吉林省自然科学基金(201015181)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- PC12细胞转化为神经元样细胞的培养、鉴定及氧糖剥夺模型的制备被引量：1
- 2012年
- 本实验采用PC12细胞是由大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤分离并建立起的细胞系,其在体外经NGF刺激诱导后可向交感神经元分化,最终导致PC12细胞在生理、生化方面具有神经元样的功能,同时应用体外氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）来模拟体内脑缺血过程,为探讨缺血缺氧状态下对神经元的活力、凋亡、
- 何金婷莽靖郭洪亮梅春丽胥桂华陈罕徐忠信
- 关键词：神经元样细胞PC12细胞氧糖剥夺肾上腺嗜铬细胞瘤脑缺血过程
- HSP70蛋白在神经元样PC12细胞氧糖剥夺后的表达变化
- 2013年
- 目的探讨神经细胞氧糖剥夺(OGD)造模后PC12细胞凋亡和热休克蛋白(HSP)70水平,评价OGD模型。方法利用PC12细胞,经NGF刺激诱导向神经细胞分化,利用OGD建立神经细胞OGD模型;利用MTT法、共聚焦显微镜鉴定PC12细胞转化为神经元样细胞及OGD模型的建立,Western印迹检测OGD后HSP70蛋白的表达。结果应用终浓度50 ng/ml NGF的DMEM完全培养基培养PC12细胞,随培养时间的增加细胞呈典型的神经元形态。微管相关蛋白(MAP)2免疫荧光细胞化学染色呈强阳性;建立OGD后神经元出现不同程度的损伤、坏死及凋亡,随OGD时间延长存活率逐渐降低、凋亡率升高、HSP70蛋白表达增加。结论 NGF有效地诱导PC12细胞转化为神经细胞,OGD可以有效诱导HSP70表达。
- 何金婷莽靖胥桂华杨乐王姣琦包晓群徐忠信
- 关键词：PC12细胞氧糖剥夺HSP70蛋白
- siRNA靶向沉默Smad7对PC12细胞氧糖剥夺敏感性的影响
- 2014年
- 目的探讨siRNA靶向沉默Smad7基因对PC12细胞氧糖剥夺(OGD)损伤的影响及其相关机制。方法体外建立PC12细胞OGD模型,利用RNA干扰技术,沉默Smad7基因表达,实时RT-PCR及Western印迹检测Smad7基因的表达,Hoechst33342染色检测细胞凋亡情况,实时RT-PCR检测Smad3基因mRNA的表达变化。结果 siRNA转染下调Smad7基因mRNA及蛋白的表达,靶向沉默Smad7联合OGD 16 h组细胞凋亡较OGD 16 h组明显减少;Smad7低表达的PC12细胞内Smad3 mRNA的表达明显增加。结论 Smad7基因沉默降低PC12细胞对OGD损伤的敏感性,提高Smad3基因在转录水平上的表达。
- 王一鸣程也付丹阳王勇涛王姣琦梅春丽莽靖徐忠信
- 关键词：SMAD7SIRNA氧糖剥夺
