福建省科技计划项目(2003I020)
- 作品数：7 被引量：28H指数：3
- 相关作者：方柏山刘飞洪燕李雯君张光亚更多>>
- 相关机构：华侨大学三明学院更多>>
- 发文基金：福建省科技计划项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 甘油脱水酶和二醇脱水酶β亚基生物信息学分析被引量：1
- 2006年
- 依赖辅酶B12的甘油脱水酶和二醇脱水酶是同工酶。它们不仅氨基酸序列和蛋白质折叠方式非常相似,而且有着相同的催化机制。该文在同一菌株中将编码甘油脱水酶β亚基基因和编码二醇脱水酶β亚基基因片段分别克隆至T载体,从而获得两段核苷酸片段序列,将pddB序列提交Genbank数据库,获登陆号为DQ483052。同时结合PDB数据库中甘油脱水酶和二醇脱水酶的晶体结构,该文用生物信息学方法对所测序列进行了初步分析,并对两种同工酶的β亚基对脱水酶与辅酶的亲和力进行了比较。
- 洪燕李雯君张燎原夏启容方柏山
- 关键词：甘油脱水酶辅酶B12
- 短乳杆菌产NADH氧化酶的发酵条件优化
- 在生物催化过程中大量的酶促反应需要辅因子的参与。烟酰胺类辅因子是许多脱氢酶和还原酶的重要辅酶,其保留和再生利用是酶工程领域的重要研究课题。目前,在氧化型辅酶NAD+的酶法再生方面,已见报道的只有为数不多的几个体系,而且还...
- 林锡煌方柏山
- 文献传递
- 甘油脱水酶再激活酶的克隆表达及活性鉴定被引量：3
- 2006年
- 运用PCR技术从克雷伯氏菌的基因组中分别扩增得到了编码甘油脱水酶再激活酶α、β两个亚基的基因gdrA、gdrB。将gdrA、gdrB克隆至pMD-18T载体上,构建克隆载体pMD-gdrAB。经测序正确后,将gdrAB亚克隆至表达载体pET-28a(+)上构建表达质粒pET-28gdrAB。利用双抗生素筛选法,将pET-28gdrAB与连有甘油脱水酶基因的表达载体pET-32gldABC在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中共表达,鉴定了甘油脱水酶再激活酶的活性。
- 李雯君方柏山洪燕王晓霞林锦霞刘桂兰
- 关键词：甘油脱水酶共表达分子伴侣
- 基于Boosting机制的决策树集成分类器识别嗜热和常温蛋白被引量：1
- 2006年
- 采用Boosting机制的决策树集成分类器对嗜热和常温蛋白进行模式识别。通过自一致性检验、交叉验证和独立样本测试三种方法检测,其中作为Boosting算法中新的Logitboost算法表现更好,其识别的精度分别为100%、88.4%和89.5%,优于神经网络的识别效果。同时探讨了蛋白质分子大小对识别效果的影响。结果表明,将Boosting算法与其它单一分类器有效结合,有望提高研究者对生物分子相关特性的识别能力。
- 张光亚方柏山
- 关键词：BOOSTING决策树集成分类器模式识别
- 克雷伯杆菌利用生物柴油副产物甘油生产氢气和1,3-丙二醇的研究被引量：7
- 2006年
- 以Klebsiella pneumoniae DSM2026为出发菌株，通过紫外线诱变，选育得到能耐较高浓度生物柴油副产物甘油生产H2和1，3-丙二醇（1，3-PD）的菌株21株，命名为Kp1～Kp21。通过比较，Kp8菌株产量最高，1，3-PD和H2产量分别达到0．36g/50mL和0．99mmol/50mL，比出发菌株分别提高了3．5倍和4．2倍。对Kp8菌株发酵条件进行优化，得到最佳培养条件为pH7．0，培养温度37℃，接种量10％（v/v），废甘油浓度为30g／L。在该条件下H2产量为1．0mmoL/50mL，1，3-PD产量为7．5g/L，甘油转化率为83．3％。
- 刘飞方柏山
- 关键词：克雷伯杆菌生物柴油1,3-丙二醇紫外诱变
- 重组1,3-丙二醇氧化还原酶酶学性质和稳定性的研究被引量：1
- 2008年
- 1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR)是以甘油为底物生产1,3-PD途径中的关键酶之一。将dhaT在E.coliBL21(DE3)pLysS进行了表达,对含有6×His标记的PDOR进行了纯化,同时考察了重组PDOR的酶学性质和稳定性。重组PDOR反应的最适pH和温度分别是10.0和55°C;在pH7.0～8.0,酶保持了较高的稳定性,酶在30°C保温表现出较高的稳定性;Ca2+,Mg2+和Cu2+对酶活性有抑制作用,而Fe2+,Na+,NH4+和Mn2+对酶活有促进作用;冷冻干燥处理后,PDOR酶活有一定的损失;添加适当浓度的保护剂——海藻糖、葡萄糖、蔗糖、聚乙二醇,对酶在冷冻干燥时有保护作用;添加5%蔗糖的固体酶制剂在保存过程中表现出较好的稳定性。
- 罗菊香方柏山
- 关键词：酶学性质冷冻干燥稳定性
- 生物催化剂的发现及改造被引量：1
- 2006年
- 生物催化剂是限制工业生物催化的重要瓶颈,发现新型生物催化剂或生物催化剂的新功能及新底物是目前的主要任务。实现该目标的方法有三种:(1)从环境样品中筛选,(2)利用蛋白质工程改造现有生物催化剂,(3)探寻现有生物催化剂的新功能。本文描述了上述三种方法的关键步骤及技术,其中重点介绍了高通量培养技术以及新近发展起来的半理性设计改造生物催化剂的技术。
- 张光亚方柏山
- 关键词：生物催化剂蛋白质工程
- 微生物产氢机理的研究进展被引量：14
- 2007年
- 微生物可以利用工业废弃物产生氢气,其产氢机理可以分成两种:光合产氢和发酵产氢。前者利用光能,后者利用代谢过程中产生的电子,分解有机物产氢。氢酶是产氢过程中的关键酶,催化氢的氧化或质子的还原。氢酶主要有[NiFe]氢酶和[Fe]氢酶两种,具有不同的结构,但催化机理是相似的。本文主要综述产氢微生物的种类、微生物产氢代谢途径和关键酶催化机理,并展望微生物产氢研究的发展方向。
- 刘飞方柏山
- 关键词：代谢途径氢酶
