重庆市自然科学基金(2005BB5290)
- 作品数：2 被引量：18H指数：2
- 相关作者：曹红卫王宁郑江刘鑫杨东更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黄芩抗内毒素活性物质的分离提取与活性研究被引量：10
- 2008年
- 目的从黄芩中提取具有拮抗内毒素（LPS）活性的物质。方法采用大孔吸附树脂和高效液相色谱（HPLC）等技术将黄芩水提物分离成若干组分，应用生物传感器技术检测各组分与LPS的活性中心LipidA的结合活性，动态比浊法鲎试验检测各组分（2．0mg／L）对LPS（0．2μg／L）的中和作用，籍此筛选出活性组分；逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测所筛组分对LPS诱导的RAW264．7细胞的Toll样受体4（TLR4）mRNA表达的影响，ELISA法检测所筛组分对LPS（100μg／L）刺激的RAW264．7细胞释放肿瘤坏死因子α（TNF-α）的影响。结果获得5种HPLC产物S3K1-5，其中S3K1与LipidA结合活性最高，S3K1（2．0mg／L）可显著抑制LPS（0．2μg／L）介导的鲎试剂的凝结反应（P〈0．05）；以LPS（100μg／L）刺激RAW264．7细胞，其TLR4mRNA表达增强，给予40、80、160mg／L的S3K1预处理后能减弱LPS诱导RAW264．7细胞的TLR4mRNA表达（P〈0．05）；单纯LPS刺激RAW264．7细胞释放的TNF-α为（1757．61±207．25）ng／L（对照组），给予40、80、160mg／L的S3K1预处理后TNF-α浓度依次为（1324．53±149．73）、（893．87±140．77）、（799．97±124．21）ng／L，随S3K1剂量递增而减低，均显著低于对照组（P〈0．05）。结论从黄芩中提取到具有拮抗LPS活性的组分S3K1，S3K1在体外对LPS具有一定的中和作用，可抑制LPS诱导的RAW264．7细胞的TLR4mRNA表达，进而抑制LPS诱导的RAW264．7细胞活化。
- 伏建峰曹红卫王宁刘鑫杨东郑新川鲁永玲郑江
- 关键词：黄芩内毒素生物传感器大孔吸附树脂
- 地骨皮提取物CL-5拮抗内毒素的实验研究被引量：8
- 2008年
- 目的观察地骨皮提取物（CL-5）对内毒素（LPS）的体内外拮抗活性。方法应用生物传感器技术检测CL-5与LPS的活性中心类脂A（Lipid A）的结合活性,ELISA法检测不同浓度CL-5（50、100、200mg/L）对LPS（100μg/L）刺激RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,进一步观察不同剂量（30、60、90mg/kg）的CL-5对致死剂量热灭活大肠杆菌（E.coil）攻击小鼠的72小时存活率。结果10～640mg/L的CL-5,特异性结合值（RU）为36.5～481.2arc/s,随CL-5浓度递增而升高;单纯LPS刺激RAW264.7细胞（对照组）释放的TNF-α为（2 479.03±61.43）ng/L,给予50、100、200mg/L CL-5预处理后TNF-α浓度依次为（2 210.29±70.95）、（1 998.27±111.24）、（1 423.28±86.35）ng/L,随CL-5剂量递增而减少,均显著低于对照组（P〈0.05）;以1.30×1011CFU/kg热灭活E.coil攻击小鼠（对照组）72小时动物死亡率为100%,而以30、60、90mg/kg CL-5处理后,小鼠72小时存活率分别为50%、60%和80%,随CL-5注射剂量的增加而升高,均显著高于对照组（P〈0.05）。结论CL-5与Lipid A有一定的结合活性,可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞活化,并对致死剂量热灭活E.coil攻击的小鼠具有保护作用。
- 伏建峰曹红卫龙宇鹏王宁刘鑫杨东鲁永玲郑江
- 关键词：内毒素地骨皮脓毒症
