广西医疗卫生重点科研课题(2011046)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：黄巨恩李校堃沈丽刘春英吴世芬更多>>
- 相关机构：广西医科大学温州医学院温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广西医疗卫生重点科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酸性成纤维细胞生长因子对庆大霉素诱导的海马星形胶质细胞MDA、NO、SOD、GSH-Px的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对庆大霉素(GM)引起的体外培养的大鼠海马星形胶质细胞损害的保护作用。方法:大鼠海马经分离、剪切、胰蛋白酶消化,进行星形胶质细胞的体外培养。传3代的细胞接种于24孔板培养3d后用于实验。实验分3组:①对照组:正常培养;②GM组:2g/L GM作用24h;③aFGF+GM组:加入4.25μg/L aFGF 24h后再加2g/L GM培养24h。每组设6个复孔,实验重复3次。观察细胞形态及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)变化。结果:对照组:细胞形态多样,呈三极、多极型,折光性强,多数细胞突起相互交织成网状;GM组:细胞大量皱缩,聚集成团,网状结构被破坏,突起连接中断,细胞质内出现较多的颗粒和空泡;aFGF+GM组:细胞皱缩程度减轻,聚集成团现象减少,突起连接中断不明显,细胞质内少见颗粒和空泡。GM组与对照组比较,SOD、GSH-Px酶活性下降,而MDA、NO升高(P<0.01),提示星形胶质细胞的培养和庆大霉素损伤的建模成功;aFGF+GM组与GM组比较,各生化和酶学指标差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:aFGF对庆大霉素诱导的星形胶质细胞损伤有明显的保护作用。
- 刘春英黄巨恩吴世芬李校堃
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子海马星形胶质细胞谷胱甘肽过氧化物酶
- 体外原代星形胶质细胞分离培养方法的优化被引量：4
- 2014年
- 目的：通过对国内外原代培养星形胶质细胞的不同方法的比较运用,旨在优化现有的星形胶质细胞（AS）分离培养方法,建立稳定,高产的培养模式,为进一步研究奠定基础.方法：结合自有实验室条件采用优化的胰蛋白酶消化组织块分离培养法获取AS,进行形态学观察,绘制生长曲线,对培养的细胞进行GFAP免疫荧光鉴定.结果：体外培养的原代AS 7～10 d基本融合,胞体不规则,突起丰富如网状,生长曲线符合正常细胞生长特性;免疫荧光染色显示细胞纯度可达95％以上.结论：优化的胰蛋白酶消化组织块分离培养法对AS的培养更适宜自有实验室条件,可获得稳定纯度较高的AS,为中枢神经系统疾病相关研究提供了新的基础.
- 黄太萍黄巨恩沈丽
- 关键词：星形胶质细胞体外培养
- 酸性成纤维细胞生长因子保护庆大霉素对海马星形胶质细胞毒性作用的分裂原活化蛋白激酶通路机制被引量：2
- 2016年
- 目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对庆大霉素损伤的海马星形胶质细胞保护作用可能的机制。方法新生24 h Sprague-Dawley大鼠分离、纯化海马星形胶质细胞,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色鉴定,传3代细胞接种于24孔培养板培养3 d,分为3组:对照组正常培养,损伤组以2.0 g/L庆大霉素培养24 h,保护组加入4.25μg/L aFGF培养24 h后再加入2.0g/L庆大霉素培养24 h。Western blotting检测P38、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)1、ERK2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)1、JNK2的表达。结果成功培养细胞,纯度>95%。与对照组比较,损伤组ERK1表达增加(P<0.05);保护组与损伤组比较,P38表达增加(P<0.05),ERK1表达减少(P<0.05);其余两两比较均无显著性差异(P>0.05)。结论信号通路中的P38和ERK1可能在aFGF对抗庆大霉素诱导的海马星形胶质细胞损伤过程中发挥作用。
- 沈丽黄巨恩黄太萍沈慧李校堃
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子庆大霉素星形胶质细胞海马
- 酸性成纤维细胞生长因子对庆大霉素诱导的海马星形胶质细胞凋亡的影响被引量：2
- 2016年
- 目的通过建立海马星形胶质细胞(AS)的体外培养模型,从细胞凋亡的模块探讨酸性成纤维细胞生长因子(a FGF)对庆大霉素(GM)诱导的海马AS损伤的保护作用。方法体外培养海马AS,采用胶质纤维酸性蛋白免疫荧光进行鉴定。将海马AS随机分为3组,分别予正常培养(正常对照组)、2 g/L GM作用24 h(损伤组)及加入4.25μg/L a FGF 24 h后再加2 g/L GM作用24 h(保护组)。通过应用TUNEL结合DAPI核染色法和Annexin V-FITC/PI双染法反映细胞的凋亡状况。结果损伤组的细胞生长受抑制,细胞凋亡,保护组的AS凋亡率下降,其中损伤组TUNEL染色阳性的细胞数较正常对照组显著增加(P<0.01),保护组TUNEL染色阳性的细胞数较损伤组显著减少(P<0.01);保护组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);而通过Annexin V-FITC/PI双染法可见:正常对照组、损伤组、保护组细胞的总凋亡率分别为8.37%、28.66%、25.55%。其中,保护组细胞的早期凋亡率与损伤组比较差异无统计学意义,而其晚期凋亡率与损伤组相比有所降低。结论 a FGF具有减轻GM所致AS凋亡的作用,可能阻碍细胞早期凋亡的进一步发展。
- 黄太萍黄巨恩李校堃
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子庆大霉素星形胶质细胞凋亡
