国家自然科学基金(30571382)
- 作品数：5 被引量：62H指数：4
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- 相关机构：吉林农业大学北京出入境检验检疫局大连大学更多>>
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- 猪传染性胃肠炎病毒S1基因在食品级乳酸菌中的表达被引量：4
- 2015年
- 猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)纤突蛋白S携带主要的B淋巴细胞抗原表位,是诱导机体产生中和抗体和提供免疫保护作用的主要结构蛋白,本试验通过PCR扩增,获得TGEV S蛋白上约1 218bp的保护性抗原基因S1,将其克隆到pMD18-T载体并进行核酸序列测定。通过双酶切连接成功获得重组质粒pNZ8149-S1,电转化至乳酸乳球菌NZ3900中,经乳链菌肽诱导,SDS-PAGE和Western-Blot分析结果显示,TGEV S1基因获得了表达,表达产物具有反应原性。间接免疫荧光试验结果表明,重组乳酸菌表达的蛋白位于菌体表面。
- 赵艳丽柏亚铎陈中秋董宏伟董浩高超王开邵洪泽胡桂学
- 关键词：TGEVS1基因乳酸菌
- 猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻疫苗研究进展被引量：17
- 2007年
- 猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻均是由冠状病毒引起,患病仔猪以呕吐、腹泻、脱水为特征。目前,对这两种病的预防和控制以接种疫苗为主。本文就各种疫苗近年来的研究进展进行了综述,并指出了研究中存在的问题以及未来展望,希望能为这两种传染病疫苗的进一步研究提供新的思路。
- 刘岩柏亚铎鲁娜董丽娜胡桂学
- 关键词：猪传染性胃肠炎猪流行性腹泻疫苗
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因重组乳酸菌免疫小鼠的研究被引量：5
- 2011年
- 将含有猪传染性胃肠炎病毒S基因的重组乳酸菌PNZ8149/NZ3900口服(灌胃)免疫BALB/C小鼠,第3次加强免疫后10 d捕杀小鼠,采集血液、脾脏、粪便,处理后采用T淋巴细胞增殖试验及间接ELISA方法,检查免疫小鼠对外源基因表达产物的应答情况。结果表明,含有S基因的重组乳酸菌经口服免疫小鼠后,血清中的IgG、粪便中的sIgA与对照组有明显的差异(P<0.05)。结果说明,含有猪传染性胃肠炎病毒S基因的重组乳酸菌,可以诱导小鼠产生良好的针对猪传染性胃肠炎病毒的全身体液和黏膜免疫应答。
- 刘义陈中秋董丽娜胡桂学
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S基因小鼠
- 表达猪流行性腹泻病毒COE基因的重组乳酸菌的构建与鉴定被引量：27
- 2008年
- 用疑似患猪流行性腹泻病(PED)的病猪肠病料,根据猪流行性腹泻病毒(PEDV)S糖蛋白基因设计引物进行RT-PCR扩增,获得531 bp的PEDV部分保护性抗原基因,将其克隆入pMD18-T载体后测序,核苷酸序列与PEDV CV777株相应序列的同源性为99.4%。根据测序结果和表达载体特点,设计一对引物,扩增PEDV部分保护性抗原基因(COE基因)501 bp片段。将COE基因与乳酸乳球菌表面表达载体pNZ8149进行连接,电击转化入食品级乳酸乳球菌NZ3900细胞。重组菌以1 ng/mL乳链菌肽(Nisin)诱导,通过SDS-PAGE和Western blot分析,PEDV部分S蛋白成功表达,并具有反应原性。间接免疫荧光试验表明,重组菌表达蛋白定位于菌体细胞表面。
- 董丽娜高凤山许崇波胡桂学姜海龙
- 关键词：PEDV克隆乳酸乳球菌
- 食品级乳酸菌表达系统的研究进展被引量：11
- 2010年
- 乳酸菌以其安全、操作简单等优点被广泛用于表达外源基因,在食品、农业及医药工程领域,具有广阔的应用前景,开发了一系列乳酸菌食品级基因表达系统。目前已建立了糖诱导表达系统、噬菌体φ31暴发式诱导表达系统、乳链球菌素调控表达系统、温控表达系统等。随着基因工程技术的发展,以重组乳酸菌作为基因工程菌的时代将要到来。
- 王莹胡桂学
- 关键词：乳酸菌食品级基因工程
