上海市科学技术委员会资助项目(00JC14042)
- 作品数：5 被引量：51H指数：4
- 相关作者：查锡良王丽影梁玉龙王丽影涂立宇更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院上海医科大学复旦大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 整合蛋白α5β1过表达诱导人肝癌细胞SMMC-7721“失巢凋亡”机理被引量：1
- 2004年
- 为了进一步阐明整合蛋白α5 β1过表达诱导非粘着状态的人肝癌细胞SMMC 772 1失巢凋亡的机理 ,利用poly HEME阻断细胞贴壁 ,诱导失巢凋亡 ,在poly HEME包被的 96孔板中检测细胞生存率 .利用Western印迹法检测了与细胞信号转导密切相关的粘着斑激酶 (FAK)、蛋白激酶B(PKB)及生存蛋白survivin的表达水平 .α5 β1过表达细胞株在去粘附状态下的生存率明显低于对照细胞 .在生长 8d时 ,以整合蛋白不同亚单位转染的α5 β1 772 1、β1 772 1和α5 772 1细胞 ,活细胞数分别降至对照组的 4 0 %、4 5 %和 83% .这说明整合蛋白α5 β1过表达细胞株 ,特别是α5 β1 772 1和 β1 772 1细胞的失巢凋亡明显加快 .细胞悬浮生长 2 4h后 ,α5 β1过表达细胞株都有不同程度的凋亡发生 ;同时粘着斑激酶 (FAK)和蛋白激酶B(PKB)表达量及其磷酸化水平均低于对照细胞 ,而survivin表达水平在α5 β1 772 1中最高 ,在 β1 772 1中最低 .在给予天然细胞外基质纤粘连蛋白的条件下 ,α5 β1 772 1和 β1 772 1细胞的FAK和PKB的磷酸化水平却呈升高趋势 .结果说明 ,FAK和PKB的变化与细胞的粘附状态密切相关 ,并且参与整合蛋白α5 β1过表达细胞在去粘附状态下失巢凋亡的发生 .
- 雷霆雯梁玉龙查锡良
- 关键词：整合蛋白失巢凋亡粘着斑激酶蛋白激酶B肝癌细胞
- 黏着斑激酶对肝癌细胞生物学行为的影响被引量：17
- 2001年
- 目的 探讨降低黏着斑激酶 (FAK)的表达对FAK高表达的人肝癌细胞株SMMC 772 1恶性生物学行为影响。方法 用Western杂交法比较不同肝癌细胞株FAK含量的差别 ,构建FAK反义质粒 ,转染至FAK高表达的细胞株 ,研究其多种细胞生物学行为的变化。结果 SMMC 772 1FAK含量比正常人肝细胞L0 2明显增高 ,转染FAK反义质粒后 ,SMMC 772 1细胞生长受到抑制 ,软琼脂培养克隆形成率下降 ;细胞周期分析 ,S期细胞下降 15 % ;黏附能力下降 ;细胞表面整连蛋白含量不变。结论 在SMMC 772 1中存在FAK过表达 ,降低FAK表达能部分逆转该肝癌细胞株的恶性表型。
- 方袆方新初王丽影涂立宇查锡良
- 关键词：肝肿瘤黏着斑激酶基因转染细胞生物
- 阳性表达表皮钙粘蛋白增加G0/G1期人乳腺癌细胞比例及其分子机制被引量：12
- 2003年
- 表皮钙粘蛋白 (E cadherin)阴性的乳腺癌细胞株MDA MB 2 3 1和MDA MB 43 5转染野生型表皮钙粘蛋白基因 ,通过流式细胞仪测量细胞周期发现表皮钙粘蛋白阳性细胞生长变慢 ,更多细胞停滞在G0 /G1期 ,蛋白质印迹证实由G0 /G1期进入S期的重要调控分子细胞周期蛋白 D1(cyclinD1)下降了 ,并发现表皮钙粘蛋白还能降低直接激活细胞周期蛋白 D1基因转录的 β 连环蛋白的蛋白质浓度 .蛋白激酶B (PKB)能通过抑制糖原合成激酶 3 β(GSK 3 β)的活性来抑制β 连环蛋白降解 ,并在乳腺癌高转移细胞株中普遍过表达 ,其表达同样受到了表皮钙粘蛋白的抑制 .并且在表皮钙粘蛋白阳性细胞中 ,作为PKB上游信号分子并能激活PKB的粘着斑激酶 (FAK)和整联蛋白相关激酶 (ILK)蛋白量也发生下降 ,能抑制PKB激活的PTEN蛋白量却增加了 .结果显示 ,表皮钙粘蛋白能通过降低乳腺癌细胞中的PKB蛋白浓度 ,并通过上游信号分子抑制PKB的激活 ,进而降低PKB对β 连环蛋白降解的抑制作用 ,导致 β 连环蛋白直接调控的靶基因细胞周期蛋白D1的表达量下降 ,引起更多的细胞停止在G0
- 吴衡沈敏雄梁玉龙段玲玲王丽影徐贞查锡良
- 关键词：人乳腺癌细胞分子机制细胞周期蛋白D1
