云南省高层次科技人才培引工程(2002PY11)
- 作品数：5 被引量：27H指数：4
- 相关作者：李华谢忠平龙润乡宋霞洪超更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：云南省高层次科技人才培引工程更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 丙型肝炎病毒抗原检测试剂在临床诊断中的初步应用被引量：4
- 2006年
- 本文利用重组丙型肝炎病毒(HCV)多表位复合抗原免疫动物制备抗HCV多克隆抗体,建立HCAgELISA检测方法,对不同的临床样品进行检测,分析不同临床样品HCAg检出率,并与荧光定量PCR结果进行对比。95份HCAb阳性的样品中,51份样品HCAg阳性,阳性率为53.7%;88份重症肝病患者血清中检出HCAg阳性33份,阳性率为37.5%,均明显高于其它样品(P<0.05);73份肝功异常但HCAb阴性血清样品,检出HCAg阳性8份,阳性率为11.0%;HCAg与HCAb之间存在相关性(r=0.5076,P<0.01),HCAg与HCV-RNA符合率为85.7%。HCAg ELISA检测可作为临床HCV诊断的检测指标,为临床早期诊断及治疗预后提供依据。
- 谢忠平李华龙润乡宋霞洪超熊秋霞李文忠崔萍芳
- 关键词：丙型肝炎病毒抗原酶联免疫吸附法
- 甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法的研究及应用被引量：9
- 2010年
- 目的建立甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法。方法用双抗体夹心ELISA法检测试剂对甲型肝炎灭活疫苗及效力试验参比进行检测,以检测OD值为反应指标,用生物检定双平行线法的基本原理进行统计分析,计算待检疫苗对应于效力参比品的相对效力(R值)。结果样品HAAg含量与检测OD值之间具有高度的相关性,R2≥0.97,适用于建立双平行线检定方法;通过对3批样品3人次检测结果分析,验证了所建立方法的可靠性,回归、偏离平行、二次曲线、反二次曲线4个指标全部通过了验证;用所建立的体外相对效力试验检测法对32批次甲肝灭活疫苗进行检测,结果与小鼠体内效力检测结果具有良好一致性,均能反映疫苗相对效力,两种方法检测相对效力(R值)之间无明显差别(t=1.0354,P=0.3045)。结论所建立的甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力试验是一种灵敏、特异、方便、快捷的效力测定方法,可应用于甲型肝炎灭活疫苗效力检测。
- 谢忠平龙润乡李华陈洪波宋霞黄铠洪超杨蓉白惠珠
- 关键词：甲型肝炎病毒甲型肝炎灭活疫苗效力抗原
- 利用HCV多表位复合抗原制备高效价抗体被引量：8
- 2005年
- 目的利用HCV多表位复合抗原免疫家兔制备高效价抗HCV多克隆抗体,为改进丙型肝炎病毒抗原的诊断试剂盒提供必要条件。方法HCV多表位复合抗原与完全弗氏佐剂混合免疫家兔,获得高效价抗血清,经硫酸铵沉淀及PrintA/G亲和层析纯化。结果已获得效价大于1∶16000的抗HCV多克隆抗血清,经纯化后达电泳纯。该抗体能与HCVNS3、NS5及C抗原特异性结合。结论HCV多表位复合抗原具有较好的免疫原性,可用于改进HCV病毒抗原诊断试剂。
- 谢忠平崔萍芳宋霞李华龙润乡洪超熊秋霞李文忠李琦涵
- 关键词：丙型肝炎病毒多克隆抗体诊断试剂盒免疫原性家兔
- 抗-HCV多表位抗体在检测HCV抗原中的应用被引量：5
- 2006年
- 目的 应用丙型肝炎病毒多表位抗体，探索从血浆或血清样品中检测丙型肝炎病毒抗原（HCAg）的可能性，为献血员筛选及临床早期诊断提供检测方法。方法 利用原核系统表达的丙型肝炎病毒（HCV）7个高度保守区基因的多表位复合抗原免疫动物，制备抗-HCV多克隆抗体，采用ELISA双抗体夹心法检测血浆或血清中的HCAg，并与RT-PCR法进行比较。结果 制备的抗-HCV多表位复合抗原多克隆抗体，在用ELISA法检测HCAg中表现出较高的特异性及灵敏性，Cutoff值为0．239，批内CV值为5．60％～6．65％，批间CV值为7．80％。与RT-PCR比较，相关系数为0．816，灵敏度为88．89％，特异度为96．30％，一致性为95．24％，调整一致性为90．82％，阳性预测值为80．00％，阴性预测值为98．11％。HCAg检出率与美国ORTHO公司HCV—C抗原检测试剂盒差异无显著意义（P=0．06）。结论 用HCV多表位复合抗原制备的多克隆抗体，采用ELISA双抗体夹心法检测HCAg，具有灵敏、特异、快速的优点，有望开发成为HCAg诊断试剂盒。
- 谢忠平龙润乡宋霞李华李文忠熊秋霞洪超崔萍芳李琦涵
- 关键词：丙型肝炎ELISA
- 人呼吸道合胞病毒A_2株在不同细胞中的培养及其影响因素被引量：4
- 2009年
- 目的在不同细胞中培养人呼吸道合胞病毒(HRSV),并分析其影响因素,为病毒的大量增殖创造条件。方法将HRSVA2株分别接种至人二倍体KMB17细胞、Vero细胞、人喉癌Hep-2细胞及HeLa细胞进行培养,采用微量细胞病变法检测病毒的感染性滴度,并进行间接免疫荧光试验及合胞体观察。检测吸附时间、维持液pH值和培养温度对病毒增殖的影响。结果4种细胞中,Vero细胞对HRSV最敏感,病变早、病毒感染性滴度可达6.83lgCCID50/ml;KMB17细胞相对敏感性不高,但仍能良好增殖,病毒感染性滴度达6.13lgCCID50/ml;Hep-2细胞及HeLa细胞介于Vero细胞和KMB17细胞之间,病毒感染性滴度也达到6.83lgCCID50/ml。间接免疫荧光试验显示病毒在细胞浆内增殖。吸附时间对HRSV的增殖无明显影响;维持液的pH值对HRSV的增殖及病变特点均有一定的影响,在pH7.0～7.2时可快速引起细胞产生病变,并能达到最高感染性滴度;HRSV在37℃及32℃下培养均能良好地增殖。结论HRSVA2株在KMB17、Vero、Hep-2及HeLa细胞内均可增殖,但敏感性有一定差异,且对培养条件有一定的要求。
- 谢忠平李华龙润乡易红昆沈冬李志强崔萍芳蒋蕊鞠
- 关键词：人呼吸道合胞病毒细胞培养影响因素
