国家科技重大专项(2003AA2Z2060)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：吕彩云王权陈燕军张建武胡永浩更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所甘肃农业大学上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 动物冠状病毒通用PCR方法的建立及基因序列分析被引量：4
- 2007年
- 参考GenBank中公布的冠状病毒相关序列,根据动物冠状病毒聚合酶基因的保守区段设计一对通用引物。用这对引物对犬冠状病毒、猫冠状病毒等8种动物冠状病毒的cDNA模板进行通用PCR扩增和通用PCR反应条件的优化,结果均得到与试验设计相符的449 bp条带;特异性试验结果表明犬冠状病毒、猫冠状病毒等均扩增出449 bp目的条带,而阴性对照没有。敏感性试验结果表明,其敏感程度与常规PCR方法相同。将扩增的聚合酶基因与冠状病毒的参考毒株进行同源性比对,同源率在56.69%～99.55%之间。进化树分析结果与文献中对冠状病毒根据血清学与基因学角度分类报道相一致。
- 吕彩云王权张建武陈燕军胡永浩
- 犬冠状病毒TN449株M基因的克隆与转移载体的构建被引量：2
- 2005年
- 用蔗糖密度梯度离心纯化犬冠状病毒TN449株病毒液,提取总RNA并反转录,同时设计1对5′端加有BamHⅠ和HindⅢ内切酶位点的引物,对病毒cDNA进行了PCR扩增,回收PCR产物将其连接入pGEM-TEasy载体并转化大肠埃希氏菌。并对阳性重组质粒菌测序和序列分析。结果,犬冠状病毒与牛冠状病毒、猫冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒、人冠状病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鼠传染性肝炎病毒、猪呼吸道冠状病毒、人重症急性呼吸道综合征病毒和猪胃肠炎病毒的同源性分别是39.39%、85.41%、83.98%、36.80%、26.64%、37.23%、93.51%、29.00%和94.81%;犬冠状病毒M蛋白有3个疏水性结构域。同时构建了pET28a-CCV-M表达质粒。
- 张建武王权李健胡永强吕彩云陈燕军薛飞群林矫矫
- 关键词：犬冠状病毒膜蛋白克隆
