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国家科技部农业科技成果转化资金(2009GB2C00161)

作品数:1 被引量:3H指数:1
相关作者:凌琳王成林徐家萍尤征英周敬波更多>>
相关机构:安徽农业大学更多>>
发文基金:国家科技部农业科技成果转化资金国家自然科学基金更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 1篇原核表达
  • 1篇抗菌肽
  • 1篇基因
  • 1篇基因结构
  • 1篇家蚕
  • 1篇果蝇
  • 1篇CECROP...

机构

  • 1篇安徽农业大学

作者

  • 1篇杨莹
  • 1篇周敬波
  • 1篇尤征英
  • 1篇徐家萍
  • 1篇王成林
  • 1篇凌琳

传媒

  • 1篇蚕业科学

年份

  • 1篇2011
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析被引量:3
2011年
动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。
杨莹王成林徐家萍尤征英凌琳周敬波
关键词:家蚕果蝇抗菌肽CECROPIN原核表达基因结构
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