目的探讨小鼠腔前卵泡在淋巴结脱细胞支架中的发育情况。方法10周龄C57BL/6J小鼠的腋下淋巴结,使用0.5%的十二烷基硫酸钠(SDS)进行脱细胞处理,HE染色和扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察支架形态,DAPI染色和琼脂糖凝胶电泳和DNA含量检测观察细胞和DNA残留情况。中国仓鼠卵巢细胞(CHO)与支架共培养后,CCK-8验证脱细胞支架对细胞活力的影响。将小鼠腔前卵泡注射到支架内进行体外培养,HE染色观察卵泡的生长情况。免疫组化染色观察CYP-17/A1和FSHR的表达情况,ELISA检测细胞支架培养液中雌激素分泌水平。结果与新鲜淋巴结相比,脱细胞后淋巴结外观变得透明,形态保持完整。HE和SEM发现支架内密集分布大量的三维纤维网架结构。DAPI染色未发现细胞的残留,琼脂糖凝胶电泳未发现明显DNA残留。DNA定量分析表明DNA的去除率为88%[(1390.0±248.6)ng·mg^(-1) vs.(342.6±116)ng·mg^(-1)](P<0.05)。CCK-8检测结果表明,在24、48、96 h时,加支架组与对照组的细胞活力差异均无统计学意义(P均>0.05)。腔前卵泡植入后,在支架中生长,卵泡直径增大,颗粒细胞(FSHR阳性细胞)和膜细胞(CYP-17/A1阳性细胞)增殖,并分泌雌激素。结论淋巴结脱细胞后,可形成细胞外基质支架,可支持小鼠腔前卵泡的生长并具有内分泌功能。
