目的 观察高糖诱导下肾小管上皮细胞形态学改变及细胞因子信号转导抑制因子（SOCS-1/3）在肾上管上皮细胞中的表达及意义. 方法 体外培养人肾近曲小管上皮细胞株（HKCs）,并分为空白对照组、高糖组、Janus激酶2抑制剂AG490组.空白对照组以无血清培养基（5.5 mmol/L葡萄糖）培养细胞8 h;高糖组在含1%胎牛血清培养基中加高糖（300.0 mmol/L葡萄糖）培养;AG490组在高糖组基础上加10 μmol/L AG490培养.后两组再按培养时间分为2、4、6、12、24、48 h 6个亚组,每组6孔.倒置显微镜和电镜下观察细胞形态学及超微结构改变,采用免疫细胞化学和蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测SOCS-1/3蛋白表达,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测SOCS-1/3 mRNA表达. 结果 与空白对照组比较,高糖组12 h后细胞呈梭形改变,有不规则突起,随时间延长细胞界限不清,胞质内颗粒增多;电镜下细胞表面微绒毛及细胞内线粒体明显减少,粗面内质网明显增加.AG490组细胞变化不明显.免疫细胞化学显示,SOCS-1/3蛋白表达以胞质为主,散在胞核表达.SOCS-1/3在正常HKC中有基础表达（0.218±0.023,0.337±0.009）;高糖组4～24 h SOCS-1/3蛋白表达均高于空白对照组,其中SOCS-1以4 h表达最高（1.022±0.072）,SOCS-3以6 h表达最高（1.256±0.105,均P〈0.01）;AG490组SOCS-1/3蛋白表达较高糖组明显下降（4 h SOCS-1：0.589±0.167,6 h SOCS-3：0.656±0.075,均P〈0.05）.高糖组2～12 h SOCS-1/3 mRNA表达高于空白对照组,其中SOCS-1以4 h表达最高（1.716±0.098比0.475±0.045,P〈0.05）,SOCS-3以6 h表达最高（2.848±0.116比0.749±0.086,P〈0.01）;AG490组则低于高糖组（4 h SOCS-1：0.865±0.075,6 h SOCS-3：0.923±0.116,均P〈0.05）. 结论 高糖可诱导肾小管上皮细胞发生形态学及超微结构改变,在早期即有SOCS-1/3表达上调,可能与Janus激酶（JAK）/信号转导和转录激活因子（STAT）/SOCS信号转导通路
目的探讨炎症细胞因子白介素-1β(interleukin-1βIL-1β)对高糖刺激的人肾小管上皮细胞转分化的影响。-方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKCs),随机分为正常对照组(5.5 mmol/L normal glucose);高糖组(30 mmol/L high glucose);高糖+IL-1β(5ng/ml)组。分别于处理后24h、48h、72h收集细胞,采用免疫细胞化学染色和Western蛋白印迹法检测细胞角蛋白-18(cytokeratin-18 CK-18)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actinα-SMA)水平。结果高糖能够诱导肾小管上皮细胞α-SMA蛋白的合成增加,而肾小管上皮细胞的标志物CK-18的表达逐渐减少;IL-1β与高糖同时刺激可使肾小管上皮细胞α-SMA蛋白表达进一步增多,而其自身标志物CK-18的表达则明显下降。结论炎症因子IL-1β能增强高糖对肾小管上皮细胞转分化的作用。
