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稳定转染H_3受体基因的HEK293细胞株的鉴定及新型非咪唑类H_3受体拮抗剂的筛选: 2013年; 目的:鉴定转染大鼠组胺H3受体基因的HEK293细胞株受体表达情况,筛选具有H3受体拮抗活性的新型非咪唑类化合物。方法:利用RT-PCR和免疫印迹的方法检测转染细胞株组胺H3受体的表达,以阳性刺激物forskolin诱导细胞内cAMP含量升高为指标,初步筛选具有拮抗作用的化合物。结果:细胞鉴定结果显示,稳定转染H3受体基因的HEK293细胞株高表达大鼠H3受体。H3受体选择性激动剂(R)-α-甲基组胺可浓度依赖性抑制阳性刺激物forskolin(10μmol/L)诱导的cAMP含量升高(P<0.05),当(R)-α-甲基组胺浓度达到30 nmol/L时,抑制率接近平台值(P>0.05)。而H3受体拮抗剂噻普酰胺和新合成的非咪唑类化合物XHA23及XHA25则能够浓度依赖性阻断(R)-α-甲基组胺对forskolin诱导的cAMP含量升高的抑制作用(P<0.05),IC50分别为3.62μmol/L、0.49μmol/L、0.14μmol/L。结论:高表达H3受体的HEK293细胞株可用于有H3受体拮抗活性化合物的筛选,而非咪唑类化合物XHA23和XHA25具有一定的H3受体拮抗剂样活性。; 何萍谭丽胡薇薇戴海斌胡永洲陈忠; 关键词：环AMP 咪唑类转染

内源性组胺减轻小鼠前脑缺血再灌注后期脑损伤被引量：1: 2014年; 目的：研究内源性组胺在前脑缺血再灌注后期的神经保护作用。方法：将野生型（wr）小鼠和组氨酸脱羧酶基因敲除（HDC-KO）小鼠各随机分为对照组和缺血组，缺血组小鼠双侧颈总动脉夹闭30rain以建立前脑缺血模型，比较再灌后可WT和HDC-KO小鼠的体重变化和死亡率，并在再灌14d时对各组存活小鼠进行条件性恐惧学习记忆测试，再灌3d及15d时，对各组小鼠取脑，制作冰冻切片，进行甲苯胺蓝染色，观察海马CAl区神经元损伤情况。结果l再灌1d后，wr和HDC-KO小鼠均出现体重下降，再灌4d．5d、6d及7d后，HDC．KO小鼠的体重恢复程度均显著低于WT小鼠。前脑缺血再灌8—14d，HDC-KO小鼠的死亡率显著高于wr小鼠（P〈0．05）。再灌14d后，HDC·KO小鼠的背景及线索记忆能力均显著低于可WT小鼠（P〈0．05）。再灌3d后，HDC．KO和wT小鼠的海马CAl区神经元密度无显著差异，而再灌15d后，HDC．KO小鼠海马CAl区神经元密度显著低于WT小鼠（P〈0．05）。结论：内源性组胺可减轻脑缺血再灌注后期的学习记忆能力下降及神经元缺失，但其作用机制有待进一步研究。; 范彦英马云鹏乔圆何萍张轩萍Hiroshi OHTSU陈忠; 关键词：前脑缺血神经元损伤

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浙江省教育厅科研计划(Y201122427)