国家重点基础研究发展计划(2006CB708503)
- 作品数：5 被引量：44H指数：4
- 相关作者：卞修武易良周志华平轶芳余时沧更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人恶性胶质瘤细胞株U251三种克隆的分化特性和胶质瘤干细胞的初步鉴定被引量：9
- 2008年
- 目的观测U251细胞的克隆在形态和分化上的差异，鉴定含胶质瘤干细胞的克隆。方法克隆形成实验观察U251细胞克隆的形态并分类，免疫细胞化学染色观测不同克隆GFAP和nestin的表达差异。分离低分化克隆，检测其自我更新能力、多向分化潜能及CD133表达情况。结果U251细胞可形成紧密型、中间型和松散型三种克隆类型。紧密型克隆分化程度最低，此克隆在无血清培养基内形成神经干细胞样细胞球，具有自我更新能力、多向分化潜能，并表达CD133。结论U251细胞的克隆在形态和分化程度上存在差异，紧密型克隆可能富含胶质瘤干细胞。
- 周志华易良卞修武余时沧
- 关键词：克隆细胞培养技术
- 加强肿瘤干细胞研究被引量：4
- 2007年
- 尽管肿瘤诊断技术已取得巨大进步，治疗方法日益增多，但大多数恶性肿瘤的预后依然很不理想。原因之一就是目前对肿瘤发生机制和生物学特性的认识尚存在不足。因此，积极开展肿瘤分子病理学研究，尤其是肿瘤前沿领域研究，对于恶性肿瘤的诊断和治疗具有重要意义。
- 卞修武
- 关键词：肿瘤干细胞恶性肿瘤生物学特性分子病理学
- 人胶质瘤干细胞趋化因子受体CXCR4活化促进血管生成的作用被引量：17
- 2007年
- 目的从人恶性胶质瘤细胞系 U87中分离、培养和鉴定胶质瘤干细胞,观测其 CXCR4表达情况及其活化后促血管生成因子分泌的变化。方法通过流式细胞术检测 U87细胞中 CD133阳性细胞的比例。使用 CD133免疫磁珠分离试剂盒通过磁性细胞分选系统分离胶质瘤干细胞。采用间接免疫荧光标记、激光共聚焦扫描显微术观测胶质瘤干细胞中神经巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、趋化因子受体 CXCR4的表达;以 CXCR4配体刺激通过钙流试验检测受体功能,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素-8(IL-8)的含量。建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察胶质瘤干细胞成瘤情况及瘤体内 VEGF 表达情况。结果U87细胞系中 CD133阳性细胞的比例为0.5%,这些细胞具有干细胞增殖和生长特性;它们表达CXCR4,用其相应配体激活后导致胞内钙流增加、分泌 VEGF 和 IL-8增多。与 CD133阴性细胞相比,CD133阳性细胞在体外分泌 VEGF、IL-8多,在体内成瘤率高,形成的移植瘤生长迅速,表达更多VEGF。结论人恶性胶质细胞瘤细胞系 U87中含有极少量胶质瘤干细胞,表达功能性 CXCR4、分泌更多促血管生成因子,提示这些干细胞也直接参与胶质瘤血管生成。
- 平轶芳姚小红卞修武陈剑鸿章容易良周志华
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞
- 应用长春新碱分离与鉴定U87细胞系中的胶质瘤干细胞被引量：10
- 2007年
- 背景与目的:研究表明,肿瘤干细胞具有化疗抵抗性。本研究拟利用肿瘤干细胞对化疗药物耐受的特性,在培养基中添加长春新碱的方法从人胶质瘤细胞系U87中分离鉴定肿瘤干细胞。方法:U87细胞于含血清培养基中贴壁后,换用含有5ng/ml长春新碱的神经干细胞培养基培养,获得第一代肿瘤细胞球后,将单细胞接种于神经干细胞培养基中,获得第二代肿瘤细胞球。免疫荧光检测巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulin Ⅲ)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)在第二代肿瘤细胞球及其分化细胞中的表达。结果:成功地获得了第一代肿瘤细胞球以及来源于单细胞的第二代肿瘤细胞球;细胞间紧密相贴,表面较光滑;神经干细胞标志物nestin在第二代肿瘤细胞球中呈阳性表达;第二代肿瘤细胞球分化细胞中可检测到nestin、GFAP、β-tubulin Ⅲ、MBP的表达。结论:U87细胞系中存在具有自我更新及多向分化能力的胶质瘤干细胞,采用神经干细胞培养基中添加长春新碱的方法能简单有效地从胶质瘤细胞系中分离培养出胶质瘤干细胞。
- 余时沧易良周志华姚小红平轶芳卞修武
- 关键词：胶质瘤肿瘤干细胞长春新碱细胞分离细胞鉴定
- 趋化因子受体CXCR4活化促进人胶质瘤干细胞迁移及其机制探讨被引量：6
- 2009年
- 目的:研究趋化因子受体CXCR4活化对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)迁移能力的影响,并探索其下游相关信号通路。方法:采用逐渐添加神经干细胞培养液的方法从人胶质细胞瘤U87细胞株中获得GSCs,利用Transwell小室法评估CXCR4活化对GSCs迁移能力的影响,并进一步应用Western印迹法观察CXCR4下游信号通路的激活情况。结果:CXCR4的配体CXCL12以浓度依赖的方式促进GSCs迁移,同时伴有Akt磷酸化增加;CXCR4特异性拮抗剂AMD3100能够抑制此效应。PI3K/Akt通路抑制剂LY294002可通过抑制Akt磷酸化而抑制CXCL12诱导的GSCs迁移。结论:CXCR4活化后激活其下游的PI3K/Akt信号通路,进而促进GSCs迁移,这可能是GSCs高侵袭特性的机制之一。
- 姜建勇平轶芳赵林涛余时沧王斌卞修武
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞细胞运动
