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国家科技部农业科技成果转化资金(2009GB2C00161)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
凌琳
王成林
徐家萍
尤征英
周敬波
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相关机构:
安徽农业大学
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发文基金:
国家科技部农业科技成果转化资金
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农业科学
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原核表达
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CECROP...
机构
1篇
安徽农业大学
作者
1篇
杨莹
1篇
周敬波
1篇
尤征英
1篇
徐家萍
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王成林
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凌琳
传媒
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蚕业科学
年份
1篇
2011
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家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析
被引量:3
2011年
动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。
杨莹
王成林
徐家萍
尤征英
凌琳
周敬波
关键词:
家蚕
果蝇
抗菌肽
CECROPIN
原核表达
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