湖南省自然科学基金(08JJ3069)
- 作品数：10 被引量：35H指数：4
- 相关作者：伍勇漆涌陈体冯银陈辉更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅三医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省卫生厅科研基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 双J管生物被膜菌临床特性及其相关基因研究被引量：2
- 2010年
- [目的]研究双J管生物被膜菌的临床分布,对抗生素的耐药特性及粪肠球菌相关基因与生物被膜形成的关系.[方法]收集本院92例患者双J管.筛选生物被膜菌株和相应浮游菌株;浮游菌与双J管生物被膜菌在MH培养基上作耐药性分析;生物被膜阳性菌在泊洛沙姆培养基和普通MH培养基上作耐药差异性分析.实时荧光定量PCR方法对生物被膜菌组和浮游菌组细菌中ebpA、gelE两种与生物被膜形成相关的基因表达进行检测.[结果]92例患者双J管中筛选出生物被膜菌41株,阳性率为45%;生物被膜菌与相应的浮游菌比较,在普通MH培养基上药敏结果相似,无统计学差异（P＞0.05）;生物被膜菌在Poloxamer培养基和MH培养基上药敏结果差异有统计学意义（P＜0.05）,且前者耐药性更强.生物被膜菌组ebpA,gelE表达量分别是浮游菌组的2019倍和1/138.[结论]本院双J管生物被膜菌在临床上以肠球菌属和葡萄球菌属为主;生物被膜菌与浮游菌耐药性无见明显差异, Poloxamer培养基可模拟出生物被膜菌的生存环境,而且对药物的耐受性更强.ebpA与促进生物被膜形成有关,gelE与抑制生物被膜形成有关.
- 李颖佳漆涌陈体伍勇
- 革兰阴性菌中整合子携带氨基糖苷类耐药基因的分布被引量：3
- 2009年
- 目的研究湖南地区革兰阴性菌中整合子的流行现状及其携带的耐药基因的特点。方法收集183株革兰阴性菌,MIC法检测其药敏活性,利用不同的引物PCR筛查整合子的种类及整合子可变区,RFLP分析可变区,并测序确定其所携带的耐药基因盒内容。结果细菌均为多重耐药菌;整合子检出率为54.6%,均为Ⅰ类整合子;携带5种整合子可变区,分别是0.75 kb,1.0 kb,1.8 kb,2.0 kb,3.0 kb;可变区内容为intI1-dfr15-aadA2-qacE△1-ampR,dhfrⅫ-orfF-aadA2,aacA4-catB8-aadA1,dhrfⅫ-aadA2,intI1-dfrA12-aadA2-qacE△1-sul1-ISCR1-blaCTX-M-14-IS903。结论Ⅰ类整合子广泛分布于我院分离的革兰阴性菌中,广泛携带氨基糖苷类和磺胺类耐药基因。氨基糖苷类耐药基因盒的高频出现与抗生素选择性压力无关。
- 陈辉李翔伍勇万向阳漆涌徐令清
- 关键词：整合子氨基糖苷类耐药
- 整合子介导细菌耐药调控机制的研究进展被引量：7
- 2013年
- 自从青霉素出现的半个多世纪以来,抗菌药物一直都是临床抗感染治疗的最重要、最有力武器。然而,近年来,随着抗菌药物的广泛使用甚至是滥用,细菌在抗菌药物的选择性压力作用下不断地产生耐药菌株,并且多重耐药菌株也在不断增加。在对细菌耐药机制的研究中,1989年Stokes和Hall提出了整合子-基因盒耐药系统的概念。整合子是细菌特别是革兰阴性菌中的一种可移动性基因元件,通常位于转座子、接合性质粒、
- 冯银陈体伍勇
- 关键词：整合子耐药基因盒启动子
- 表皮葡萄球菌生物被膜形成的基因调控机制研究进展被引量：1
- 2011年
- 表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis,Se）是临床医疗中重要的条件致病菌,近年来Se的感染率不断上升,已成为医院感染的重要病原菌之一。导致Se致病的主要原因是其形成可黏附于临床常用的聚合物材料上的生物被膜（bio-film）,抵抗抗生素的作用并逃避宿主免疫系统的监控,使感染呈现持续性和反复性的特点[1]。本研究就Se生物被膜形成所需相关因子及基因调控机制作一综述。
- 朱娟伍勇
- 关键词：表皮葡萄球菌生物被膜基因调控
- 产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子与耐药性关系被引量：7
- 2011年
- 目的研究产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中Ⅰ类整合子的分布,探讨整合子介导的耐药机制在产ESBLs菌耐药性中的作用。方法用PCR检测100株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合酶基因及blaTEM、blaSHV和blaCTX-M基因,对Ⅰ类整合子阳性菌进行耐药基因盒检测并测序。结果产ESBLs菌株中Ⅰ类整合子阳性率为69%,整合子阳性的产ESBLs菌株对包括头孢菌素类、喹诺酮类、磺胺类和β-内酰胺酶抑制剂类在内的12种抗菌药物的耐药率高于整合子阴性产ESBLs菌株,2χ检验差异有统计学意义,P<0.05;Ⅰ类整合子在blaSHV、blaTEM和blaCTX-M基因阳性菌株中检出率分别为84.4%、72.9%和68.9%。结论在产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,Ⅰ类整合子广泛分布且参与产ESBLs菌的多重耐药的形成,容易引起多重耐药的广泛传播。
- 陈体漆涌黄利华伍勇
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶整合子多重耐药性
- 铜绿假单胞菌外排泵及整合子与碳青霉烯类耐药中的关系被引量：4
- 2011年
- 目的明确金属酶、整合子和外排泵在铜绿假单胞菌碳青霉烯类耐药中的作用。方法对42株泛耐药铜绿假单胞菌采用K-B法检测MIC值,双纸片扩散法测金属β-内酰胺酶(MBL),PCR扩增整合子并测序基因盒,real-time PCR检测oprM基因表达,western blot检测外膜蛋白。结果亚胺培南耐药率高达45.23%,美罗培南耐药率71.42%;检出有22株产MBL;Ⅰ类整合子检出率52.30%,携带dhfrⅫ-orfF-aadA2和aacA4-blaVIM-4两种类型的基因盒组合形式;oprM基因高表达细菌是低表达细菌的3.56倍;25株高表达MexAB-OprM外膜蛋白。结论金属酶、整合子均不是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药的主要原因,MexAB-OprM高表达致美罗培南耐药。各种耐药机制相互影响,并相互协同。
- 李翔陈辉伍勇漆涌陈体
- 关键词：整合子类细菌外膜蛋白质类金属蛋白酶碳青霉烯类
- 反向PCR扩增Ⅰ类整合酶基因侧翼序列被引量：4
- 2013年
- 目的采用反向PCR对Ⅰ类整合酶基因侧翼序列进行检测分析。方法以临床分离的Ⅰ类整合子阳性大肠埃希菌为研究对象,用限制性内切酶HindⅢ对基因组DNA进行酶切,T4 DNA连接酶使酶切产物自身环化,设计Ⅰ类整合酶基因反向引物扩增Ⅰ类整合酶基因侧翼序列。结果临床分离大肠埃希菌中Ⅰ类整合子检出率为68.1%,反向PCR扩增得到1800bp大小的Ⅰ类整合酶基因侧翼序列。结论Ⅰ类整合子在临床分离大肠埃希菌中广泛存在,反向PCR对Ⅰ类整合酶基因侧翼序列检测进一步明确了Ⅰ类整合子的结构,并发现其侧翼序列存在RNA聚合酶基因β亚基,为Ⅰ类整合子调控基因分析及克隆奠定了研究基础。
- 冯银袁金玲伍勇漆涌陈体
- 关键词：聚合酶链反应基因
- 粪肠球菌esp、gelE、ebpA基因及QS-fsr系统与生物被膜形成关系的研究被引量：8
- 2010年
- 目的研究粪肠球菌esp、gelE、ebpA基因和QS-fsr系统与粪肠球菌生物被膜形成的相关性.方法收集2007年10月至2008年6月从湘雅三医院临床尿路感染患者尿液及导尿管中分离的粪肠球菌24株,按生物被膜阳性粪肠球菌及相应的生物被膜阴性粪肠球菌分为2组.使用RT-PCR分别对生物被膜阳性组和阴性组细菌的esp、ebpA、gelE和fsrB基因荧光强度比进行检测;利用real-time PCR分别检测生物被膜阳性组和阴性组细菌的esp、ebpA、gelE和fsrB 4种与生物被膜形成相关的基因的表达,并通过2-△△Ct方法进行相对定量.分析粪肠球菌esp、gelE、ebpA基因及QS-fsr系统与生物被膜形成的关系.结果 real-time PCR检测显示生物被膜阳性组粪肠球菌esp和ebpA表达量分别是生物被膜阴性组的298倍和59倍,生物被膜阳性组粪肠球菌gelE和fsrB表达量分别是生物被膜阴性组的1/244和1/249.生物被膜组和浮游生物组细菌esp、ebpA、gelE和fsB基因的荧光强度比,差异无统计学意义（秩和检验^值分别为92、79、42和34,P均＞0.05）.结论 esp、ebpA、gelE和fsrB基因与粪肠球菌生物被膜形成密切相关.esp和ebpA能促进生物被膜形成,gelE和fsB能抑制生物被膜形成.提示fsr系统能调节esp、ebpA和gelE基因的表达.
- 漆涌邹彬彬伍勇
- 关键词：细菌蛋白质类泌尿道感染
- 检测产超广谱β-内酰胺酶耐药基因寡核苷酸芯片的研制及应用
- 2010年
- 目的探讨用寡核苷酸芯片检测革兰阴性杆菌耐产超广谱β-内酰胺酶抗生素耐药基因的可行性。方法制备了检测产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌寡核苷酸芯片。应用该寡核苷酸芯片检测16例临床革兰阴性杆菌耐药株,并与测序结果比较。结果提取的DNA产物随机引物标记后杂交,杂交结果差异无统计学意义。其结果与测序结果相符。结论寡核苷酸芯片可以推广应用到临床作为耐产超广谱β-内酰胺酶抗生素快速诊断的一种有效方法。
- 万向阳孙菲季芳
- 关键词：寡核苷酸芯片革兰阴性杆菌耐药基因产超广谱Β-内酰胺酶
- 气管导管细菌生物被膜的病原学分布及耐药性研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究机械通气患者气管内导管细菌生物被膜的病原学分布,探讨细菌生物被膜对抗菌药的耐药性。方法研究110例施行人工气道(气管插管和气管切开)并机械通气的患者拔除的气管内导管,用刚果红培养基筛选出生物被膜菌株和相应浮游菌株,并对生物被膜菌进行半定量检测,药敏试验分析生物被膜菌株和相应浮游菌在普通MH培养基上耐药性差异以及生物被膜阳性菌在泊洛沙姆(F-127)培养基和普通MH培养基上耐药差异进行分析。结果 110例机械通气患者气管导管中筛选出生物被膜菌61株,阳性率为55.45%。以葡萄球菌属、粪肠球菌及铜绿假单胞菌最常见,生物被膜菌与相应的浮游菌在普通MH培养基上药敏结果相似,差异无统计学意义(P>0.05);生物被膜菌在MH培养基上和在F-127培养基上药敏结果差异有统计学意义(P<0.05),且后者耐药性更强。结论该院机械通气患者气管导管生物被膜病原学分布以葡萄球菌属、粪肠球菌和铜绿假单胞菌为主,与普通MH培养基相比,F-127培养基有可能反映生物被膜菌较真实的对药物的耐受情况。
- 朱娟漆涌伍勇
- 关键词：气管细菌生物被膜
