天津市应用基础与前沿技术研究计划(10JCYBJC14700)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：武警医学院天津市第三中心医院天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划国家自然科学基金更多>>
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- 灯盏乙素苄酯衍生物对急性缺氧心肌细胞Bcl-2和Bax表达的影响被引量：7
- 2011年
- 目的 观察灯盏乙素苄酯衍生物对急性缺氧心肌细胞中凋亡调控基因Bcl-2和Bax表达的影响.方法 体外原代培养新生SD大鼠心肌细胞4 d,按随机数字表法分为对照组、缺氧模型组[通过低氧环境（95%N2-5%CO2）建立急性缺氧损伤模型]及灯盏乙素苄酯衍生物高、中、低剂量组（缺氧前加入灯盏乙素苄酯衍生物100、50、25μmol/L）,每组6孔.缺氧6 h后检测各组培养基中乳酸脱氢酶（LDH）和一氧化氮（NO）水平,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测心肌细胞Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达.结果 与对照组比较,缺氧损伤后心肌细胞LDH外漏量（U/L）明显增加（288.10±30.69比78.75±12.85）,NO释放量（μmol/L）减少（9.02±1.55比24.11±2.04）,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;而高、中、低剂量灯盏乙素苄酯衍生物可显著降低LDH外漏量（64.19±22.90、101.35±22.71、141.34±23.08）,高、中剂量灯盏乙素苄酯衍生物可明显增加NO释放量（14.45±3.57、12.38±1.57）,差异均有统计学意义（均P〈0.01）.与对照组比较,缺氧模型组Bcl-2的mRNA和蛋白表达显著降低（Bcl-2 mRNA：0.544±0.108比0.837±0.213,Bcl-2蛋白：0.813±0.041比0.917±0.046）,Bax的mRNA和蛋白表达显著升高（Bax mRNA：0.918±0.228比0.493±0.123,Bax蛋白：0.623±0.031比0.490±0.025,均P〈0.01）;与缺氧模型组比较,灯盏乙素苄酯衍生物高、中剂量组Bcl-2的mRNA和蛋白表达显著上调（Bcl-2 mRNA：0.708±0.123、0.604±0.116比0.544±0.108,Bcl-2蛋白：0.887±0.044、0.850±0.043比0.813±0.041）,Bax的mRNA和蛋白表达显著下调（Bax mRNA：0.614±0.136、0.728±0.152比0.918±0.228,Bax蛋白：0.518±0.026、0.547±0.027比0.623±0.031,均P〈0.01）;灯盏乙素苄酯衍生物低剂量组Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达（Bcl-2 mRNA 0.551±0.112,Bcl-2蛋白0.823±0.041;Bax mRNA 0.857±0.218,Bax蛋白0.617±0.031）与缺氧模型组比较均无�
- 李建宇代皓刘辉顾军李灵芝
- 关键词：灯盏乙素心肌缺氧BCL-2BAX
- 灯盏乙素苄酯衍生物对乳鼠心肌细胞缺血损伤的影响及其抗凋亡作用机制(英文)被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨灯盏乙素苄酯衍生物对乳鼠心肌细胞缺血损伤的保护作用及其抗凋亡机制。方法:体外原代培养SD乳鼠的心肌细胞,将搏动状态良好且生长密度无明显差异的心肌细胞随机分为5组:正常对照组、缺血模型组、灯盏乙素苄酯衍生物组(高、中、低剂量分别为100、50、25μmol/L,缺血造模前加入干预药物)。通过氧糖剥夺模型体外模拟心肌缺血损伤,缺血6h后,通过MTT法测定各组细胞代谢活力,采用生化手段检测各实验组培养基中乳酸脱氢酶活性,采用Hoechst-碘化丙啶双染色法观察各组心肌细胞核的形态改变,采用流式细胞术测定各组心肌细胞凋亡率,通过逆转录聚合酶链反应技术检测各组细胞的细胞色素c和caspase-3在mRNA水平的表达,通过蛋白质印迹技术检测各组细胞的细胞色素c和caspase-3在蛋白水平的表达。结果:与正常对照组相比,缺血后模型组心肌细胞的代谢活力显著下降(P<0.01)。与模型组相比,灯盏乙素苄酯衍生物可明显减轻缺血损伤心肌细胞代谢活力的丧失(高剂量P<0.01,中剂量P<0.05);各剂量灯盏乙素苄酯衍生物可显著减少缺血损伤心肌细胞乳酸脱氢酶的外漏量(P<0.01);形态学方面,灯盏乙素苄酯衍生物可有效减轻缺血损伤心肌细胞的染色质凝集、细胞核固缩等凋亡形态学改变;灯盏乙素苄酯衍生物能明显降低缺血损伤心肌细胞的凋亡百分率(P<0.01);灯盏乙素苄酯衍生物可显著抑制缺血损伤心肌细胞的细胞色素c和caspase-3在mRNA及蛋白水平的表达(P<0.01)。结论:灯盏乙素苄酯衍生物对体外培养心肌细胞的缺血损伤具有显著的保护作用。这种保护作用的机制可能是通过抑制细胞色素c释放和caspase-3活化从而阻断细胞凋亡的途径而实现的。
- 代皓顾军李灵芝杨丽梅刘辉李建宇
- 关键词：灯盏细辛缺血
