河南省教育厅自然科学基金(2008C180002) 作品数:4 被引量:48 H指数:2 相关作者: 邢智峰 刘永英 张安世 张为民 韦慧彦 更多>> 相关机构: 焦作师范高等专科学校 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 河南省教育厅自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
苔藓植物SRAP反应体系的优化 被引量:3 2009年 以黄灰藓总DNA为材料,对影响SRAP-PCR反应的模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶浓度等因素进行了优化,分析了各因素对SRAP-PCR扩增结果的影响。结果表明,在25μLSRAP-PCR反应体系中,最佳反应条件为:模板DNA40ng;Mg2+浓度2.0mmol/L;dNTP浓度0.2mmol/L;正反引物15pmol;TaqDNA聚合酶2.0U。在此条件下,引物组合Me5/em7对13种苔藓植物扩增的条带清晰、多态性好,表明此反应条件适合于苔藓植物的SRAP-PCR反应体系。 张安世 邢智峰 韦慧彦 张为民 刘永英关键词:苔藓 苔藓植物DNA不同提取方法的比较分析 被引量:44 2009年 以苔藓植物为材料,比较快速提取法、SDS法和改良CTAB法(自行设计)提取苔藓植物总DNA的效果.结果表明:改良CTAB法提取的基因组DNA质量最好(A260/A280为1.83~1.86;A260/A230为2.05~2.50),快速提取法次之(A260/A280为1.64~1.73;A260/A230为1.68~1.77),SDS法较差(A260/A280为1.51~1.61;A260/A230为1.56~1.76).改良CTAB法提取的苔藓植物的DNA适合于作为PCR的模板,并成功地进行了RAPD扩增. 张安世 邢智峰 刘永英 张为民关键词:苔藓植物 DNA提取 SDS法 CTAB法 RAPD扩增 SRAP体系中苔藓植物遗传多样性分析中的正交优化及初步应用 2010年 以黄灰藓为材料,通过正交法优化SRAP-PCR反应条件,并在此基础上对11种苔藓植物进行遗传多样性分析。结果表明:苔藓植物SRAP反应(25μL体系)的最佳条件为:40 ng DNA模板,2.5 mmol/LMg^(2+),0.3 mmol/L dNTP,15 pmol引物,1.5 U Taq酶。用30对引物组合进行筛选,有5对引物组合扩增条带清晰,重复性好,共扩增出65条带,其中多态性条带63条,多态性比率为96.9%。通过SPSS11.5分析软件对扩增结果进行聚类分析,结果与形态学分类基本一致,说明SRAP技术可用于苔藓植物的遗传多样性研究。 张安世 张为民 邢智峰 刘永英 辛泽华关键词:苔藓 SRAP 正交设计 亲缘关系 RAPD和SRAP标记技术在苔藓植物亲缘关系研究中的比较分析 被引量:2 2010年 利用RAPD和SRAP标记技术研究11种苔藓植物的亲缘关系,并进行比较分析。结果表明:RAPD扩增的多态性比率达100%,SRAP扩增的多态性比率达96.9%,2种标记结果均显示了很高的多态性比率。利用SPSS11.5软件对RAPD和SRAP扩增结果进行了聚类分析,两者均与形态学分类基本一致,但与形态学结果也有一定的差异,这种差异主要表现在科以上植物种类之间。同时,2种分子标记的聚类结果之间也存在一定的差异,主要是对大叶凤尾藓和小牛舌藓全缘亚种的划分。因此,RAPD和SRAP都有一定局限性,需要多种标记方法相互结合、相互印证,才能得出客观的结果。 张安世 张为民 邢智峰 刘永英 韦慧彦 辛泽华关键词:苔藓 RAPD 亲缘关系