湖南省自然科学基金(06jj5046)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：南华大学萍乡市人民医院更多>>
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- shRNA干扰S100A13基因对人甲状腺癌细胞释放成纤维细胞生长因子1的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨S100A13基因沉默对应激诱导人甲状腺癌细胞（TT细胞）成纤维细胞生长因子1（FGF-1）释放的影响.方法 将S100A13-shRNA pENTRTM/U6入门质粒转染TT细胞,应用实时PCR、间接免疫荧光法及Western印迹方法检测细胞内S100A13基因及蛋白表达的抑制效率,应用间接免疫荧光,RT-PCR及ELISA检测无血清处理TT细胞S100A13沉默后FGF-1释放变化.结果 S100A13-shRNApENTRTM/U6入门载体转染TT细胞后能够抑制S100A13基因及蛋白表达,抑制效率约为80%.间接免疫荧光法显示FGF-1主要位于细胞浆和细胞核,无血清培养6 h后胞浆内FGF-1基本消失.RT-PCR和ELISA结果均显示,S100A13沉默能降低无血清处理TT细胞培养上清中FGF-1的浓度（P＜0.05）.结论 S100A13-shRNA pENTRTM/U6入门载体能有效、特异性地抑制S100A13基因及蛋白表达.S100A13基因的抑制可以减弱FGF-1从细胞内释放到细胞外的过程.
- 田利娜曹仁贤刘星文芳钟警颜斌文格波
- 关键词：甲状腺癌
- 过表达S100A13基因对甲状腺癌TT细胞增殖特性的影响被引量：8
- 2008年
- 背景与目的:有研究表明,S100A13基因与肿瘤的发生有关,而S100A13基因在人甲状腺组织中高表达。本研究旨在探讨S100A13基因过表达对甲状腺癌TT细胞增殖特性的影响。方法:应用Lipofectamine 2000将真核表达载体pCDNA3.1/NT-GFP-S100A13和空载体pCDNA3.1/NT-GFP导入TT细胞,经G418抗性筛选得到稳定的克隆并扩大培养成细胞系,激光共聚焦显微镜观察外源性S100A13蛋白在细胞中的定位。采用real-time RT-PCR和Western blot鉴定稳定过表达S100A13的TT细胞。分别应用细胞生长曲线、流式细胞术方法检测过表达S100A13基因对TT细胞生长速率和细胞周期的影响。结果:成功建立了稳定过表达S100A13和空载体的细胞系TT-S100A13-GFP、TT-GFP。分别将1×104个TT-S100A13-GFP、TT-GFP和TT细胞培养7d后,各组细胞数目分别为(2.30±0.24)×105个、(1.40±0.25)×105个和(1.50±2.20)×105个(P<0.05);TT-S100A13-GFP、TT-GFP和TT细胞经流式细胞仪检测S期的细胞比例分别为(6.47±0.14)%、(5.86±0.23)%和(5.99±0.28)%(P<0.05),G2/M期的细胞比例分别为(50.27±0.66)%、(39.39±0.23)%和(39.64±0.64)%(P<0.05)。结论:过表达S100A13基因对甲状腺癌TT细胞的增殖具有促进作用,促进TT细胞周期从G0/G1期向S期及G2/M期过渡。
- 曹仁贤田利娜文芳刘星钟警文格波
- 关键词：甲状腺肿瘤基因转染细胞增殖细胞周期
