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国家自然科学基金(81200527)

作品数:2 被引量:6H指数:2
相关作者:尚明花袁伟杰王轩周益朱楠更多>>
相关机构:上海市第一人民医院更多>>
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文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇肾小管
  • 2篇肾小管上皮
  • 2篇细胞
  • 2篇小管
  • 2篇分子
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇上皮
  • 1篇上皮细胞
  • 1篇肾小管上皮细...
  • 1篇转染
  • 1篇细胞激活
  • 1篇小管上皮细胞
  • 1篇淋巴
  • 1篇淋巴细胞
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫分子
  • 1篇介导

机构

  • 2篇上海市第一人...

作者

  • 2篇朱楠
  • 2篇周益
  • 2篇王轩
  • 2篇袁伟杰
  • 2篇尚明花
  • 1篇谷立杰
  • 1篇王玲
  • 1篇包谨芳
  • 1篇赵亚鹏

传媒

  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇中华肾脏病杂...

年份

  • 2篇2013
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
Notchl信号在乙型肝炎病毒X基因介导的肾小管上皮细胞免疫活性异常中的作用被引量:4
2013年
目的探讨乙型肝炎病毒x基因(HBx)转染人近端肾小管上皮细胞系HK一2细胞后对其表达Notchl信号的影响,并观察Notchl信号在HBx介导的肾小管上皮细胞免疫活性中的作用。方法用分子克隆的方法构建pcDNA3.1/myc.HBx质粒及pcDNA3.1/myc—Notchl质粒,转染HK-2细胞,并应用短发卡RNA(shRNA)沉默Notchl基因表达。将细胞分为7组:①正常培养组;②转染HBx空载质粒组;③转染HBx质粒组;④转染HBx质粒+Notchl空载质粒组;⑤转染HBx质粒+Notchl质粒组;⑥转染HBx质粒+NotchlshRNA空载质粒组;⑦转染HBx质粒+NotchlshRNA沉默质粒组。实时定量PCR和蛋白印迹法检测细胞中Notchl受体的变化,流式细胞术检测细胞表面人主要组织相容性复合物(MHC)一II、CD40表达的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中白细胞介素(IL)-4、干扰素(IFN)一1水平。结果HK-2细胞经转染HBx基因后,可高表达HBx,NotchlshRNA在HK-2细胞中的转染效率也高达70%,基因沉默有效;转染HBx基因组细胞Notchl水平高于正常培养组及转染HBx空载质粒组相比,且Notchl过表达组细胞表面MHC。II、CD40表达均明显高于Notchl空载质粒组(9.69%±0.52%比4.90%±0.32%,21.56%±0.71%比15.74%-4-0.20%,均P〈0.05),其上清液中IL_4水平亦高于Notchl空载质粒组(50.2±0.6比28.1±1.2,P〈0.05),而IFN一1水平较低(11.9-4-1.7比18.8±0.8,P〈0.05)。Notchl基因沉默后上述指标结果呈相反变化。结论HBx基因转染HK-2细胞后可引起Notchl表达上调;Notchl又可促进细胞表面免疫分子的表达,并调控细胞因子分泌,最终导致细胞损伤及免疫微环境的紊乱。
王轩周益袁伟杰尚明花包谨芳朱楠
关键词:上皮细胞免疫分子
经HBx转染后的肾小管上皮细胞对T细胞激活、分化的影响被引量:5
2013年
目的探讨乙型肝炎病毒x基因(hepatitis B virusx,HBx)转染人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)后其对T细胞激活、分化的影响。方法分4组:实验组(即转染HBx质粒的HK-2细胞+CD4+T细胞)、阴性对照组(即转染HBx空载质粒的HK-2细胞+CD4+T细胞)、单独培养组(即CD4+T细胞)和空白对照组(未处理HK-2细胞+CD4+T细胞)。体外培养HK-2,用分子克隆的方法构建pcDNA3.1-myc—HBx质粒,采用脂质体转染法瞬时转染HK.2细胞,实时荧光定量PCR及Western印迹法验证HBx在HK-2细胞中的表达。免疫磁珠法分选健康志愿者外周血CD4+T细胞,分别与HK-2细胞共培养,流式细胞术检测HK-2细胞共刺激分子CD40的表达、CD4+T细胞CD40配体(CD40L)表达及细胞周期情况,ELISA检测各组细胞培养上清中Thl型细胞因子IFN-r及Th2型细胞因子IL-4水平。结果HK-2细胞经转染pcDNA3.1-myc—HBx质粒后,可高表达HBx。转染HBx基因后HK-2细胞CD40表达显著上调(P〈0.01);与对照组相比,实验组CD4’T细胞表面CD40L表达也显著增加(P〈0.01),S期与G2/M期细胞数之和增多(P〈0.01),培养上清中IFN-1水平升高(P〈0.05),IL-4水平降低(P〈0.05)。结论肾小管上皮细胞经HBx转染后,其共刺激分子表达上调,并促进CD4+T细胞增殖,诱导CD4+T细胞向Thl方向分化。由此推测,乙肝相关性肾炎肾组织免疫损伤所导致病变的持续进展也可能与此因素的参与相关。
王轩周益袁伟杰朱楠尚明花赵亚鹏王玲谷立杰
关键词:肾小管上皮细胞共刺激分子
共1页<1>
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