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多重耐药伤寒沙门菌耐药基因的研究被引量：2: 2008年; 目的检测多重耐药伤寒沙门菌对抗菌药物的敏感性及其耐药基因定位。方法随机选取实验室保存的5株耐药菌和1株敏感菌,用纸片扩散法检测对12种抗菌药物的敏感性。用利舍平抑制试验检测菌株是否存在药物外排系统。用聚合酶链反应(PCR)检测TEM型β内酰胺酶基因、aac(6′)-Ⅰb和aac3-Ⅱ型氨基糖苷类修饰酶基因、qacEΔ1-sul1耐消毒剂和磺胺基因、catA和catB氯霉素乙酰基转移酶基因以及cmlA氯霉素外排泵蛋白基因等7种耐药基因。结果5株多重耐药菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢呋辛、头孢西丁、卡那霉素、庆大霉素、复方磺胺甲唑及氯霉素等8种抗菌药物全部耐药,对美罗培南、头孢哌酮、头孢吡肟全部敏感;对头孢噻吩中度敏感。1株无质粒pRST98的菌株对上述药物全部敏感。利舍平抑制试验均为阴性。4株耐药菌TEM型β内酰胺酶基因检测为阳性。全部耐药菌株aac3-Ⅱ、qacEΔ1-sul1和catA基因均为阳性,而aac(6′)-Ⅰb、catB和cmlA基因均为阴性。结论多重耐药伤寒沙门菌质粒pRST98上同时存在多种耐药基因,是导致菌株同时对多种结构各异的抗菌药物耐药的原因。; 虞春华李琼黄瑞; 关键词：伤寒沙门菌多重耐药耐药基因

伤寒沙门菌质粒pR_(ST98)与巨噬细胞凋亡的关系被引量：1: 2008年; 目的研究伤寒沙门菌质粒pRST98与小鼠巨噬细胞J774A.1凋亡之间的关系。方法用3株鼠伤寒沙门菌——标准毒株SR-11、低毒株RIA和将pRST98经接合转移导入RIA的接合子pRST98/RIA在体外分别与小鼠巨噬细胞J774A.1共培养,于0、2、4、6、12和24h用JC-1染色法和流式细胞术检测pRST98对J774A.1线粒体膜电位的影响;用AnnexinV-FITC试剂盒和TUNEL法检测J774A.1的凋亡情况;台盼蓝染色法和系列稀释法分别用于活细胞和胞内活菌计数。结果从感染后2h起,SR-11组、pRST98/RIA组和RIA组J774A.1线粒体膜电位下降的百分率依次降低,随着感染的时间延长,J774A.1通过线粒体途径而导致的细胞凋亡率呈上升趋势;各感染组J774A.1的凋亡率表现为SR-11组>pRST98/RIA组>RIA组,差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01);各时间段J774A.1的活细胞数和细胞内活菌计数均呈现SR-11组; 宋国蓉吴淑燕李嫄渊吕杰眭阳黄瑞; 关键词：伤寒沙门菌质粒巨噬细胞凋亡

伤寒沙门菌质粒pR_(ST98)与树突状细胞在免疫反应中关系的研究被引量：2: 2006年; 研究伤寒沙门菌质粒pRST98在沙门菌致病中的作用机制。将伤寒沙门菌质粒pRST98导入鼠伤寒沙门菌低毒株RIA形成接合子pRST98/RIA,经腹腔感染小鼠,检测脾脏DC的数量及其表面分子CD80和CD86的表达,比较细菌刺激DC成熟的能力;将接合子的热灭活抗原与其致敏的DC共培养,检测IFN-γ和IL-10水平,评价spv活化DC分泌细胞因子的能力;将接合子致敏的DC分别与初始型CD4+和CD8+T细胞进行混合淋巴细胞反应,检测DC刺激初始型T细胞活化增殖的能力。实验结果表明,pRST98/RIA接合子感染组小鼠脾脏DC的数量及其表面分子的表达均高于对照组(P<0.05),DC分泌的细胞因子水平与对照组无显著性差异(P>0.05),但其刺激初始型T细胞增殖的能力则明显增强(P<0.05)。说明携带pRST98质粒的沙门菌感染能增强DC介导的特异性免疫应答。; 李嫄渊张雁云王泳黄瑞; 关键词：伤寒沙门菌质粒树突状细胞

伤寒沙门菌耐药质粒体内接合转移的研究被引量：1: 2007年; 目的研究伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌的接合转移,比较质粒在体内、外接合转移的异同。方法由于伤寒沙门菌是一种只对人类致病的病原菌,因此将伤寒沙门菌的耐药质粒pRST98导入遗传背景明确的鼠伤寒沙门菌低毒株RIA中,用接合子pRST98/RIA口饲BALB/c小鼠进行体内接合转移。结果在体外伤寒沙门菌很容易将pRST98转移给大肠埃希菌E.coliK12W1485(F-)RifrLac+,该接合子又可将pRST98转移给鼠伤寒沙门菌RIA,但在不同宿主菌中耐药标志的表达有差异。未经人工感染小鼠肠道分离的大肠埃希菌耐药情况严重,口饲pRST98/RIA后出现了部分耐药标志与pRST98耐药谱相同的大肠埃希菌,但有些抗生素的耐药标记未能表达。质粒检测显示体内形成的接合子均含耐药质粒pRST98。结论伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在动物体内、外均可转移给大肠埃希菌,但同一质粒在体内、外大肠埃希菌株中耐药标志表达有差异,即使在同一小鼠体内分离的不同接合子,pRST98/E.coli菌株耐药性亦有不同,显示耐药质粒表达的多样性和复杂性。; 祁汝峰顾冠彬黄瑞; 关键词：伤寒沙门菌大肠埃希菌 R质粒

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江苏省自然科学基金(BK2006050)