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国家自然科学基金(30571450)

作品数:5 被引量:33H指数:3
相关作者:苏文金曹敏杰刘光明梁银龙王锡昌更多>>
相关机构:集美大学上海水产大学厦门大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金福建省科技计划重点项目福建省自然科学基金更多>>
相关领域:轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇轻工技术与工...
  • 2篇生物学
  • 1篇化学工程
  • 1篇农业科学

主题

  • 2篇抗体
  • 2篇抗体制备
  • 2篇克隆
  • 2篇黄鳍鲷
  • 2篇骨骼肌
  • 2篇纯化
  • 1篇蛋白
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇英文
  • 1篇原肌球蛋白
  • 1篇同源性
  • 1篇球蛋白
  • 1篇蟹类
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫检测
  • 1篇肌球蛋白
  • 1篇肌肉
  • 1篇分离纯化
  • 1篇分子

机构

  • 4篇集美大学
  • 2篇上海水产大学
  • 1篇厦门大学
  • 1篇浙江省农业科...

作者

  • 4篇曹敏杰
  • 4篇苏文金
  • 2篇杜雪莉
  • 2篇王锡昌
  • 2篇刘光明
  • 2篇梁银龙
  • 1篇熊何健
  • 1篇郭川
  • 1篇周利亘
  • 1篇张凌晶
  • 1篇王玉松
  • 1篇黄园园

传媒

  • 2篇水产学报
  • 1篇厦门大学学报...
  • 1篇中国食品学报
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 3篇2007
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
鲤肌肉肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的分子克隆(英文)被引量:3
2007年
肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)是最近发现的一种蛋白酶。该酶参与肌原纤维蛋白的降解及鱼糜制品弹性的下降。但是,对该酶一级结构的研究,迄今为止,未有报道。本文根据已测定的鲤MBSP N-末端氨基酸序列以及丝氨酸蛋白酶活性中心保守序列设计兼并引物,结合RT-PCR技术实现了MBSP基因片段的扩增。再根据克隆到的MBSP片段序列设计基因特异引物,用于MBSP基因的5′和3′末端快速扩增。综合以上结果,鲤MBSP的全长被确定。序列分析表明,MBSP cDNA含有一732 bp的开放阅读框,编码243个氨基酸残基,其中信号肽长度为21个氨基酸残基。组成丝氨酸蛋白酶活性中心的氨基酸残基(His61,Asp107和Ser197)在MBSP中保守存在。成熟MBSP含有222个氨基酸残基,分子量为24.5 ku,比其天然蛋白的分子量30 ku略小。成熟MBSP的等电点为10.43。鲤MBSP与鲫MBSP,猪胰蛋白酶,牛胰蛋白酶,美洲鲽胰蛋白酶的同源性分别为80.6%,55.8%,55.3%和53.9%。而与仓鼠肌肉中具有胰凝乳蛋白酶性质的蛋白酶的同源性为39.2%。MBSP有高含量的赖氨酸残基(11.93%),此特性可能与该酶的肌原纤维结合特性有关。
郭川梁银龙刘光明苏文金曹敏杰
关键词:克隆同源性
黄鳍鲷骨骼肌伴肌动蛋白的纯化及其抗体制备被引量:2
2008年
采用Sephacryl S-400凝胶过滤柱层析和电洗脱等纯化方法,首次从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化到伴肌动蛋白,并制备了特异性多克隆抗体。多克隆抗体经Protein A-Sepharose亲和层析柱纯化得到高纯度免疫球蛋白G(IgG)。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫斑点印迹(Dot-Blot)和免疫印迹(Western-Blot)等方法对纯化的伴肌动蛋白及其多克隆抗体进行分析鉴定,并研究了不同贮藏条件下伴肌动蛋白的变化情况。SDS-PAGE结果显示本研究从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化了高纯度伴肌动蛋白;Dot-Blot检测结果显示兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体效价为5×104;Western-blot检测表明兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体能与肌原纤维蛋白中的伴肌动蛋白发生特异性反应,而与其它蛋白不发生免疫交叉反应。
杜雪莉周利亘王锡昌熊何健苏文金曹敏杰
关键词:黄鳍鲷纯化抗体
黄鳍鲷骨骼肌α-辅肌动蛋白的分离纯化及抗体制备被引量:2
2007年
目的:黄鳍鲷骨骼肌α-辅肌动蛋白的分离纯化及多克隆抗体制备。方法:采用低温抽提、硫酸铵分级沉淀及两次DEAE-Sepharose离子交换等方法获得α-辅肌动蛋白,并通过免疫大鼠制备了抗α-辅肌动蛋白多克隆抗体。结果:经SDS-PAGE检测得到高纯度的α-辅肌动蛋白,分子质量约为100kDa。Westernblot检测结果显示,制备的多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性。结论:从海水黄鳍鲷骨骼肌中得到高度纯化的α-辅肌动蛋白,并制备了滴度高、特异性好的多克隆抗体,为研究鱼类保鲜储藏过程中α-辅肌动蛋白的分解变化提供了重要的手段。
杜雪莉梁银龙王锡昌苏文金曹敏杰
关键词:黄鳍鲷纯化多克隆抗体
Studies on optimization of nitrogen sources for astaxanthin production by Phaffia rhodozyma被引量:8
2007年
Fermentation of Phaffia rhodozyma is a major method for producing astaxanthin, an important pigment with industrial and pharmaceutical application. To improve astaxanthin productivity, single factor and mixture design experiments were used to investigate the effects of nitrogen source on Phaffia rhodozyma cultivation and astaxanthin production. Results of single factor experiments showed nitrogen source could significantly affect P. rhodozyma cultivation with respect to carbon source utilization, yeast growth and astaxanthin accumulation. Further studies of mixture design experiments using (NH4)2SO4, KNO3 and beef extract as nitrogen sources indicated that the proportion of three nitrogen sources was very important to astaxanthin production. Validation experiments showed that the optimal nitrogen source was composed of 0.28 g/L (NH4)2SO4, 0.49 g/L KNO3 and 1.19 g/L beef extract. The kinetic characteristics of batch cultivation were investigated in a 5-L pH-stat fermentor. The maximum amount of biomass and highest astaxanthin yield in terms of volume and in terms of biomass were 7.71 mg/L and 1.00 mg/g, respectively.
NI HuiCHEN Qi-heRUAN HuiYANG Yuan-fanLI Li-junWU Guang-binHid YangHE Guo-qing
关键词:ASTAXANTHINOPTIMIZATION
辐照处理对蟹类过敏原(原肌球蛋白)性质的影响被引量:18
2009年
食物过敏是当前食品安全领域较为突出的问题,辐照作为食物过敏原的加工处理方法之一,引起了学者的重视.作者对中华绒鳌蟹和三疣梭子蟹的主要过敏原(原肌球蛋白)进行了辐照处理,并分析了辐照处理对原肌球蛋白性质的影响.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,部分纯化的蟹类原肌球蛋白经7kGy辐照处理后出现明显降解,10kGy辐照处理后完全降解;蟹类过敏者血清的免疫印迹分析结果显示.部分纯化原肌球蛋白经3~7kGy辐照处理后的过敏原性无明显变化.而10kGy辐照处理后的过敏原性降低;兔抗锯缘青蟹原肌球蛋白抗体的免疫胶体金层析检测结果证实部分纯化原肌球蛋白经10kGy辐照处理后的抗原性为阴性.但是.3~10kGy辐照处理对整蟹原肌球蛋白及其过敏原性无明显影响。模拟胃液消化反应结果也表明3~10kGy辐照处理对整蟹原肌球蛋白的酶解消化特性无明显影响.
刘光明王玉松黄园园曹敏杰张凌晶苏文金
关键词:蟹类原肌球蛋白辐照处理免疫检测
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