江西省教育厅科学技术研究项目([GJJ08399])
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：郭丹陈同强黄菲王洁邱立明更多>>
- 相关机构：赣南医学院赣南医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 用柱层析法检测中国龙虾主要变应原的研究
- 2013年
- 为分离、纯化和鉴定中国龙虾的主要变应原,采用硫酸铵沉淀法和等电点沉淀法对变应原粗浸液进行初分,在蛋白核酸检测仪检测控制下,用DEAE-52离子交换层析柱进行阶段洗脱和葡聚糖凝胶G-100柱层析,斑点ELISA确定其免疫活性。结果表明:中国龙虾变应原蛋白的硫酸铵沉淀范围在35%～60%之间,pH等于4.7、4.5时的等电点沉淀蛋白质有明显的变应原活性;离子交换层析中具变应原活性蛋白质峰含分子质量为15 000、20 700、34 000、60 000、83 200 u的蛋白质;葡聚糖凝胶G-100层析后具变应原活性蛋白峰SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示只有34 000 u相对分子质量的蛋白条带,纯度为91.5%。本试验分离、纯化鉴定出中国龙虾相对分子质量为34 000 u的主要变应原,对于变应原的标准化、提高食物变态反应性疾病诊断和治疗水平具重要意义。
- 陈同强郭丹李腾杉李佳廖剑霖李立明
- 关键词：中国龙虾变应原分离纯化
- 中国龙虾食物变态反应BALB_c鼠模型的建立被引量：3
- 2013年
- 通过腹腔注射的致敏方式建立中国龙虾食物变态反应Balb/c小鼠模型,探讨中国龙虾食物变态反应体外鉴定与评价方法。将40只雄性Balb/c小鼠分为卵清蛋白(OVA)阳性对照组、Coca’s液阴性对照组、空白对照组和模型组,以OVA、中国龙虾粗提蛋白,加氢氧化铝佐剂腹腔注射免疫Balb/c小鼠,建立食物变态反应小鼠模型。ELISA法测定第二次致敏激发后血清中IgE与组胺水平并进行被动皮肤过敏试验(PCA)确定特异性IgE抗体滴度,同时观察脾指数、小肠组织学变化及激发后的食物变态反应症状。末次激发后1h采血,中国龙虾粗提蛋白组血清IgE含量为236.75(±73.39)μg/L,与阳性对照OVA组无区别,与阴性对照Coca’s液组和正常对照组相比显著升高(P<0.01);中国龙虾粗提蛋白组的组胺含量406.55(±232.79)μg/L与正常对照组相比显著升高(P<0.01);PCA反应中国龙虾粗提蛋白组血清特异性IgE抗体滴度达到1/16;中国龙虾粗提蛋白组和OVA致敏组小鼠脾指数明显大于Coca’s液或正常对照组(P<0.01)且前两组小肠粘膜固有层皆出现淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等炎性细胞浸润。建立了一种中国龙虾食物变态反应小鼠模型,通过ELISA测定血清IgE和组胺以及PCA确定特异性IgE抗体滴度可作为一种鉴定与评价中国龙虾食物变态反应的方法。
- 陈同强邱立明黄菲徐杨剑雄王洁郭丹
- 关键词：中国龙虾BALB食物变态反应
