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国家自然科学基金(30070032)

作品数：12 被引量：62H指数：5
相关作者：张传溪顾奇伟杨丽荣严兴成王芳更多>>
相关机构：浙江大学中国农业科学院茶叶研究所内蒙古农业大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金浙江省科技计划项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 8篇农业科学
  • 3篇生物学

主题

  • 5篇多角体
  • 5篇基因
  • 5篇核型多角体
  • 5篇核型多角体病
  • 5篇核型多角体病...
  • 4篇进化
  • 4篇分子进化
  • 4篇病毒
  • 3篇多角体病毒
  • 3篇棉铃
  • 3篇棉铃虫
  • 3篇棉铃虫核型多...
  • 2篇亚细胞
  • 2篇亚细胞定位
  • 2篇杀虫
  • 2篇杀虫剂
  • 2篇细胞
  • 2篇细胞定位
  • 2篇酶基因
  • 2篇昆虫细胞

机构

  • 10篇浙江大学
  • 2篇中国农业科学...
  • 1篇北京大学
  • 1篇东北林业大学
  • 1篇河南农业大学
  • 1篇内蒙古农业大...

作者

  • 10篇张传溪
  • 3篇严兴成
  • 3篇杨丽荣
  • 2篇聂婷婷
  • 2篇肖强
  • 2篇顾奇伟
  • 2篇安世恒
  • 2篇林同
  • 1篇尚金燕
  • 1篇段立清
  • 1篇王芳
  • 1篇殷坤山
  • 1篇郭忠建
  • 1篇高国辉
  • 1篇冷杨
  • 1篇徐海君
  • 1篇王志英
  • 1篇章亦卿
  • 1篇刘宽余
  • 1篇杜孟芳

传媒

  • 2篇中国病毒学
  • 2篇茶叶科学
  • 1篇昆虫学报
  • 1篇微生物学报
  • 1篇河南农业大学...
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇Entomo...
  • 1篇常熟理工学院...

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2006
  • 3篇2005
  • 2篇2004
  • 2篇2003
  • 1篇2002
共 12 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
灰斑古毒蛾核型多角体病毒几丁质酶基因及其分子进化被引量：7
2005年
通过对构建的灰斑古毒蛾Orgyiaericae单粒包埋型核型多角体病毒(OrerSNPV)基因组DNA的EcoRI酶切片段质粒文库的测序分析,在EcoRI—J片段(6.4kb)中鉴定出了编码几丁质酶(ChiA)基因开放阅读框(ORF),chiA基因编码区由1695bp组成,编码564个氨基酸,预计蛋白质分子量为62kD。这也是首次在基因序列水平上研究OrerSNPV。将OrerSNPVChiA氨基酸序列与其它已知的18种杆状病毒ChiA氨基酸序列联配比较,结果表明OrerSNPV与其它杆状病毒ChiA氨基酸有60.3-69.5%同源性,其中与BmNPV、CfDEFNPV和LdMNPV的同源性最高。根据氨基酸序列绘制的分子进化树表明杆状病毒chiA基因至少可以分为SlMNPV、GV和其它NPV三个分支,Or erSNPV与LdMNPV在进化树上关系最为接近。
聂婷婷严兴成许美良段立清杨丽荣张传溪
关键词：灰斑古毒蛾分子进化几丁质酶基因基因编码区BMNPV质粒文库
茶毛虫NPV的P24、Rr1、Lef1基因及其分子进化分析被引量：3
2005年
克隆和测定了茶毛虫核型多角体病毒(EupsNPV)全长5942bp的EcoRI-XhoI基因组DNA片段。序列分析表明该片段包含5个完整的开放阅读框(ORF),分别编码P24、Rr1、38.7K、Lef1和Ep-ld124。通过对上述5个基因与其它已知杆状病毒的同源基因的分析比较,以及对P24、Rr1和Lef1的分子进化树分析,表明EupsNPV是一种与已知杆状病毒都有较大差异的病毒种类,属于NPVII组病毒。结果还表明EupsNPV与茶尺蠖(Ectropisobliqua)核多角体病毒(EcobSNPV)的亲缘关系最为接近。本文报道的序列的EMBL登录号为AJ920288。
聂婷婷肖强殷坤山邢丽苹张传溪
关键词：茶毛虫核型多角体病毒P24分子进化
棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPV)ORF99基因在昆虫细胞中的表达及亚细胞定位被引量：1
2010年
棉铃虫核型多角体病毒ORF99基因Ha99是其基因组中特有的一个基因,序列分析发现Ha99基因开放阅读框包含354 bp核苷酸,编码118个氨基酸残基,预测相对分子质量为13 kDa.Ha99基因进一步在Bac-to-Bac系统中进行表达,SDS-PAGE和Western blot分析显示Ha99基因得到了成功表达,表达的相对分子质量为13kDa,与预测的大小相符.亚细胞定位分析表明,ORF99基因的表达产物主要定位在细胞质中.时序表达分析显示Ha99基因在病毒侵染后6 h开始表达,一直持续到侵染后122 h,表明Ha99基因是一个晚期表达的基因.
安世恒杜孟芳张传溪
关键词：棉铃虫核型多角体病毒细胞定位
重组杆状病毒杀虫剂的生物安全性被引量：4
2003年
分别就重组杆状病毒杀虫剂对捕食性天敌和寄生性天敌的影响、与其它生物间的基因重组和生态效应等问题进行了综述。研究成果表明 ,重组病毒的生态适应性降低 ,因而对生态环境以及捕食性和寄生性天敌等非靶标生物种类的危险性也大大降低。但重组病毒也不是绝对安全的 ,对其生物安全性还要进行长期、深入全面地分析和研究。
林同张传溪
关键词：杆状病毒重组病毒杀虫剂生态效应
棉铃虫核型多角体病毒sod基因在大肠杆菌中的表达被引量：5
2003年
用PCR方法从棉铃虫(Helicoverpa armigera)单粒包埋型核型多角体病毒(HaSNPV)C1株基因组中扩增sod基因编码区,克隆到pGEM-T-easy vector,测定了核苷酸序列。将基因编码区克隆到原核表达载体pETblue2,构建了含表达质粒pETblue2/HaSNPV SOD,转化大肠杆菌DE3(BL21)进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表明SOD的表达量约为细胞总蛋白的37％。邻苯三酚法测定表达蛋白活性,结果表明每毫克菌体可溶性总蛋白中表达产物校正酶活力单位为694U/mg。
高国辉张传溪
关键词：棉铃虫核型多角体病毒SOD基因大肠杆菌
灰斑古毒蛾核型多角体病毒三个晚期表达因子基因被引量：8
2004年
将灰斑古毒蛾(Orgyiaericae)单粒包埋型核型多角体病毒(OrerSNPV)基因组DNA的各EcoRI酶切片段进行克隆和测序。序列分析结果表明EcoRI-M(3.0kb)与EcoRI-P片段(2.2kb)相连处含有编码晚期表达因子(LEF-2)的开放阅读框(ORF)。同时在EcoRI-E(约10kb)片段两端分别含有lef-3和lef-11基因的部分序列。lef-2基因编码区由648bp组成,可编码216个氨基酸残基的多肽,预计蛋白质分子量为23.7kDa。将OrerSNPVLEF-2氨基酸序列与其它已知的27种杆状病毒的LEF-2序列比较,发现OrerSNPV与其它鳞翅目NPVLEF-2氨基酸有35%～49%同源性,其中与BusuSNPV、MaMNPV-A、HezeSNPV、HearSNPV和LdMNPV同源性最高,和GV有26%～31%同源性,与膜翅目松柏锯角叶蜂NPV的同源性为32%,与库蚊杆状病毒的同源性只有23%。根据氨基酸序列绘制的分子进化树表明28种杆状病毒lef-2基因可以分为鳞翅目NPV、GV、膜翅目NeseNPV与双翅目CulexnigripalpusBaculovirus四个分支。OrerSNPVlef-2与BusuSNPV在进化树上关系最为接近,而OrerSNPVlef-3和LdMNPV的最接近,OrerSNPVlef-11则和SeMNPV的关系最接近。
顾奇伟杨丽荣严兴成尚金燕高瞻张传溪
关键词：分子进化
HaSNPV几丁质酶基因在大肠杆菌和昆虫细胞中的表达及其产物对Bt杀虫剂的增效作用被引量：18
2004年
为了探索杆状病毒几丁质酶对微生物杀虫剂的增效作用及其利用途径 ,分别在大肠杆菌和昆虫细胞中表达棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒 (HaSNPV)几丁质酶 .用PCR方法扩增出不含N端信号肽编码序列的几丁质酶基因片段 ,并分别克隆至原核表达载体pET2 8a和重组到杆状病毒BactoBac表达系统 ,在大肠杆菌 (E .coli)BL2 1和粉纹夜蛾 (Trichoplusiani)细胞系Tn 5B1 4中分别进行了表达 .在大肠杆菌中表达量约占细菌总蛋白 15 % ,在昆虫细胞中表达量约占细胞总蛋白10 % .将含有几丁质酶的大肠杆菌和昆虫细胞表达产物添加到苏云金杆菌 (Bt)菌液中一起喂食 2龄家蚕 .结果显示 ,HaSNPV几丁质酶基因的 2种表达产物和Bt杀虫剂的混合物使处理的家蚕的致死时间较对照处理均明显缩短 .昆虫细胞和大肠杆菌表达产物与Bt混合物处理的LT50 分别从 93 5h和 95 1h缩短到 5 6 2h及 6 7 2h ,并且供试家蚕的生长速度明显缓慢 .研究结果表明 。
王芳顾奇伟武家才张传溪
关键词：HASNPV几丁质酶真核表达BT杀虫剂
棉铃虫核型多角体病毒ORF33基因的原核表达和在宿主细胞中亚细胞定位(英文)被引量：3
2006年
对棉铃虫Helicoverpa ar migera核型多角体病毒HearSNPV的ORF33基因(ha33)进行克隆和原核表达,hass在E.coli中表达不完全,表达产物的大小为17kDa,小于预测的分子量28.4kDa。用纯化的原核表达产物免疫家兔,制备了多克隆抗体,应用多克隆抗体检测了HearSNPV感染的宿主细胞(HzAMI)中ORF33基因的表达,表达产物的分子量为31kDa。并通过共聚焦荧光显微镜方法,用多克隆抗体检测编码的蛋白在宿主细胞(HzAM1)中的亚细胞定位,发现ha33编码的蛋白存在于宿主细胞的细胞质中,并持续到感染后期。
王敦严兴成Shyam Kumar郭忠建张传溪安世恒
关键词：亚细胞定位
茶刺蛾核型多角体病毒与其它杆状病毒关系的基因分析被引量：10
2005年
茶刺蛾核型多角体病毒Iragoides fasciata Nucleopolyhedrovirus(IrfaNPV)是新分离的一种杆状病毒.本研究克隆和分析了IrfaNPV的AcORF47 同源基因和VP80基因.AcORF47同源基因与苜蓿丫纹夜蛾多粒包埋型核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleocapsid nucleopolyhedrovirus,MNPV,AcMNPV)的ORF47和家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)的ORF38有42%的同源性,与薄荷灰夜蛾多粒包埋型核型多角体病毒(Rachiplusia ou multiple nucleocapsid nucleopolyhedrovirus,RaouMNPV)的ORF44有40%的同源性.IrfaNPV的VP80 C端222氨基酸与17种NPV特有结构蛋白VP80/P87有25%~58%同源性.在18种VP80/P87分子进化树上,IrfaNPV与AcMNPV、BmNPV和RaouMNPV的亲源关系最为接近.
杨丽荣肖强冷杨徐海君章亦卿张传溪
关键词：茶刺蛾核型多角体病毒分子进化
THE CLONING, SEQUENCING AND EXPRESSION OF THE LdMNPV POLYHEDRIN GENE被引量：2
2002年
LdMNPV-NEFU isolate collected from the forestry farm of Northeast Forestry University was purified and the genomic DNA of LdMNPV was extracted. The LdMNPV polyhedrin gene was cloned by PCR. The results showed that the sequence was an open reading frame (ORF) of 735bp capable of encoding 245 amino acids. The polyhedrin gene sequences of the LdMNPV-NEFU isolate and a Canada strain, LdMNPV-G differed in 5 bases. The polyhedrin gene of the LdMNPV-NEFU isolate contained C, G, T, C and G at 54, 109,379, 508 and 701 sites from the start codon, but the LdMNPV-G isolate contained G, C, C, T and T at the corresponding sites respectively. The same amino acids were encoded by the two ORF sequences, with the exception that Asp and His are encoded by GAC on the polyhedrin gene sequence of the LdMNPV-NEFU isolate and by CAC in the LdMNPV-G isolate. The LdMNPV polyhedrin gene was expressed in E.coli BL21 (DE3) by the pT7-7 plasmid vector.
林同张传溪安成才王志英刘宽余苑华毅
关键词：CLONEEXPRESSION
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