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应用DNA芯片技术筛选禽致病性大肠杆菌和尿道致病性大肠杆菌的差异表达基因: 2011年; 为研究禽致病性大肠杆菌强毒株E058的毒力相关基因在鸡体内、体外表达情况以及E058和尿道致病性大肠杆菌HEC4在LB和尿液中培养的表达情况,本研究分别提取E058株在SPF鸡体内及E058株和HEC4株在LB和尿液中静置培养的总RNA,与构建的DNA芯片杂交,检测和分析RNA的差异表达情况。芯片的检测结果表明:E058株在鸡体内和LB中培养差异表达基因共有9个,上调基因为5个,分别为neuC、iutA、cvaC、aes-15和iucCD;下调基因为4个,分别为aes-8、gyrB、aec-30和mdh。另外,芯片检测结果也显示E058株和HEC4株在LB和尿液中静置培养,具有相似的基因表达情况。; 宦海霞张科陈祥高崧刘秀梵; 关键词：禽致病性大肠杆菌毒力基因基因表达差异 DNA芯片

猪源大肠杆菌F18菌毛的体外表达和抗原特性被引量：2: 2014年; 【目的】揭示从仔猪腹泻和/或水肿病猪体内分离到的fedA+大肠杆菌所携带的毒力因子、F18菌毛在体外表达及其抗原变异情况。【方法】利用凝集试验测定O血清型,PCR方法检测毒力基因,单克隆抗体分析F18菌毛抗原特性。【结果】在75个fedA+分离株中,有62株测定出其O血清型,覆盖8种血清型,以O107和O139为主(74.2%);estI、estII、elt、stx-2e、astA、orfA、irp2、fyuA、ler和eaeA基因在这75个菌株中的检出率分别为64.0%、46.7%、28.0%、62.7%、26.7%、9.3%、9.3%、9.3%、1.3%和1.3%,其中仅拥有stx-2e基因的菌株有19株,同时拥有estI/estII/stx-2e基因的菌株有20株。单抗鉴定结果显示,在33株体外表达F18菌毛的菌株中,21株(63.6%)被鉴定为F18ac变体,2株(6.1%)被鉴定为F18ab变体,其余10株(30.3%)仅跟F18"a"因子单抗反应,而不跟F18"b"、"c"因子单抗反应。间接ELISA显示,11株单抗至少识别F18菌毛的6个表位,其中"a"因子至少有3个表位,"b"因子至少有2个表位,"c"因子至少有1个表位。【结论】在猪源菌株中,F18ab菌毛在体外表达率较低;F18ac菌毛在体外表达率较高,主要与肠毒素和O107血清型相关,同时我国存在F18菌毛的抗原变异。; 陈祥宦海霞万婷王雷高崧焦新安; 关键词：大肠杆菌 F18菌毛血清型毒力因子抗原特性

一养殖场中质粒介导喹诺酮类药物耐药基因qnrS的流行特性: 2013年; 【目的】研究质粒介导喹诺酮类药物耐药基因qnrS在一养殖场中的流行特点。【方法】分离养殖场不同来源样品中的大肠杆菌菌株,利用美国临床标准委员会(CLSI)推荐的药敏纸片法测定菌株耐药情况,通过质粒接合试验获得qnrS阳性接合子,测定qnrS对喹诺酮类药物最小抑菌浓度(MIC)值的影响及其与其它类抗生素耐药性的相关性,利用脉冲场凝胶电泳分析该场中qnrS阳性菌株遗传进化关系。【结果】环境源菌株qnrS的阳性率为29.2%,显著高于禽源菌株基因检出率(13.4%),新进的雏鸡可迅速从养殖场中获得qnrS基因并在鸡群中流行。qnrS基因可使接合子对喹诺酮类药物MIC值不同程度升高,并且与其它五类抗生素具有相关性,不同qnrS阳性菌株间遗传关系较远,但也存在同一克隆株的流行。【讨论】qnrS基因主要通过质粒的播散等进行水平传播,同时也存在同一克隆株的流行传播。qnrS基因多样性及其水平传播方式造成了它的广泛流行,加强对耐药基因的监测及研究对减少多重耐药菌株的产生具有重要意义。; 陈祥张维秋殷嘉浚张宁陈辰杨谡焦新安; 关键词：最小抑菌浓度多重耐药脉冲场凝胶电泳

猪源大肠杆菌同一质粒中检测到qnrA和aac(6')-Ib-cr耐药基因(英文)被引量：1: 2014年; 目的自1998年报道质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因(PMQR)qnrA以来,qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、oqxAB、qepA和aac(6’)-Ib-cr等质粒介导的耐药基因被陆续报道,本文对中国分离的猪源大肠杆菌进行质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因分析。方法在1998—2007年间从中国分离到的198株猪源大肠杆菌中,运用PCR、接合试验、药物敏感性试验、S1-PFGE和Southern blot等方法对其进行研究。结果和结论 2004年从辽宁省分离到的一株猪源大肠杆菌中含有qnrA1和aac(6’)-Ib-cr基因,另有2005年从江苏省同一猪场分离到的三株细菌中含有qnrA3和aac(6’)-Ib-cr基因。通过S1-PFGE和Southern blot证实qnrA和aac(6’)-Ib-cr位于同一质粒上,其共同转移可使环丙沙星MIC值升高32~128倍,并且接合子表现对氨苄西林的耐药性。; 陈祥张宁张维秋李秀王彦红焦新安; 关键词：大肠杆菌耐药基因

喹乙醇耐药基因oqxAB的发现与流行被引量：1: 2013年; 喹乙醇是一种喹噁啉-N1,N4-二氧化物,作为动物生长促进剂而被广泛使用,曾被认为是一种相对安全的抗菌药物。随着该药物在养殖业中的长期使用,其耐药问题也逐步被认识。2003年从丹麦猪粪中分离出一株大肠杆菌,含有介导喹乙醇耐药的接合型质粒pOLA52。次年研究发现质粒pOLA52携带外排泵基因oqxAB,不仅介导喹乙醇耐药,还能降低细菌对氯霉素、喹诺酮类药物的敏感性。因此,2009年oqxAB基因也被归为一种质粒介导的喹诺酮类药物耐药(Plasmid-mediated quinolone resistance,PMQR)基因。本文对喹乙醇耐药基因oqxAB的发现与流行做一综述。; 陈祥殷嘉浚焦新安

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国家自然科学基金(31001079)