河北省自然科学基金(C2009001161)
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：河北医科大学第二医院河北医科大学邢台市人民医院更多>>
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- 纤溶酶原激活物抑制剂-1在罗格列酮抑制成纤维细胞转化及胶原合成中的作用被引量：4
- 2016年
- 目的 观察纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）在罗格列酮抑制大鼠胚肺成纤维细胞转化及胶原合成中的作用及信号机制.方法 大鼠胚肺成纤维细胞分为3组：罗格列酮组加入罗格列酮30 mmol/L,PAI-1组加入罗格列酮30 mmol/L及PAI-1 20 mmol/L,对照组加入等量的培养基,分别于24、48和72 h收取细胞,离心后-80℃冻存备用.采用RT-PCR法检测成纤维细胞24hⅠ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达;Western blot技术分析3个时间点PAI-1,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、p-AKT和p-ERK的表达.结果 24、48和72 h罗格列酮组成纤维细胞PAI-1的蛋白表达（0.732±0.015、0.583±0.005、0.762±0.032）较对照组（1.116 ±0.046）明显减低,PAI-1组（0.923 ±0.042、1.024±0.009、1.070±0.011）较罗格列酮组明显增加,差异均有明显统计学意义（F=78.609,均P＜0.01）.24、48和72 h罗格列酮组α-SMA的蛋白表达（0.209±0.012、0.280±0.140、0.254±0.025）较对照组（0.340 ±0.026）明显降低,PAI-1组（0.386 ±0.042、0.400±0.037、0.385±0.026）均较罗格列酮组明显增加（F=35.009,均P＜0.01）.罗格列酮组肺成纤维细胞Ⅰ型胶原（1.065±0.004）和Ⅲ型胶原（1.282±0.001）的mRNA含量较对照组（1.279 ±0.013、1.690±0.005）明显减低,而PAI-1组（1.390 ±0.029、1.350 ±0.044）较罗格列酮组明显增加（F=12.429、127.456,均P＜0.01）.24、48和72 h p-AKT的蛋白含量在3组间无明显改变（F=2.736,P＞0.05）,p-ERK的表达在PAI-1组（0.561 ±0.101、0.448±0.022、0.406 ±0.003）、罗格列酮组（0.288±0.010、0.311±0.034、0.336±0.038）和对照组（0.506±0.032）间差异有统计学意义（F=153.548,P＜0.01）.结论 罗格列酮可以抑制大鼠胚肺成纤维细胞PAI-1的表达,活化纤溶系统.上调PAI-1表达后,罗格列酮抑制大鼠胚肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化及胶原合成的能力减弱.罗格列酮对成纤维细胞的调节作用可能是通过PAI-1与ERK信号途径之间的相
- 张彦萍白林林马丽华赵靖李娜李文斌
- 关键词：罗格列酮纤溶酶原激活物抑制剂-1Α-平滑肌肌动蛋白
- 纤维溶解酶原激活物抑制剂-1对大鼠胚肺成纤维细胞的影响被引量：7
- 2011年
- 目的 研究纤维溶解酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）对大鼠胚肺成纤维细胞增殖、转化及胶原合成的影响,探讨PAI-1在肺纤维化发生中的作用.方法 体外分离培养Wister 待产孕大鼠胚肺成纤维细胞,应用四甲基偶氮唑盐试验观察不同浓度（5、10、20、40、80 μg/L）的PAI-1刺激12、24和48 h后成纤维细胞的增殖率;选用PAI-1最适浓度20 μg/L刺激48和72 h后,细胞免疫化学法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达;实时PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原24和48 h时mRNA表达的变化.结果各浓度PAI-1刺激成纤维细胞后,以20 μg/L 12 h增殖率及吸光度值最高,分别为62.6%和0.573±0.039.在12 h中,不同浓度组较对照组差异有统计学意义（F=111.112,P=0.000）,选择20 μg/L为最适浓度.免疫细胞化学法检测20 μg/L PAI-1刺激48、72 h后,PCNA表达的积分吸光度值分别为3685±686和2530±477,较对照组差异有统计学意义（F=7.85,P=0.020）.PAI-1刺激成纤维细胞24和48 h后,α-SMA表达上调（230±11）%和（159±9）%,较对照组差异有统计学意义（F=39.92,P=0.000）.Ⅰ型胶原表达上调（92±8）%和（65±12）%,差异有统计学意义（F=32.61,P=0.001）.结论 PAI-1可以促进成纤维细胞增殖、转化及胶原合成,可能促进肺间质纤维化的发生和发展.
- 张彦萍王卫丽刘建石玉珍马俊义李文斌白林林
- 关键词：成纤维细胞纤溶酶原激活物抑制物1细胞增殖肌动蛋白类
- 纤溶系统对罗格列酮治疗肺纤维化的影响及信号机制
- 2015年
- 目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)对罗格列酮抑制成纤维细胞转化的影响及信号机制。方法大鼠胚肺成纤维细胞随机分为3组:罗格列酮组、PAI-1组、对照组。罗格列酮组加入罗格列酮30mmol/L,PAI-1组加入罗格列酮30mmol/L及PAI-1 20mmol/L,对照组加入培养基。分别于24、48、72h收取细胞冻存。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RTPCR)法检测成纤维细胞24hPAI-1和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)mRNA的表达;Western Blot方法分析3个时间点丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase,AKT)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)的蛋白表达。结果罗格列酮抑制成纤维细胞PAI-1mRNA、α-SMA mRNA及ERK的蛋白表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);上调成纤维细胞内PAI-1表达后,罗格列酮对PAI-1、α-SMA的基因表达及3个时间点ERK蛋白表达的抑制作用均减弱,与罗格列酮组比较差异有统计学意义(P<0.05);罗格列酮对AKT蛋白表达无抑制作用(P>0.05)。结论罗格列酮通过抑制大鼠成纤维细胞PAI-1的表达活化纤溶系统;上调PAI-1表达可以使罗格列酮抑制成纤维细胞转化的能力减弱,这种作用可能是通过PAI-1与ERK信号途径之间的相互作用实现的。
- 张彦萍白林林李娜马丽华崔丽亚
- 关键词：肺纤维化罗格列酮纤溶酶原激活物抑制物1
- 纤溶酶原激活物抑制剂-1对大鼠肺成纤维细胞凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 特发性肺纤维化（Idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）以成纤维细胞转化为肌成纤维细胞及细胞外基质（ECM）过度沉积”剖为特征，减少ECM沉积、促进肺损伤过程中成纤维细胞／肌成纤维细胞的及时凋亡有望成为治疗肺纤维化的有力措施。近年来，人们通过转基因鼠的实验发现了纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）在肺纤维化发病中的作用。本研究中我们观察了PAl-1对大鼠胚肺成纤维细胞自发凋亡及抗Fas抗体诱导凋亡的影响及信号机制，进一步说明PAI-1在IPF发病中的作用。
- 张彦萍王卫丽刘建白林林李文斌田园园袁雅冬
- 关键词：纤溶酶原激活物抑制剂-1成纤维细胞凋亡鼠肺成纤维细胞转化胚肺成纤维细胞
- 纤溶酶原激活物抑制剂1 siRNA对大鼠肺纤维化的治疗作用被引量：1
- 2013年
- 目的:观察纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)siRNA对博来霉素(BLM)诱导的大鼠肺纤维化的治疗作用,并初步探讨其机制。方法:72只Wister大鼠分为4组,即对照组(control组)、BLM组、BLM+非特异siR-NA组(BLM+N组)和BLM+PAI-1 siRNA组(BLM+P组)。BLM 5 mg/kg气管内滴入制作肺纤维化模型,control组注入等体积的生理盐水。造模后,于局麻下BLM+P组每周2次气管内注入PAI-1 siRNA 7.5 nmol(0.2 mL);BLM+N组注入相同剂量的非特异siRNA;control组和BLM组注入等体积的生理盐水,28 d共给药8次。分别于第7 d、14 d和28 d每组处死6只,左肺行肺泡灌洗测定PAI-1活性,右中叶肺组织RT-PCR法检测Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)的mRNA表达。结果:造模后,7 d、14 d和28 d肺泡灌洗液中PAI-1活性持续升高,每周2次气管内注入PAI-1 siRNA可以使肺泡灌洗液中PAI-1的活性降低,与同一时点BLM组比较有明显差异(均P<0.05);模型组7 d、14 d和28 dⅢ型胶原、α-SMA和TIMP-1的mRNA表达明显增高,BLM+P组3个时点Ⅲ型胶原、α-SMA和TIMP-1的mRNA表达明显减少,分别与同一时点BLM组比较有明显差异(均P<0.05)。结论:每周2次气管内给予PAI-1 siRNA可以持续减少PAI-1表达。PAI-1 siRNA不但直接抑制肺纤维化进展,而且可以打破基质金属蛋白酶及组织抑制因子之间的平衡。
- 张彦萍田园园白林林王卫丽刘建李文斌马丽华
- 关键词：肺纤维化纤溶酶原激活物抑制剂1RNA干扰Α-平滑肌肌动蛋白
