同性别原发性IgA肾病患者的临床病理特点。方法对经肾脏活检确诊的192例IgA肾病患者不同性别的临床表现、实验室检查及肾脏病理进行对比分析。结果男性患者发病年龄高于女性,肾活检前病程长于女性,水肿的比例低于女性,差异有统计学意义(P<0.05)。肾脏穿刺时,男性平均动脉压、血红蛋白、24h尿蛋白定量高于女性,男性高血压、高尿酸血症、高甘油三酯血症比例高于女性;而男性肾小球滤过率(eGFR)低于女性,差异有统计学意义(P<0.05)。临床病理类型的性别分布差异有统计学意义(χ~2=12.666,P<0.05),均以U-ab型、MP型为主;24h尿蛋白、CKD分组的性别分布差异有统计学意义(Z=-3.118、Z=-3.246,P<0.05)。病理Lee分级、免疫荧光类型无性别分布差异(Z=-1.881,χ~2=-0.187,P>0.05);肾小管-间质病变分级(TIL分级)的性别分布差异有统计学意义(Z=-3.0432,P<0.05);肾小球硬化评分、肾小管间质评分两指标均为男性高于女性(P<0.05)。结论原发性IgA肾病患者临床和病理改变存在一定性别差异,男性患者临床病理改变较女性严重。
- 李利利王阿妮庄稼孙吉平尹爱萍
- 关键词：IGA肾病性别病理特点
- IgA肾病并发高血压102例临床与病理特征被引量：11
- 2017年
- 目的:探讨IgA肾病并发高血压患者的临床、病理特征。方法:对经肾脏活检确诊的192例原发性IgA肾病患者,按照血压分为高血压组(HP),非高血压组(N-HP),分析两组患者的临床、病理特征。结果:(1)IgA肾病患者中高血压的发生率达53.13%;HP组患者BMI、24h蛋白尿定量、胱抑素C显著高于N-HP组(P<0.05);而GFR显著低于N-HP组(P<0.01);男性比例、高尿酸发生率显著高于N-HP组(;P<0.05),差异均有统计学意义;(2)两组患者不同肾功能分期、不同病理Lee分级高血压发生率显著不同(P<0.05),差异均有统计学意义;(3)HP组肾小球硬化积分、肾小管间质病变积分、血管病变积分均高于N-HP组患者(P<0.01)。结论:IgA肾病伴发高血压的发生率高,临床表现与肾脏病理损伤较严重;应高度重视高血压的发生,避免诱发因素,及时、有效进行干预,可望延缓IgA肾病的进展。
- 李利利刘江庄稼孙吉平尹爱萍
- Wnt信号通路对骨髓间充质干细胞CXCR4表达的调控作用
- 2017年
- 目的研究经典Wnt信号通路对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)CXCR4表达的影响,探索Wnt通路调节干细胞迁移的可能机制。方法培养雄性SD大鼠BMSCs,对所培养的细胞进行鉴定;通过反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)探讨活化/阻断Wnt信号通路对BMSCs表达CXCR4的影响。结果(1)BMSCs的体外培养及鉴定:细胞呈梭形,漩涡状排列,放射状生长。细胞表面标志CD29(+)、CD90(+)、CD45(–),能定向诱导细胞表达神经细胞标记物,体外能分化为脂肪细胞,符合BMSCs表面标记物表达及多向分化潜能特征。(2)应用200 ng/ml的Wnt3a作用24 h即可以充分激活经典Wnt信号通路,应用100 ng/ml的DKK-1作用24 h可以充分阻断经典Wnt信号通路。(3)阻断经典Wnt信号通路可以促进体外培养的BMSCs的CXCR4的表达;激活经典Wnt信号通路可以抑制体外培养的BMSCs的CXCR4的表达。结论干预Wnt信号通路可以调控BMSCs CXCR4表达,经典Wnt信号通路有望通过CXCR4/SDF-1通路调控BMSCs向组织的迁移。
- 孙吉平马莹张文静吕佳尹爱萍
- 关键词：骨髓间充质干细胞Β-CATENINCXCR4
- miR-384-5p通过阻断BMP7转录后调控促进肾纤维化被引量：3
- 2019年
- 目的研究miR-384-5p是否通过调节肾小管上皮细胞BMP7转录而影响肾纤维化。方法建立小鼠单侧输尿管阻塞模型(unilateral ureteral obstructive,UUO),流式细胞仪荧光激活细胞分选(FACS)分离肾组织获取肾小管上皮细胞进行培养,通过脂质体转染表达miR-384-5p的质粒、表达反义miR-384-5p的质粒及空白质粒;静脉注射空质粒( n =10)或反义-miR-384-5p质粒( n =10),14周后处死UUO模型小鼠,肾组织切片进行Masson三色染色评估肾纤维化程度;Western blot和实时定量PCR检测miRNA靶基因(miR-384-5p、miR-30、miR-92和miR-128)表达。结果 UUO模型14 d时肾脏出现明显纤维化,肾组织BMP7 mRNA明显增加,但BMP7蛋白无明显增加。miR-384-5p没有影响肾小管上皮细胞中BMP7 mRNA表达,但是过表达miR-384-5p的肾小管上皮细胞中BMP7蛋白明显减少,过表达反义miR-384-5p的肾小管上皮细胞中BMP7蛋白明显增加。免疫组化和定量PCR检测结果显示,UUO小鼠14 d肾组织纤维化显著增加,而注射反义miR-384-5p组肾组织纤维化程度明显减轻。虽然反义-miR-384-5p处理后不影响BMP7 mRNA水平,但能明显增加肾脏组织BMP7蛋白表达,提示抑制miR-384-5p能减轻UUO大鼠的肾损伤。结论 miR-384-5p是调节肾损伤后纤维化机制的关键因子,靶向miR-384-5p有希望成为防治肾脏纤维化的新方法。
- 张文静孙吉平吕佳李燕耿瀛洲邵耀中尹爱萍路万虹
- 关键词：肾小管上皮细胞肾纤维化
