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博士科研启动基金(2008-2)
作品数:
3
被引量:4
H指数:1
相关作者:
潘建刚
韩瑞发
周兴
李伟
陈志光
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相关机构:
广州医学院第二附属医院
天津医科大学
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发文基金:
博士科研启动基金
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相关领域:
医药卫生
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重组腺相关病...
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重组腺相关病...
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作者
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周兴
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韩瑞发
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潘建刚
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李伟
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陈志光
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基础医学与临...
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2010
2篇
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联合自杀基因及内皮抑素基因双靶点体外治疗膀胱癌
被引量:1
2009年
目的观察基因重组腺相关病毒自杀基因及内皮抑素(ES)联合基因体外治疗膀胱癌的效果。方法(1)通过基因重组腺相关病毒(rAAV)-增强绿色荧光蛋白(EGFP)转染膀胱肿瘤T24细胞,确定rAAV对T24细胞的转染效率;(2)通过rAAV-胸苷激酶(TK)-核糖体插入位点(IRES)-ES(简称rAAV—TIE)体外转染T24、HUVEC细胞,MTT法、流式细胞仪等方法来检测诱导凋亡作用。结果(1)rAAV—EGFP转染T24细胞后可以表达携带的外源基因EGFP,感染效率约为62%;(2)rAAV—TK、rAAV—TIE转染T24细胞72h后,流式细胞仪检测结果显示,rAAV—TK、rAAV—TIE两组凋亡率分别是37.02%和32.14%,明显高于空病毒转染组(7.90%)和空白对照组(0.30%)。结论rAAV—TIE可有效抑制膀胱癌的血管生成和肿瘤的生长,能够双靶点基因治疗膀胱肿瘤。
潘建刚
周兴
李伟
韩瑞发
关键词:
自杀基因
内皮抑素
腺相关病毒
含TK-IES-ES非融合基因重组腺相关病毒的构建及其功能的初步鉴定
2009年
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)-胸苷激酶(TK)-核糖体插入位点(IRES)-内皮抑素(ES)(简称rAAVTIE)非融合载体的构建及每个目的基因相应生物学效应的初步鉴定。方法(1)用PCR分别扩增IRES、TK、ES序列至pMD-19T simple载体,构建pAAV-TK-IRES-ES;(2)分别采用AAV-Helper Free System包装系统、"氯仿-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提"及冰乙醇沉淀法进行AAV的包装、纯化和浓缩。(3)用T24细胞及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对rAAV-TIE生物学效应进行初步鉴定。结果(1)成功构建pAAV-TIE非融合载体,并经酶切、PCR及测序证实;(2)rAAV病毒颗粒滴度达2×1010v.p/mL,浓缩后可达到2×1011-12v.p/mL;(3)rAAV-TIE可以分泌内皮抑素,诱导T24细胞及HUVEC凋亡。结论成功构建rAAV-TIE腺相关病毒,体外实验表明每个基因片段均能发挥相应的生物学功能。
潘建刚
周兴
韩瑞发
陈志光
李江婷
关键词:
腺相关病毒
自杀基因
内皮抑素
基因重组腺相关病毒介导内皮抑素治疗裸鼠膀胱癌
被引量:3
2010年
目的观察重组腺相关病毒(rAAV)-内皮抑素(Endostatin,ES)(简称rAAV—ES)基因治疗膀胱癌的效果。方法3"24细胞悬液接种于BALB/C裸鼠右侧肩胛区皮下,取已成瘤裸鼠随机分为3组:对照组、rAAV-多克隆位点(MCS)组、rAAV—ES组,每组5只,分别瘤内注射生理盐水、rAAv—MCS及rAAV—ES,4周后处死荷瘤裸鼠,取出移植瘤,常规苏木素-伊红(HE)染色、计算微血管密度(MVD);采集裸鼠血液标本酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中ES浓度。结果(1)瘤内注射rAAV—ES9d后,肿瘤生长明显抑制,治疗4周后:各组肿瘤体积分别是:rAAV—ES组(0.754-0.08)cm3、rAAV—MCS组(1.27±0.13)cm3和对照组(1.24±0.17)cm3;组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);(2)各组移植瘤MVD分别:rAAV—ES组(18.72±2.53)个/HP、rAAV—MCS组(52.38±6.46)个/HP和对照组(49.94±7.17)个/HP;rAAV—ES组显著低于对照组和rAAV—MCS组(P〈0.05)。结论rAAV—ES能抑制膀胱癌的血管生成和肿瘤的生长。
潘建刚
周兴
李伟
韩瑞发
关键词:
腺相关病毒
内皮抑素
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