上海市科学技术委员会资助项目(054119628)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：同济大学附属东方医院上海市第一人民医院更多>>
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- Mithramycin A对肝癌Huh-7细胞增殖和基因表达的影响
- 2009年
- 目的:研究光辉霉素A(mithramy-cin A,MIT)对人肝癌细胞Huh-7的作用。方法:CCK-8法观察MIT对Huh-7细胞的生长抑制作用;Realtime-PCR法和蛋白质印迹法检测MIT作用后Huh-7细胞中Sp1、VEGF和c-Met表达情况。结果:MIT作用Huh-7细胞48h时细胞生长抑制作用与浓度成正相关。5×10-4μmol/L时细胞增殖的抑制率为2.9%,5μmol/L时达92.4%。随时间延长抑制率逐渐增高,作用24h时抑制率为6.15%,60h达72.65%。半数抑制浓度(IC50)为60.12nmol/L。与对照组Sp1mRNA表达量(1.4599±0.2696)相比,其表达量与浓度有关,500nmol/L时其表达量(0.2743±0.1043)下降约为81.21%,P=0.0027。且其表达量与时间有关,与表达量(1.459856±0.269603)相比,加药72h时其表达量(0.430778±0.125143)明显下降,P=0.0034。VEGF和c-Met的mRNA表达量变化有一个相同的趋势,随浓度和时间增加表达逐渐下调。MIT对Sp1、VEGF和c-Met在蛋白水平的表达有抑制作用。结论:MIT对Huh-7细胞有明显的生长抑制作用。MIT能抑制人肝癌Huh-7细胞Sp1及其下游基因表达。
- 杨丽娟李宁周翡罗金红高勇王理伟
- 关键词：肝肿瘤原癌基因蛋白质C-MET
- 转录因子Sp1siRNA表达质粒的构建及对Huh-7肝癌细胞增殖的作用被引量：1
- 2009年
- 目的:通过转录因子Sp1的siRNA表达质粒作用于Huh-7肝癌细胞动物模型,探讨Sp1在肝癌细胞增殖方面的作用。方法:构建靶向抑制Sp1基因的siRNA表达质粒,转染表达有绿色荧光蛋白的肝癌Huh-7细胞,筛选稳定表达的siRNA转染克隆;Western印迹法检测Sp1的表达变化,CCK8法和裸鼠皮下成瘤实验分别检测转染后Huh-7细胞在体内及体外的增殖情况。结果:Sp1-siRNA表达质粒特异性抑制Huh-7细胞Sp1的表达,筛选后得到稳定的Sp1-siRNA细胞克隆,其细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。裸鼠皮下成瘤实验显示,质粒转染细胞接种21 d时Sp1-siRNA细胞种植瘤平均体积为(82.40±8.61)mm3,明显小于对照组的(160.00±20.27)mm3。结论:Sp1对Huh-7肝癌细胞具有重要的调控作用,siRNA抑制Sp1表达后可在体内外抑制Huh-7肝癌细胞增殖。
- 李宁杨丽娟周翡李琦高勇王理伟
- 关键词：肝细胞RNA小干扰细胞增殖
- Mithramycin A对肝癌细胞Huh-7增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究抗肿瘤抗生素光辉霉素(Mithramycin A,MIT)对人肝癌细胞Huh-7的作用。方法CCK-8比色法观察MIT对Huh-7细胞的生长抑制作用,Hoechst 33342/PI双荧光染色分析细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。结果MIT可抑制Huh-7细胞的生长,半数抑制浓度(IC50)为60.12 nmol.L-1。荧光显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;浓度为5×10-2μmol.L-1的MIT作用72 h后,可明显诱导Huh-7细胞凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰。结论MIT对Huh-7细胞有明显的诱导凋亡和生长抑制作用,具有浓度、时间依赖性。
- 杨丽娟李宁周翡罗金红高勇王理伟
- 关键词：HUH-7细胞凋亡
