咸阳市科技计划项目(2011K04-12)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 古典猪瘟病毒基因组及ORF编码蛋白的结构和功能被引量：3
- 2012年
- 古典猪瘟是严重危害养猪业发展的重要疫病之一,对古典猪瘟病毒的分子生物学研究能揭示病毒复制和致病机理,寻找免疫保护关键位点,为新型疫苗开发奠定基础。文章综述了近年对古典猪瘟病毒基因组和相关蛋白的研究成果,对以后的研究方向作了展望。
- 朱小甫吴旭锦徐德乾杨萍
- 关键词：古典猪瘟基因组蛋白分子流行病学
- 陕西省猪瘟流行毒株E0和E2全基因分子特征分析被引量：1
- 2012年
- 【目的】分析目前陕西省猪瘟病毒(CSFV)流行毒株的E0、E2全基因分子特征,为猪瘟防控提供参考。【方法】根据CSFV Shimen株及HCLV株全基因序列,设计并合成了4对引物,采用RT-PCR方法,从采自陕西不同地区的猪瘟病料中扩增E0、E2全基因并进行序列测定分析。【结果】从采集的病料中成功扩增了5株猪瘟流行毒株的E0、E2全基因,这5株流行毒株E0基因核苷酸同源性在94.4%～99.8%,与参考毒株ALD、Alfort187、Bres-cia、CAP、Glentorf、GPE、GXWZ02、HCLV、Paderborn、Rimes和Shimen的核苷酸同源性在80.4%～96.3%,氨基酸同源性在86.5%～99.3%。5株流行毒株E2基因核苷酸同源性在91.1%～98.0%,与参考毒株的核苷酸同源性在77.7%～94.6%,氨基酸同源性在85.2%～95.9%。5株流行毒株E0Rnase活性区域氨基酸基序位点没有变异,但导致流行毒株发生免疫逃逸的E2蛋白关键位点中有3个发生了变异。【结论】测定的陕西省猪瘟流行毒株E0、E2基因序列变异明显,其中E2蛋白关键位点变异较大。
- 吴旭锦朱小甫徐德乾杨萍程养善文耀武鲁万民乔志博熊忙利
- 关键词：猪瘟流行毒株E0基因E2基因分子特征
- 新城疫国标RT-PCR诊断方法的优化与应用被引量：4
- 2015年
- 【目的】对新城疫(ND)国标RT-PCR诊断方法进行改进和优化,建立一种灵敏度高、特异性好、能直接从组织病料中进行目的基因检测的NDV套式RT-PCR(nest RT-PCR,RT-nPCR)方法。【方法】根据GenBank上发表的新城疫病毒基因序列,设计并合成了2对引物,通过筛选最佳RT-nPCR条件,建立了NDV RT-nPCR检测方法。通过灵敏性试验、特异性试验、病料检测对比试验等,验证了RT-nPCR方法的可靠性和适用性。【结果】建立的NDV RT-nPCR方法灵敏度较高,检测的极限为5.6×10-5 ng/L;特异性较好,仅能从NDV中扩增到目的条带。从6份疑似组织病料中能直接检测出4份阳性结果,而国标方法均未检出,病毒分离鉴定结果与优化后的RT-nPCR方法符合率达100%。【结论】建立了一种灵敏度高、特异性好、可直接从组织病料中快速检测NDV核酸的RT-nPCR方法。
- 吴旭锦朱小甫
- 关键词：新城疫RT-PCR
