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血管生成素样蛋白4在肺纤维化过程中的作用被引量：2: 2014年; 血管生成素样蛋白（Angiopoietin-like protein fami-ly, ANGTLs）是一种与脂类代谢、葡萄糖代谢、血管生成、肿瘤及代谢性疾病相关的分泌性蛋白质因子。在ANGPTLs系列基因的研究报道中以ANGPTL3、ANGPTL4和ANGPTL6较多。有动物实验提示，肺纤维化早期的病理变化是以肺内微血管内皮细胞受累为主的发展演变过程。本文就ANGPTL4的生物学结构与功能及其在肺纤维化过程中可能存在的作用与机制进行探讨，为肺纤维化机制的研究提供新思路。; 薛荣唐军栋张宏伟刘岩肖芳王献华; 关键词：肺纤维化信号通路血管生成内皮细胞

矽肺患者巨噬细胞培养上清通过p38MAPK对人胚肺成纤维细胞增殖的影响被引量：5: 2010年; 目的探讨矽肺患者巨噬细胞（AM）培养上清是否通过激活p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号转导通路促进人胚肺成纤维细胞（HELF）的增殖作用,进而参与矽肺纤维化的发生发展过程.方法以支气管肺泡灌洗法收集矽肺患者AM,在体外用含有SiO2（50 μg/ml）的DMEM培养基和不含SiO2的DMEM培养基培养18h,然后收集培养的AM上清液.用组织贴块法获取培养HELF,与AM上清液共同孵育,将HELF分为空白对照组、AM组、SiO2＋AM组、SB203580＋SiO2＋AM组,用噻唑蓝（MTT）法和流式细胞仪法分别检测各组HELF的增殖情况和细胞周期.结果 SiO2＋AM组细胞的平均吸光度值为0.48±0.03,与空白对照组（0.29±0.01）、AM组（0.38±0.02）、SB203580＋SiO2＋AM组（0.33±0.03）的差异有统计学意义（P〈0.05）;SiO2＋AM组细胞增殖指数为18.12±0.82,与空白对照组（9.24±0.48）、AM组（14.76±0.43）、SB203580＋SiO2＋AM组（11.71±0.70）的差异有统计学意义（P〈0.05）.SB203580＋SiO2＋AM组的细胞吸光度值和细胞增殖指数均明显降低.结论经SiO2刺激的矽肺患者AM培养上清通过激活p38MAPK信号转导通路可以促进HELF增殖.; 彭海兵王献华冯莉吴爱萍; 关键词：矽肺巨噬细胞有丝分裂素激活蛋白激酶类成纤维细胞

肾素-血管紧张素系统与肺纤维化的关系: 2009年; 刘宏伟王献华马海玲; 关键词：肾素-血管紧张素系统

槲皮素对SiO_2介导人胚肺成纤维细胞增殖及TGF-β1表达的影响被引量：8: 2013年; 目的探讨槲皮素抗硅肺纤维化的作用机制。方法以支气管肺泡灌洗法收集硅肺患者AM,在体外用含有SiO2(50μg/ml)的DMEM培养基和不含SiO2的DMEM培养基培养18h,然后收集培养的AM上清液,加入低、中、高浓度槲皮素(10、20和40μmol/L)作为刺激上清。用组织贴块法获取培养HELF,与刺激上清液共同孵育后,MTT法检测HELF增殖情况,免疫细胞化学法检测HELF中TGF-β1的表达。结果 (1)各槲皮素组能抑制HELF增殖,并且浓度愈大抑制作用愈强,三组与SiO2+AM组(0.620±0.096)相比、中浓度组(0.406±0.070)和高浓度组(0.334±0.050)与AM组(0.490±0.064)相比差异有显著性(P<0.01)。(2)三种浓度槲皮素均能降低HELF中TGF-β1的表达,与SiO2+AM组(0.542±0.095)相比差异有显著性(P<0.05),与AM组(0.394±0.109)和空白对照组(0.314±0.066)比较差异无显著性。结论槲皮素对硅肺纤维化有一定的防治作用。; 彭海兵刘燕王建行赵霞王献华; 关键词：槲皮素 SIO2 TGF-Β1 肺泡巨噬细胞细胞

小干扰RNA技术及其在肺纤维化中的应用: 2011年; 近年来随着RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术研究的进一步深入,利用该技术可以产生相关基因功能沉默,因此被广泛应用到基因调控的研究中。RNAi技术不仅为疾病发病机制的基础研究提供新的发展道路,而且为在基因水平上对疾病的治疗提供了可能。; 胡科迪赵静马小兵王献华; 关键词：肺纤维化

基因芯片技术在肺纤维化研究中的应用被引量：1: 2013年; 肺纤维化的病变特点是肺部炎症导致肺泡持续性损伤、反复破坏、修复、重建及细胞外基质（extra cellular matrix，ECM）的过度沉积，涉及到细胞、细胞因子、ECM等因素间的相互作用，是多因素、多环节参与的缓慢的错综复杂的过程，也是多种原因引起的慢性肺疾病的共同结局。; 田莉高路杨唐军栋王献华马小兵宋旭东; 关键词：肺纤维化基因芯片技术细胞外基质慢性肺疾病肺部炎症病变特点

SiO2对血小板源性生长因子蛋白表达及胶原合成的影响被引量：8: 2009年; 目的探讨SiO2刺激矽肺患者的肺泡巨噬细胞（AM）及其介导的人胚肺成纤维细胞（HELF）血小板源性生长因子（PDGF）的蛋白表达及胶原合成。方法收集矽肺患者AM，体外经SiO2刺激3、6、12、18、24、36h，收集培养上清，用ELISA法检测AM上清中PDGF的蛋白表达，用其表达峰值时的培养上清与HELF共同孵育6、12、18、24、36、48h，用免疫细胞化学法及Western blot法分别检测HELF及其培养上清中PDGF的蛋白表达情况，用^3H-脯氦酸掺入法检测HELF胶原的合成与分泌情况。结果经SiO2刺激的矽肺患者AM条件上清中PDGF的蛋白表达量在作用24h时最高（平均吸光度值为0．282±0．019），与同期对照组（平均吸光度值为0．214±0．014）相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。用AM上清作用于HELF后，HELF细胞内及其培养上清中PDGF的蛋白表达均升高，与对照组比较，HELF培养上清中PDGF蛋白表达于12、18、24、36、48h时明显增高，HELF中PDGF蛋白表达于18、24、36、48h时明显增高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。矽肺患者AM培养上清与HELF共同孵育不同时间后，HELF细胞内及培养上清中胶原明显增加。结论SiO2通过AM的介导影响了HELF中PDGF的蛋白表达与胶原合成及分泌。; 王献华郝小惠赵静马小兵朱兰孙影; 关键词：成纤维细胞胶原

二氧化硅对矽肺患者肺泡巨噬细胞白细胞介素-1β表达的影响被引量：4: 2010年; 目的探讨二氧化硅（SiO2）刺激矽肺患者肺泡巨噬细胞（AM）对自细胞介素-1β（IL-1β）表达的影响。方法收集矽肺患者的肺泡灌洗液，分离培养AM，对照组加入无血清培养液，处理组加入含SiO2粉尘不含血清的培养液。两组在相同条件下分别培养3、6、12、18、24、36h，用免疫细胞化学法和酶联免疫吸附（ELISA）方法检测AM细胞内及其培养上清中IL—Iβ的表达。结果处理组AM胞质中的IL-1β表达呈双峰，3h已有较高水平的IL—16（平均吸光度值为0．2597±0．0102），并随刺激时间不同表达量不同，在12h达最高浓度（平均吸光度值为0．3632±0．0076），且处理组AM胞质中IL-1β的表达在各个时间点均高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；AM培养上清IL-1β的表达与细胞质内的情况一致。结论SiO2可促进AM的IL-1β表达增高，IL-1β在肺纤维化形成过程中起较重要的作用。; 蒋建姝王献华马小兵赵静; 关键词：二氧化硅肺泡矽肺

二氧化硅对人肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞IL-1β表达意义被引量：2: 2011年; 目的探讨二氧化硅(SiO2)刺激矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)条件培养上清对人胚肺成纤维细胞(FB)白细胞介素(IL)-1β表达的影响。方法用酶联免疫吸附法检测离体经或不经SiO2刺激的矽肺患者AM在3、6、12、18、24、36 h上清中IL-1β的表达,取IL-1β表达高峰点的AM上清作为条件培养上清。采用免疫细胞化学法检测AM条件培养上清刺激FB于不同时间点(3、6、12、18、24、36、48 h)其细胞内IL-1β的表达。结果经SiO2刺激的矽肺患者AM上清中IL-1β的表达量明显升高(P<0.01),12 h达高峰;活化的矽肺患者12 h AM条件上清可以促进FB表达IL-1β增高(P<0.05);18 h表达最高,以后逐渐下降。结论在本实验条件下,经离体细胞培养,提示SiO2可通过上调AM和FB中IL-1β的表达,参与矽肺纤维化的形成过程。; 王献华蒋建姝; 关键词：二氧化硅白细胞介素-1Β 肺泡巨噬细胞成纤维细胞

矽肺大鼠差异表达基因的筛选与验证被引量：2: 2012年; 目的筛选矽肺大鼠肺组织与正常大鼠肺组织的差异表达基因,并对差异表达基因基质金属蛋白每-12（MMP-12）和组织蛋白酶E（Cathepsin E）进行鉴定,探讨其在矽肺发病中的作用.方法将健康SD大鼠随机分为模型组（24只）和对照组（6只）,采用非气管暴露法建立雄性SD大鼠矽肺模型,HE染色和VG染色进行肺组织病理观察.对染尘60d的大鼠肺组织,应用基因芯片筛选大鼠肺组织中的差异表达基因.选择明显上调的MMP-12和Cathepsin E基因,用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、免疫组织化学法及蛋白质印迹（Western blot）法进行鉴定.结果从26 962个基因中共筛选出模型组和对照组的差异表达基因338个,其中上调基因267个,下调基因71个.经RT-PCR验证,染尘后30、60、90d时,模型组大鼠肺组织中MMP-12 mRNA表达的吸光度值分别为对照组的4.306、5.338、6.713倍,Cathepsin E分别为1.434、2.974、3.889倍.经免疫组织化学法验证,染尘后30、60、90 d时,模型组大鼠肺组织中MMP-12蛋白表达的平均吸光度值分别为对照组的1.435、1.746、2.069倍,Cathepsin E分别为1.372、1.663、2.103倍.经Western blot法验证,染尘后30、60、90d时,模型组大鼠肺组织中MMP-12蛋白表达的平均吸光度值分别为对照组的1.214、1.531、1.959倍,Cathepsin E分别为1.262、1.828、1.907倍.与对照组相比,模型组大鼠肺组织中MMP-12和Cathepsin E mRNA和蛋白表达量明显上调,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论应用基因芯片筛选出矽肺大鼠肺组织差异表达基因并得以验证,MMP-12和Cathepsin E可能通过降解肺泡壁基底膜及参与免疫应答等参与矽肺的发生发展过程.; 徐慧蓉王献华马小兵侯文娜朱兰向聚才孙瑞军; 关键词：矽肺基因表达基质金属蛋白酶

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