上海市科学技术发展基金(024909006)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 伪狂犬病病毒沪株gE基因序列测定与比较分析
- 2005年
- 建立了伪狂犬病病毒的PCR检测方法,并将沪株伪狂犬病病毒的gE基因扩增片段进行测序和比较分析。根据伪狂犬病病毒gE和gB基因序列设计两对引物,以伪狂犬病病毒SH株DNA和单纯疱疹病毒I型为模板,产物连接到pMD18-T Vector。重组质粒测序后与闽A株序列比较,同源性为98%,与Genebank中已登录的伪狂犬病病毒gE基因序列进行blast比较,同源性在97%以上。gE基因序列比较保守,在疫苗应用及分子诊断方面均有较大的价值。
- 邵伟娟胡建华谢建云高诚张婉华
- 关键词：伪狂犬病病毒PCR方法基因克隆
- 犬细小病毒核酸诊断方法的建立和应用被引量：6
- 2006年
- 目的建立犬细小病毒的核酸诊断方法(PCR方法)并应用于临床诊断。方法根据犬细小病毒VP2基因序列设计引物,以犬细小病毒标准株、犬传染性肝炎病毒和正常增殖细胞DNA为模板,犬细小病毒扩增出221bp的特异带,将PCR产物连接到pMD18_T Vecter,转化大肠杆菌JM109菌株。重组质粒经测序并经blast比较,与GenBank中已登录的犬细小病毒VP2基因序列进行比较。同时将建立的PCR方法应用于30份犬粪便和病犬组织的检测,并测序。结果PCR产物测得的序列与GenBank的基因序列同源性为100%,粪便检测均无犬细小病毒的特异带,从病犬组织中有6份样品扩增出221bp的特异带,经测序比较,同源率为100%。结论建立了犬细小病毒的PCR检测方法,并能应用于临床诊断。
- 邵伟娟谢建云胡建华高诚
- 关键词：犬细小病毒聚合酶链反应
- 猪伪狂犬病病毒PCR检测方法的初步建立被引量：2
- 2008年
- 目的建立猪伪狂犬病病毒(PrV)的PCR检测方法。方法根据PrV gB基因序列,应用primer 5.0软件自行设计、合成一对引物进行PCR反应,优化反应条件,建立检测PrV的PCR方法,并应用于临床样品的检测。结果以PrV上海株细胞培养物DNA为模板,扩增出263 bp的特异性条带,对扩增产物进行克隆测序和BLAST在线比对,与GenBank中PrV的gB序列一致。对临床样品进行PCR检测,与病毒分离结果一致。结论所建立的PCR方法敏感、特异,可用于实验用猪伪狂犬病病毒的快速检测。
- 李春华胡建华张婉华孙凤萍高骏王英蒋凤英
- 关键词：伪狂犬病病毒PCR
