国家自然科学基金(81160063)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
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- 相关机构：广西医科大学广西医科大学附属肿瘤医院广西大学更多>>
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- 蛇毒神经生长因子干预HSC-T6细胞差异蛋白质分析
- 【目的】:建立肝星状细胞(HSC-T6)双向凝胶电泳图谱,初步分析NGF对HSC-T6细胞蛋白质表达的影响。【方法】:实验设立空白对照组和NGF(4 mg·L
- 徐瑾张学荣胡仁统罗小玲林兴廖明廖共山付娆付道滢舒雨雁
- 关键词：双向电泳技术
- 文献传递
- 以iTRAQ技术分析金雀异黄酮作用大鼠肝星状细胞差异表达的蛋白被引量：1
- 2014年
- 目的:分析金雀异黄酮作用大鼠肝星状细胞(HSC-T6)后差异表达的蛋白质,以探讨金雀异黄酮抗肝纤维化的作用机制。方法:以金雀异黄酮作用HSC-T6细胞后,提取细胞总蛋白,采用同位素标记的iTRAQ技术结合高效液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)的定量蛋白质组学方法,分析和鉴定差异表达的蛋白质,运用生物信息学分析差异表达的蛋白质功能。结果:质谱共分析鉴定到685种蛋白质。3次实验鉴定到的差异蛋白质数量分别为79,88,75个,在3次重复实验均鉴定到的差异蛋白为44个,其中上调蛋白19个,下调蛋白25个。对这些差异蛋白进行功能分析,发现参与翻译后修饰、转录、重组和信号传导等过程。结论:iTRAQ联合LC-ESI-MS/MS技术能高通量筛选金雀异黄酮抗纤维化作用的蛋白质。金雀异黄酮的抗纤维化作用,可能是通过对蛋白质调控表达来实现。
- 李彦曹雯胡仁统张学荣廖明
- 关键词：金雀异黄酮肝纤维化细胞蛋白ITRAQ
- 蛇毒神经生长因子对大鼠肝星状细胞凋亡及蛋白质表达的影响
- 【目的】:探讨眼镜蛇毒神经生长因子（NGF）对大鼠肝星状细胞（HSC-T6）增殖、凋亡以及蛋白质表达差异的影响,进一步为蛇毒NGF抗肝纤维化提供依据。【方法】:实验分为对照组（单纯HSC-T6培养）和实验组（NGF进行干...
- 胡仁统张学荣徐瑾罗小玲林兴廖明班建东陈缨农君舒雨雁
- 关键词：流式细胞技术双向电泳技术
- 文献传递
- 牛磺酸、表没食子儿茶素没食子酸酯和三羟基异黄酮联合用药对肝纤维化大鼠的治疗作用及机制被引量：6
- 2015年
- 目的:以表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),牛磺酸和三羟基异黄酮3种具有不同抗纤维化作用的药物组成联合用药,研究其对肝纤维化大鼠的治疗作用及机制。方法:将SD大鼠分为正常组(n=10),模型组(n=12),秋水仙碱组(1 mg·kg-1,n=12),联合用药低剂量62.5 mg·kg-1组(牛磺酸50 mg·kg-1+EGCG 7.5 mg·kg-1+三羟基异黄酮5 mg·kg-1,n=12),中剂量125 mg·kg-1组(牛磺酸100 mg·kg-1+EGCG 15 mg·kg-1+三羟基异黄酮10 mg·kg-1,n=12)、高剂量250mg·kg-1组(牛磺酸200 mg·kg-1+EGCG 30 mg·kg-1+三羟基异黄酮20 mg·kg-1,n=12),除正常组外,其余各组大鼠分别ig50%四氯化碳(CCl4)溶液,正常组给予花生油,连续14周。于第9周开始各给药组分别ig给予相应的药物,连续6周。末次ig后处死动物,采集大鼠血清和肝组织标本,测定血清中丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST),转化生长因子β1(TGF-β1),Ⅰ型胶原(collagen I)的含量及肝组织中总抗氧化能力(T-AOC),超氧化物岐化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化酶(GSHPx)的含量,HE染色观察肝组织病理变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清ALT,AST,TGF-β1和collagen I含量升高(P<0.05),肝组织中T-AOC,SOD和GSH-Px含量降低(P<0.05);与模型组相比,联合用药中、高剂量组能降低肝纤维化大鼠血清中ALT,AST,TGF-β1和collagen I的生成(P<0.05),而联合用药高剂量组能升高肝组织中T-AOC,SOD和GSH-Px的含量(P<0.05)。结论:联合用药能有效对抗CCl4诱导大鼠肝纤维化并对肝脏起保护作用,其机制可能与加快自由基清除,减轻脂质过氧化损伤,同时抑制TGF-β1的表达,减少细胞外基质的合成有关。
- 曹雯廖明周燕林兴
- 关键词：联合用药表没食子儿茶素没食子酸酯牛磺酸三羟基异黄酮肝纤维化
- 基于iTRAQ技术分析联合用药作用大鼠肝星状细胞后差异表达的蛋白被引量：1
- 2014年
- 目的筛选联合用药作用大鼠肝星状细胞(HSC-T6)后差异表达的蛋白质,以探讨联合用药抑制肝星状细胞增殖的机制。方法以牛磺酸、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和三羟基异黄酮三者组成的联合用药作用HSC-T6后,提取细胞总蛋白,运用同位素标记的i TRAQ技术结合高效液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)的定量蛋白质组学方法,分析和鉴定差异表达的蛋白质,运用生物信息学分析差异表达的蛋白质功能。结果质谱共分析鉴定到727种蛋白质。3次实验分别鉴定到的差异表达蛋白质数量分别为85,102,94个,在3次重复均鉴定到的差异表达蛋白为52个,其中上调蛋白24个,下调蛋白28个。生物信息学分析表明,差异表达的蛋白参与翻译后修饰、转录、重组和信号传导等过程,在这些蛋白质中既有与肝纤维化发生、发展直接相关的蛋白质如基质金属蛋白酶抑制剂1、层黏连蛋白、前纤维蛋白2等,也有在蛋白质的相互作用中处于功能网络交叉点的蛋白质如细胞周期素依赖性激酶4、肝癌衍生生长因子、谷氨酸脱氢酶1和丝氨酸/精氨酸剪接因子9等。结论联合用药抑制肝星状细胞增殖的作用,可能是通过调控多种蛋白质的表达来实现,所获得的差异表达蛋白可能在肝纤维化发生发展和药物抗肝纤维化作用过程中扮演重要角色。
- 李彦朱敏曹雯胡仁统张学荣廖明
- 关键词：肝星状细胞细胞蛋白
- 蛇毒神经生长因子对大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及肝纤维化相关蛋白质表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨眼镜蛇毒神经生长因子(NGF)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡以及蛋白质表达差异的影响,进一步为蛇毒NGF抗肝纤维化提供依据。方法实验分为对照组(单纯HSC-T6培养)和实验组(NGF进行干预)。应用MTT检测眼镜蛇毒NGF对HSC-T6细胞增殖抑制率;流式细胞技术检测眼镜蛇毒NGF对HSC-T6细胞凋亡的影响;双向电泳技术观察HSC-T6细胞蛋白质表达变化;质谱鉴定差异表达的蛋白。结果 MTT结果显示NGF对HSC-T6细胞增殖具有明显抑制作用(5 mg.L-1NGF时抑制率为48.2%±1.9%,P<0.01);流式细胞仪也有同样的发现,NGF(5 mg.L-1)干预组的凋亡率21.15%±3.31%明显高于对照组的2.7%±1.55%(P<0.05);比较分析空白对照组和NGF作用组的2-DE图谱,找到差异蛋白质点47个,其中与对照组相比在NGF作用组表达上调22个,下调25个;质谱鉴定出9个蛋白质,其中4个表达上调,5个表达下调。结论蛇毒NGF能抑制大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖,诱导其凋亡,并且影响HSC-T6细胞蛋白质的表达。
- 胡仁统张学荣徐瑾罗小玲林兴廖明
- 关键词：肝纤维化增殖凋亡双向电泳技术
- 蛇毒神经生长因子干预HSC-T6细胞差异蛋白质分析被引量：2
- 2013年
- 旨在建立肝星状细胞(HSC-T6)双向凝胶电泳图谱,初步分析NGF对HSC-T6细胞蛋白质表达的影响。试验设立空白对照组和NGF(4、8和16 mg/L)处理组,分别作用于HSC-T6细胞,24 h后提取细胞总蛋白;利用2-DE分离空白对照组和NGF处理组细胞总蛋白质后,经图像分析识别差异表达的蛋白点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定差异蛋白质;生物信息学对差异蛋白质点进行GO分类及信号传导通路分析。结果显示,比较分析空白对照组和NGF作用组的2-DE图谱,找到差异蛋白质点47个,其中在NGF作用组表达上调22个,下调25个,差异蛋白质点的表达部分随着NGF浓度的增加呈递增性,部分随着NGF浓度的增加呈递减性,对其中18个表达差异1.8倍以上的蛋白质点进行肽质量指纹图分析,鉴定出13个与细胞信号传导、细胞增殖、氧化代谢有关的蛋白质。眼镜蛇毒NGF能改变HSC-T6细胞信号通路中相关蛋白质的差异表达,为在蛋白质水平研究NGF抗肝纤维化机制提供理论依据。
- 徐瑾张学荣胡仁统罗小玲陈缨林兴廖明付娆付道滢
- 关键词：双向电泳技术
