“十一五”国家科技支撑计划(2008BADB2B02)
- 作品数：17 被引量：31H指数：4
- 相关作者：张冬杰俄广鑫王嘉博杨少成祝继原更多>>
- 相关机构：黑龙江省农业科学院东北农业大学海南大学更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划黑龙江省博士后基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪LXRα基因多态性及其与生长性状的相关性分析被引量：4
- 2011年
- 肝X受体α(LXRα)是一类与脂类代谢有关的核受体,是重要的脂质传感器,LXRα基因参与调节生命代谢活动的诸多方面并且对动物生长发育过程起着重要作用。本研究采用PCR-SSCP的方法分析LXRα基因单核苷酸多态性与生长性状的相关性。结果发现TB3多态位点的BB基因型对法系长白猪个体的出生胸围的效应值最大。TB4多态位点的AA基因型对法系长白猪个体的断奶重和出生体长的效应值最大。
- 祝继原刘娣俄广鑫王嘉博杨少成
- 关键词：肝X受体ΑPCR-SSCP
- 猪呼吸道上皮细胞的体外原代培养研究
- 2010年
- 为探索猪呼吸道上皮细胞体外的原代培养,对胶原酶Ⅳ+胰酶消化法、胰酶消化法、胶原酶Ⅳ和胰酶消化结合组织块培养法以及组织块培养法等4种分离细胞的方法进行了比较,同时比较了不同浓度胎牛血清的培养基所培养细胞的纯度及成活率,采用差速贴壁法纯化细胞并对所得的上皮细胞进行冻存复苏研究。结果表明:组织块培养法培养获得的细胞数量和纯度极显著高于胰酶消化法(P<0.01),胶原酶Ⅳ+胰酶消化法获得的细胞成活率显著高于胰酶消化法;含有5%血清的培养基培养的细胞成活率及纯度均高于用10%血清培养(P<0.01),冻存1个月后的细胞复苏率为85%。
- 翟春媛杨秀芹李海涛刘娣
- 关键词：呼吸道上皮细胞细胞培养冷冻保存
- RNA干涉的原理与应用
- 2009年
- 介绍了RNA干扰(RNAinte rference,RNAi)的机理,阐述了RNAi的生物学意义,并具体论述了RNAi的作用,指出RNAi已经成为一种研究基因功能的有力工具,并且有希望在对疾病的防御及治疗中发挥重要的作用。
- 冯政刘贵生梅书棋黄京书武华玉孙华
- 关键词：RNAI双链RNA
- 猪GSTM2基因的多态性及与生产性状相关性分析被引量：1
- 2011年
- 母猪产仔性状是评价猪场效益的重要指标,也是猪育种工作的重点。谷胱甘肽硫转移酶mu亚基(Glutathione S-transferase Mu2,GSTM2)基因是与母猪生殖系统免疫和生长发育有关的基因。研究采用PCR-SSCP的方法分析了GSTM2基因的单核苷酸多态性,并分析了每个多态位点对母猪繁殖性状的影响。结果表明,G2、G5、G7位点对母猪总产仔数和活产仔数影响显著,这三个位点都是AB基因型个体的总产仔数平均数最高,进一步验证了杂合基因型高于纯合基因型性状的理论。这三个位点对断奶窝平均重影响不显著。G2位点对窝平均初生重影响显著。实现了对GSTM2基因多态性的分析,并与母猪产仔性状和初生窝重等生产性状进行了相关性的分析。得到了基因与性状之间的第一手材料。
- 王嘉博祝继原俄广鑫杨少成刘娣
- 关键词：SSCP生产性状
- Vero细胞共培养体系对猪胚胎早期发育的影响被引量：1
- 2010年
- 本研究旨在探讨Vero细胞共培养体系对猪胚胎早期发育的影响。收集屠宰场废弃卵巢,抽取卵母细胞。采用电激活联合化学激活的方法得到孤雌胚胎,同时用所得的卵母细胞与卵丘细胞构建猪体细胞核移植重构胚;并将所得的孤雌胚、核移植重构胚移入NCSU-23(培养液)中与Vero细胞共培养。结果,Vero细胞共培养组的囊胚率显著高于对照组(P<0.05),各组囊胚细胞数无显著差异(P>0.05)。结果表明,Vero细胞作为共培养体系中的滋养层细胞有利于猪胚胎的早期发育。
- 付博马红任亮赵金凤房庆昌郭镇华李忠秋刘娣
- 关键词：VERO细胞共培养体系孤雌胚体细胞核移植
- 民猪磷酸葡萄糖酸脱氢酶(PGD)基因部分片段的克隆与分析
- 2010年
- 试验采用比较基因组学结合克隆测序的方法首次获得了民猪的磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的第9,10,12内含子序列,并对测序结果进行了比对。结果表明:磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的第9内含子存在2个点突变(120 G→C和185 C→G),后者造成NlaⅢ酶切位点的缺失;第10内含子存在1个点突变(129 T→C),该点突变造成AceⅠ酶切位点的缺失;第12内含子处没有发现突变位点。
- 谢雨彤张冬杰张晓卉刘娣
- 关键词：民猪PCR
- 猪精氨酸-丝氨酸蛋白激酸3(SRPK3)基因的克隆、表达及多态性分析(英文)被引量：1
- 2011年
- 通过对猪SRPK3基因初步的研究,为猪分子遗传育种提供基础分子生物学信息,为猪的遗传育种提供分子标记。以大白猪为实验材料,采用RT-PCR方法克隆了精氨酸-丝氨酸蛋白激酶3(serine/arginine-rich specific kinase 3,SRPK3)的全长基因CDS区;采用生物信息学方法分析了SRPK3基因核酸序列并对其所编码的的蛋白序列进行了预测与分析编码蛋白序列的结构特点;采用PCR-SSCP方法对大白猪,野猪,民猪及野家杂交猪的SRPK3基因的多态性进行了检验;采用实时荧光定量PCR(Real-time)方法检测了SRPK3在1日龄和30日龄大白猪及杜洛克的心脏、肌肉、脾脏、肝脏、肾脏、肺脏、胃、小肠、大肠、脑的表达情况;采用皮下注射的方式构建猪骨骼肌损伤模型用于研究在骨骼肌修复过程中SRPK3基因表达特性。经拼接所得到的1 708bp核苷酸片段,涵盖了SRPK3基因的全长CDS(1 701bp),该基因编码含567个氨基酸片段;蛋白存在两个S_TKc结构域,猪SRPK3蛋白序列与人和牛的相似性较高。PCR-SSCP检测发现第6外显子上A629→G629,T653→T653的突变,氨基酸变化为Pro→His,Ile→Thr;第9外显子处的G1059→A1059,氨基酸无突变。利用荧光定量PCR研究发现,表达结果显示该基因表达具有组织和种间特异性。SRPK3基因的表达在整个骨骼肌细胞损伤修复过程中逐渐升高。SRPK3基因主要在肌肉和心肌内表达,骨骼肌损伤修复过程中伴随骨骼肌细胞分化SRPK3的表达持续升高,推测其可能与骨骼肌细胞发育相关。
- 俄广鑫刘娣张冬杰崔羽
- 关键词：PCR-SSCP
- SLA-DQA基因的多态性与仔猪初生重和30日龄体重的相关性分析被引量：6
- 2010年
- 采用PCR-RFLP方法,对250头黑龙江野猪与北京黑猪杂交的F1个体进行了SLA-DQA基因的多态性检测,并对不同基因型影响新生仔猪的初生重和30日龄体重的效应进行了分析。结果表明:SLA-DQA基因的第2、34、外显子处均存在多态性,但只有第2外显子处的PvuⅡ酶切所产生的BB型个体可显著增加仔猪的30日龄体重,其余的多态位点对这两个性状的效应差异均不显著。
- 张冬杰
- 关键词：PCR-RFLP初生重
- 民猪细胞色素C氧化酶Ⅰ基因的克隆、多态性检测及冷诱导研究被引量：4
- 2012年
- 采用克隆测序和PCR-SSCP方法对民猪COXⅠ基因序列及多态性进行了检测与分析,采用实时荧光定量PCR法对同一饲养水平下经冷诱导处理的民猪和长白猪肌肉、肝脏组织中COXⅠ基因的表达变化进行分析。结果表明:民猪的COXⅠ基因序列与其他猪种相比,存在18个核苷酸突变,导致5个氨基酸发生变化;C260T、G275A和C1253T位点民猪以B等位基因占优势,大白猪、长白猪、北京黑猪、野猪则是A等位基因占优势;冷诱导后低温组民猪COXⅠ基因的表达量与常温组民猪和低温组长白猪相比,均显著下降(P<0.05)。据此推测冷诱导可导致COXⅠ基因表达量降低从而产生更多的ATP为机体提供能量抵御寒冷,COXⅠ基因可能是一个与猪的抗寒性显著相关的候选基因。
- 杨俊静别墅张冬杰汪亮刘娣
- 关键词：民猪细胞色素C氧化酶多态性分析
- 民猪HB-EGF基因第4内含子的克隆与分析
- 2010年
- 为了研究民猪肝素结合EGF样生长因子(heparin-binding EGF-like growth factor,HB-EGF)第4内含子的序列及其突变位点,试验采用PCR鉴定及基因克隆测序的方法对民猪HB-EGF基因第4内含子序列进行克隆与分析。结果表明:在民猪的HB-EGF基因第4内含子序列中共发现3个点突变,即第27个碱基处插入1个T,78A→78G,101T→101C;第27个碱基处插入的T造成了NlaⅢ酶切位点的改变。
- 张晓卉谢雨彤张冬杰刘娣
- 关键词：民猪克隆测序
