国家科技支撑计划(2008BAI54B00)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：孟淑芳冯建平李德富吴雪伶樊金萍更多>>
- 相关机构：中国食品药品检定研究院中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 人血白蛋白辛酸钠应用于大鼠急性毒性的观察被引量：4
- 2012年
- 目的找出静脉注射人血白蛋白辛酸钠大鼠未出现急性症状的辛酸钠最大用量及毒效应特征。方法对110只SD大鼠经静脉分别一次性注射辛酸钠5.3、10.6、21.2、42.4、84.8 mg/ml(相当于临床使用的1、2、4、8、16倍)的人血白蛋白溶液[辛酸钠白蛋白组1～5(实验组1～5)]和水溶液(辛酸钠对照组)[2种溶液的每种辛酸钠浓度(组)各注射10只],注射剂量分别为50、100、200、400、800 mg/kg,另10只注射0.9%NaCl作为阴性对照,于注射后d3、d7、d14称体重、每天观察死亡等毒性表现和行为特征,14 d后解剖大鼠,观察其内脏器官病变。结果无论是辛酸钠白蛋白组还是辛酸钠对照组,当辛酸钠为42.4、84.8 mg/ml(临床使用的8、16倍)时均造成了大鼠注射后的应激反应,而辛酸钠为5.3、10.6和21.2 mg/ml(临床使用的1、2、4倍)时未对大鼠造成任何急性毒性作用。结论人血白蛋白中辛酸钠增加至21.2 mg/ml(临床使用浓度的4倍)时不会对大鼠造成任何急性毒性作用。
- 倪永碧丁亚凌张聪明柏玉碧邵建杨汇川
- 关键词：人血白蛋白辛酸钠SD大鼠急性毒性
- 重组细胞中鼠细小病毒检测方法的建立及初步应用被引量：4
- 2012年
- 目的建立生物技术产品用重组细胞中鼠细小病毒(Murine minute virus,MMV)污染的检测方法,并进行验证及初步应用。方法以NB324K细胞为指示细胞,建立MMV感染性检测方法,并以不同CCID50的MMV分别感染NB324K细胞,验证方法的灵敏度;通过设计针对编码非结构蛋白1(Non-structural protein 1,NS1)保守序列的引物和探针,建立用于重组细胞中MMV检测的实时荧光定量PCR,并对其线性、特异性、精密性、灵敏度、最低检测限及试验可行性和干扰性进行验证;将NB324K细胞感染试验与荧光定量PCR法相结合,建立NB324K细胞感染-PCR法,并通过对大量样本的检测,分析荧光定量PCR法和NB324K细胞感染-PCR法的可行性。结果 NB324K细胞感染试验的灵敏度为0.2 CCID50;荧光定量PCR检测方法最佳线性范围为1×108～1×104拷贝/μl,R2达0.99以上,特异性良好,与其他种属的细小病毒均无交叉反应,试验内和试验间Ct值的变异系数(CV)均小于5%,试验内病毒定量拷贝数的CV在20%～30%之间,试验间病毒定量拷贝数的CV在20%～50%之间,灵敏度为5×103拷贝/μl,最低感染性病毒颗粒检测限为2 CCID50。该方法能够用于细胞样品中MMV的检测,部分样品基质对病毒的检测具有一定的干扰性。NB324K细胞感染-PCR法的灵敏度为0.02 CCID50,检测时间可缩短为96 h,与荧光定量PCR法分别对47份样品进行检测,结果均为阴性。结论成功建立了MMV荧光定量PCR检测方法和NB324K细胞感染-PCR法,可应用于重组细胞中MMV污染的检测,为进一步提高生产用重组细胞的安全性奠定了基础。
- 吴雪伶樊金萍冯建平宋丽京孟淑芳李德富
- 关键词：荧光定量PCR细胞
