山西省自然科学基金(20041117)
- 作品数：4 被引量：44H指数：3
- 相关作者：向川卫小春杜靖远翁习生邢学武更多>>
- 相关机构：山西医科大学第二医院华中科技大学北京协和医院更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pcDNA3+转化生长因子-β1单独转染及其与pAT_(153)+胰岛素样生长因子-1共转染兔软骨细胞的研究被引量：12
- 2005年
- 目的探讨重组大鼠转化生长因子β1基因(pcDNA3+TGFβ1)单独转染及其与重组大鼠胰岛素样生长因子1基因(pAT153+IGF1)共转染兔软骨细胞后细胞增殖及所分泌的TGFβ1因子、IGF1因子、Ⅱ型胶原的变化。方法兔软骨细胞体外分别用pcDNA3+TGFβ1单转染、pcDNA3+TGFβ1和pAT153+IGF1共转染,筛选阳性克隆后,进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、3HTdR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)检测。结果基因转染组与空白组相比,TGFβ1、IGF1、Ⅱ型胶原的含量均明显提高,空白组、基因单转染组、基因双转染组软骨细胞位于S期的比例分别为5.6%、33.4%、40.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基因pcDNA3+TGFβ1、pAT153+IGF1转染软骨细胞后,细胞分泌的TGFβ1、IGF1及Ⅱ型胶原显著增多,细胞增殖明显增强,上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高;pcDNA3+TGFβ1和pAT153+IGF1双基因共转染软骨细胞后,细胞分裂增生活跃程度及分泌的TGFβ1、IGF1和Ⅱ型胶原含量高于pcDNA3+TGFβ1单基因转染,多基因共转染作为将来骨性关节炎基因治疗的方法,其治疗效果可能会优于单基因转染。
- 向川卫小春杜靖远
- 关键词：基因转染软骨细胞骨性关节炎
- 转化生长因子-β1基因和胰岛素样生长因子1基因联合转染治疗兔膝骨性关节炎的研究被引量：22
- 2005年
- 目的观察重组大鼠转化生长因子(TGF)-β1和胰岛素样生长因子(IGF)-1基因转染兔膝关节后对骨性关节炎(OA)的治疗效果。方法前交叉韧带切断法(ACLT)将新西兰白兔膝关节制成OA模型,分为5组,分别向膝关节内注射转染了不同重组基因的阳性克隆软骨细胞。4 周和8周后,取关节标本进行Mankin’s评分,AB-PAS染色,TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原原位杂交和免疫组织化学检测,透射电镜观察。结果手术对照组软骨损伤程度较大,其Mankin’s评分为 9．50±0．96(4周)和12．5±1．71(8周),明显高于空白对照组(P<0．01)和TGF—β1基因转染组、双基因转染组(P<0．05);各因子原位杂交和免疫组织化学染色,空白对照组(P<0．01)及TGF-β1 基因转染组、双基因转染组(P<0．05)的灰度值高于手术对照组;双基因转染组的灰度值较单基因转染组高(P<0．05);8周时各对应组灰度值较4周有明显下降(P<0．05);透射电镜观察显示,手术对照组的超微结构较空白对照组明显紊乱,经基因治疗4周后,超微结构逐渐恢复正常,但在8 周后,其紊乱程度又逐渐加重。结论关节内注射转基因软骨细胞对OA有一定治疗作用;TGF-β1 和IGF-1双基因的治疗效果优于单基因;基因治疗4周后,基因表达逐渐减弱,基因治疗具有时效性。
- 向川杜靖远翁习生卫小春
- 关键词：骨性关节炎软骨细胞胰岛素样生长因子1转化生长因子-Β1
- 骨转换生化标志物及其应用研究进展被引量：10
- 2009年
- 骨重建是一个骨吸收和骨形成的过程,而该过程中的骨吸收和骨形成分别由破骨细胞和成骨细胞介导。骨转换加速是骨代谢疾病发生的重要原因,细胞活动耦联的中断伴随骨转换加速过程。在过去几十年中,一直致力于对可以反映骨转换的生化标志物的研究。大量研究表明,血清或尿液中的生化标志物与骨丢失率和骨折风险相关,这对于高风险患者的确定有重要意义。笔者对近年来骨转换生化标志物及其临床应用研究进展进行综述,特别关注其在药物功效的临床试验和骨量测量的补充这两方面的应用。有针对性地运用生化标志物可以进一步优化高风险患者的确定、药物开发的过程以及骨质疏松症治疗疗效的临床监测。虽然生化标志物有各种各样的变异性,但必将以其无创性、易重复性和及时性的优点而被广泛运用。
- 邢学武向川卫小春
- 关键词：骨密度骨质疏松症
- 逆转录病毒载体介导的白细胞介素-1受体拮抗剂和转化生长因子-β1联合基因体外转染兔膝关节软骨细胞表达的研究被引量：3
- 2013年
- 目的运用重组逆转录病毒载体介导白细胞介素-1受体拈抗剂（IL-1Ra）和转化生长因子-β1（TGF-β1），分别和共同体外转染兔膝关节软骨细胞，观察其在关节软骨细胞中的表达及其对软骨细胞生物学性状的影响。方法构建含有目的基因的表达载体PLNCX2-IL-1Ra-GFP和PLNCX2-TGF-β1-RFP，分别和联合体外转染到兔膝关节软骨细胞，采用NO检测试剂盒检测基因转染对软骨细胞的影响，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清液中hlL-IRa和hTGF-β1的表达。结果成功构建真核表达载体PLNCX2-IL-1Ra-GFP和PLNCX2-TGF-β1-RFP并稳定转染软骨细胞；培养液NO含量检测基因转染组[hlL-1Ra：（92．15±5．36）μmol／L．；hTGF-β1：（89．71±5．43）μmol／L；hlL-1Ra＋hTGF-βl：（94．93±4．88）μmol／L]均比空载体组（60．19±4．68）μmol／L和空白组（57．23±4．29）μmol／L高，差异有统计学意义（P〈0．05），基因转染组间差异无统计学意义（P〉0．05），非基因转染组间差异无统计学意义（P〉0．05）；ELISA检测发现基因转染组均有一定量hlL-1Ra和hTGF-β1表达，空白组与空载体组均无基因表达，基因转染组与非基因转染组间比较差异有统计学意义（P〈0．05），单基因转染组和联合基因转染组问差异无统计学意义（P〉0．05）。结论逆转录病毒载体PLNCX2介导的IL-1Ra和TGF-β1能有效的转染到兔膝关节软骨细胞并获得一定程度表达，转染后的软骨细胞增生活跃。
- 向川刘君卫小春耿俊海
- 关键词：逆转录病毒转化生长因子-Β1软骨细胞
