国家自然科学基金(30370495)
- 作品数：9 被引量：58H指数：7
- 相关作者：吴卫平郭秀海张雁华朱克柯青更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院首都医科大学宣武医院第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 家族性低钾型周期性麻痹的基因突变与临床特征被引量：17
- 2006年
- 目的筛查家族性低钾型周期性麻痹相关基因突变位点,总结该病基因型和临床表型的相关性。方法应用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序技术,对14个家族性低钾型周期性麻痹家系中的14例先证者进行候选基因CACNA1S、SCN4A、KCNE3的筛查,阳性者再对其家系中其他患者和健康亲属进行测序分析。结果14个家系中有3个家系其先证者存在已知的低钾型周期性麻痹相关突变(1个家系发生CACNA1S基因R1239H突变,2个家系发生SCN4A基因的R672H突变)。进一步对3个突变家系中4例其他患者和34名健康亲属测序分析发现,R1239H突变为完全外显率,R672H突变为不全外显率。同时还发现2种突变在发病年龄和乙酰唑胺的疗效等方面存在差异。结论中国低钾型周期性麻痹患者存在CACNA1S基因R1239H和SCN4A基因的R672H突变,2种突变的临床表型存在差异。
- 柯青吴卫平徐全刚黄德晖于生元黄旭升
- 关键词：低钾性周期性麻痹钙通道钠通道突变
- 正常血钾型周期性麻痹与高钾型周期性麻痹关系的基因研究被引量：19
- 2003年
- 目的 探讨正常血钾型周期性麻痹 (normoPP)的临床特点并在基因水平上研究normoPP与高钾型周期性麻痹 (hyperPP)的关系。 方法 研究患有normoPP的 2个家系及 2例散发病例的临床特点 ,并应用聚合酶链反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP)方法检测其中 18例患者及其亲属的SCN4A基因 ,并对发现异常构象的单链进行测序。为了确保试验结果可靠 ,每个家庭中至少 1例患者进行了测序。结果 18例患者常规实验室检查未见异常 ,肌电图正常。散发病例 2在发作间期行肌肉活检 ,光镜下未见异常 ,电镜下示局灶性肌纤维变性。基因研究发现 :(1)家系 1发生Met15 92Val突变 ;(2 )散发病例 2及其父亲的SCN4A基因出现点突变G2 4 18A ,引起氨基酸序列的改变Val781Ile。 (3)家系 2和散发病例 1未发生已知的可导致hyperPP的突变 (Thr70 4Met、Ala115 6Thr、Met136 0Val、Ile14 95Phe、Met15 92Val)。结论 NormoPP与hyperPP在临床表现方面有一定的相似性 ,二者可有共同的突变位点。
- 郭秀海吴卫平朱克王红斌司艺玲毛燕玲黄旭升沈定国张雁华
- 关键词：正常血钾型基因突变
- 正常血钾型周期性麻痹存在SCN4A基因V781I突变被引量：11
- 2004年
- 目的研究两例散发正常血钾型周期性麻痹(normokalemicperiodicparalysis,normoKPP)患者的临床特点及其电压门控钠通道型α亚单位(α-subunittypeofvoltage-gatedsodiumchannel,SCN4A)基因的突变。方法应用变性高效液相色谱(denaturinghighperformanceliquidchromatography,DHPLC)技术及测序分析检测患者SCN4A基因第13、19、23、24(部分)外显子是否发生已知导致高钾型周期性麻痹(hyperKPP)的突变(T704M、A1156T、M1360V、I1495F、M1592V);随后应用DHPLC技术筛查SCN4A基因其余外显子,对出现异常洗脱峰者进行测序分析。结果两例患者的SCN4A基因发生点突变2418(G→A)并引起氨基酸序列改变V781I,且为SCN4A基因唯一错义突变。病例1的父亲也发生该突变,但未发病。结论中国人normoKPP患者存在V781I突变,该突变可能是导致normoKPP的突变之一。
- 郭秀海吴卫平张雁华贾建平朱克
- 关键词：突变血钾DHPLC外显子电压门控钠通道
- 一个中国家族性低钾型周期性麻痹家系中的CACNA1S基因R1239H突变被引量：7
- 2006年
- 目的筛查家族性低钾型周期性麻痹(hypokalaemicperiodicparalysis,HOKPP)相关基因突变位点,总结该病基因型和临床表型的相关性。方法应用PCR和DNA测序技术,对1个HOKPP家系(包括2例患者共11名成员)进行候选基因CACNA1S和SCN4A的筛查,并总结该家系患者的临床特点。结果此家系的2例患者符合HOKPP的诊断标准,突出特点为:儿童期发病,青春期加重,成年后病情减轻;女性在月经前期好发,而妊娠期无发作;钾剂和乙酰唑胺治疗有效。DNA测序结果发现2例患者的CACNA1S基因第30外显子上均存在3716(G→A)杂合突变,导致氨基酸序列改变R1239H,家族其他成员未见此突变。结论中国家族性HOKPP存在CACNA1S基因R1239H突变。
- 柯青吴卫平郭秀海徐全刚黄德晖毛燕玲霍春暖
- 关键词：低血钾型周期性麻痹钙通道钠通道突变
- 正常血钾型周期性麻痹SCN4A基因R675Q新突变细胞模型的建立及初步研究被引量：2
- 2008年
- 目的建立一个正常血钾型周期性麻痹（normokalemic periodic paralysis，normoKPP）R675Q新突变的细胞模型并对其通道电流进行初步研究。方法用编码野生型人骨骼肌钠离子通道α亚单位基因（skeletal muscle Nachannel type 4 alpha subunitgene，SCN4A）的cDNA为模板，PCR技术定点突变后磷酸钙沉淀法瞬时转染突变质粒至293细胞，逆转录PCR和Western印迹验证目的基因和蛋白的表达；膜片钳技术全细胞记录野生和突变型钠通道电流。结果突变经测序得以证实；转染后24h和48h，突变通道的基因及蛋白表达量显著增高；相同的测试电压下R675Q钠通道相对电流在到达峰值前小于野生型钠通道，到达峰值后大于野生型钠通道；R675Q和野生型钠通道均在0mV测试电压刺激下到达峰值。结论成功建立了正常血钾型周期性麻痹R675Q新突变的细胞模型；R675Q突变同时提高了通道的激活和失活，其所在的S4区域可能和患者发作性力弱的症状密切相关。
- 吴磊吴卫平颜光涛王晓辉刘洁晓
- 关键词：正常血钾型周期性麻痹细胞模型膜片钳
- 家族性低钾性周期性麻痹存在SCN4A基因R672H突变被引量：7
- 2006年
- 目的筛查低钾性周期性麻痹相关基因突变位点,总结该病基因型和临床表型的相关性。方法应用PCR和DNA测序技术,对2个低钾性周期性麻痹家系进行候选基因CACNA1S和SCN4A的筛查,并总结患者的临床特点。结果DNA测序发现2个家系5例患者在SCN4A基因12外显子上存在2015G→A突变引起R672H改变。家系A另外4人也携带此突变但未发病,其中3例女性,1例男性。家系B先证者母亲存在相同突变。R672H突变特征:钾剂治疗有效,乙酰唑胺治疗无效;外显率不全,女性突变基因携带者均未发病。结论中国家族性低钾性周期性麻痹存在SCN4A基因R672H突变。
- 柯青徐全刚黄德晖袁慧军赵亚力吴卫平
- 关键词：低钾性周期性麻痹钙通道钠通道基因突变
- SCN4A基因V781Ⅰ突变与原发性低钾型周期性麻痹被引量：4
- 2007年
- 目的明确 SCN4A 基因 V781I 突变是否为我国原发性低钾型周期性麻痹的相关突变。方法利用 PCR-直接测序技术和酶切技术对1个低钾型周期性麻痹家系(3例患者和14名健康亲属)、71例散发性低钾型周期性麻痹患者以及100名健康人进行了 SCN4A 基因 V781I 突变的筛查。结果低钾型周期性麻痹家系中所有患者均存在此突变,且有4名健康亲属携带此突变(1名男性,3名女性)。71例散发性低钾型周期性麻痹患者中有7例存在此突变,100名健康人中也有7例存在此突变,该两组间 V781I 突变频率差异无统计学意义(X^2=0.452,P=0.502)。结论 SCN4A 基因V781I 突变在低钾型周期性麻痹患者与健康人中的突变频率差异无统计学意义,此突变可能是正常基因多态性。
- 柯青罗本燕吴卫平
- 关键词：低钾性周期性麻痹钠通道突变
- 正常血钾型周期性麻痹SCN4A基因新突变的检测被引量：8
- 2004年
- 目的 报道正常血钾型周期性麻痹 (normoPP)一家系的临床特点 ,并筛查SCN4A基因以期发现有义突变。方法 提取知情同意的患者及部分家属外周血基因组DNA ,应用变性高效液相色谱分析 (DHPLC)技术筛查患者SCN4A基因全部 2 4个外显子 ,对发现异常者进行测序分析。结果先证者常规实验室检查未见异常 ,发作期肌酸激酶 (CK) 112 6U/L(正常值 <2 0 0U/L) ,肌电图正常。发作间期行肌肉活检未见显著异常。基因研究发现先证者及其父亲 (患者 )SCN4A基因发生同一新突变G2 10 1A ,并引起氨基酸序列改变Arg6 75Gln。该突变不同于目前发现的明确导致高钾型周期性麻痹(hyperPP)的突变 ,也不同于已知的SCN4A基因所有突变。结论 normoPP患者存在一新突变Arg6 75Gln ,该突变可能与疾病相关。
- 郭秀海吴卫平张雁华朱克
- 关键词：正常血钾型周期性麻痹突变变性高效液相色谱
- 家族性高钾型周期性麻痹的SCN4A基因突变被引量：7
- 2005年
- 目的 筛查1个高钾型周期性麻痹(hyperkalemicperiodicparalysis, hyperKPP)家系的SCN4A基因,明确该病与SCN4A基因的关系。方法 总结1个hyperKPP家系中7例患者的临床特点,应用变性液相色谱(denaturinghighperformanceliquidchromatography,DHPLC)技术筛查SCN4A基因全部24个外显子,对发现异常洗脱峰者进行连锁分析并测序。结果 该家系具有典型hyperKPP临床特征,但无肌强直。先证者经DHPLC筛查发现在外显子13、23及24存在杂合二倍体。测序及连锁分析证实位于外显子13的碱基替换引起氨基酸序列改变(Thr704Met);外显子23的碱基替换虽引起氨基酸序列改变(Asp1376Asn)与疾病连锁,但进一步研究显示其为一良性多态;外显子24的碱基替换为同义突变。结论 该家族性hyperKPP与SCN4A基因相关,并由最常见的突变Thr704Met引起。
- 郭秀海吴卫平丁素菊张雁华朱克
- 关键词：家族性基因突变DHPLC先证者肌强直二倍体
