深圳市科技计划项目(200117)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：张煜余少文邢苗刘刚邓丽瑜更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 里氏木霉Swollenin在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2006年
- 通过设计合适的引物,经RT-PCR方法从里氏木霉的总RNA中扩增出Swollenin基因,并将该基因连接到PMD18-T Simple载体,得到该基因的克隆菌株,经酶切并将该基因连接到巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαA,得到重组质粒pPICZαA-swo1.将该重组质粒线性化后,通过电转化方法转化毕赤酵母GS115,得到重组菌株P.pastoris-swo1.该菌株的发酵液可使滤纸纤维强度降低,纤维素膨胀及崩解效果明显,表明重构表达的Swollenin可用于木质纤维素的预处理.
- 漆传凤余少文邢苗刘刚张煜
- 关键词：里氏木霉纤维素毕赤酵母膨胀素
- 血红蛋白基因在产CBHⅡ毕赤酵母工程菌中的表达被引量：2
- 2007年
- 目的:提高毕赤酵母工程菌P.pastoris-CBHⅡ液体发酵产纤维二糖水解酶(CBHⅡ)的能力。方法:分别构建了用于胞外及胞内表达透明颤菌血红蛋白(VHb)基因的毕赤酵母重组表达质粒pPICZαA-vhb与pPICZαA(-s)-vhb。通过电转化将两种质粒转化巴氏毕赤酵母重组菌体P.pastoris-CBHⅡ菌株,经过筛选分别获得可正确表达具有生物活性的VHb蛋白的重组菌株P.pastoris-CBHⅡ-vhb(胞内表达VHb)及P.pastoris-CBHⅡ-vhb(-s)(胞外表达VHb)。结果:摇瓶发酵实验表明,血红蛋白在贫氧条件下可促进CBHⅡ的分泌表达,培养液上清的CMC酶活分别从出发菌株P.pastoris-CBHⅡ的1.81U/ml提高到2.04U/ml(胞内表达VHb)与1.93U/ml(胞外表达VHb)。VHb蛋白胞内表达菌株比胞外表达菌株效果更明显。
- 余河斌余少文汤新张煜邢苗
- 关键词：纤维二糖水解酶透明颤菌血红蛋白胞内表达分泌表达毕赤酵母
