国家自然科学基金(81372484)
- 作品数：11 被引量：14H指数：2
- 相关作者：刘云会李新星刁宏宇陈亮宇张健更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科学技术计划项目辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- EMAP-Ⅱ通过LKB1/AMPK/mTOR信号通路增加BTB的通透性被引量：2
- 2015年
- 目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对体外血肿瘤屏障(BTB)通透性的影响及可能机制。方法建立体外BTB模型,EMAP-Ⅱ处理后,millipore电阻测量系统检测跨内皮细胞阻抗(TEER)值,采用Western blot方法检测p LKB1/LKB1、p AMPK/MAPK和p-m TORC1/m TORC1的蛋白表达水平;分别应用LKB1抑制剂radicicol、AMPK抑制剂compound C和m TORC1激活剂IGF1进行预处理后再给予EMAPⅡ,检测体外BTB模型的TEER值,Western blot方法检测紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的蛋白表达水平。结果与EMAP-Ⅱ0 h组相比,EMAP-Ⅱ可明显降低体外BTB模型的TEER值,增加p-LKB1/LKB1和p-AMPK/AMPK的表达水平,降低p-m TORC1/m TORC1的表达水平,以上指标在EMAP-Ⅱ作用1 h时效果最明显;radicicol、compound C和IGF1预处理能够部分阻断EMAP-Ⅱ的作用,使体外BTB模型的TEER值及紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达水平明显增加。结论 EMAP-Ⅱ能明显增加体外BTB模型通透性,其机制可能与激活LKB1/AMPK/m TOR信号通路相关。
- 刘啸白刘丽波陈方周刘云会薛一雪李振李志清商秀丽
- 关键词：血肿瘤屏障LKB1AMPK
- miR-222在不同病理级别胶质瘤中的表达及对预后判断的价值被引量：2
- 2015年
- 目的探讨miR-222在不同病理级别胶质瘤中的表达及其与预后的相关性。方法收集不同病理级别胶质瘤及瘤旁正常组织标本,以定量PCR方法检测miR-222的表达。建立受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下的面积(AUC)来评估miR-222在胶质瘤组织和瘤旁正常组织中表达差异。通过Kaplan-Meier法为高表达及低表达群体建立生存曲线,并用Log-rank检验评估两组生存曲线的差异。结果 miR-222在胶质瘤组织中的表达显著高于瘤周正常组织,miR-222的最佳临界值为3.23,敏感性为0.78,特异性为0.76,且与胶质瘤的病理级别呈正相关。在生存分析中,高表达miR-222的胶质瘤患者预后较差。结论 miR-222是胶质瘤恶性程度的重要标志物,有望成为胶质瘤预后判断的参考指标。
- 李新星于奇田羽张健刁宏宇刘云会
- 关键词：胶质瘤MIR-222预后
- 神经导航下颞下入路切除脑桥海绵状血管瘤11例临床分析被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨脑桥海绵状血管瘤的显微外科治疗及预后.方法 对11例脑桥海绵状血管瘤患者的临床资料进行回顾性分析.所有患者均在神经导航引导下采用颞下经小脑幕入路手术切除病灶.结果 所有患者病灶给予全切,无手术死亡病例.6例术后神经功能障碍比术前明显改善;2例患者神经功能状况与术前相仿,3例患者术后神经功能缺失进一步加重,出现语速慢,其中1例伴有构音障碍,但在术后随访期间,神经功能均已恢复至术前状态.结论 颞下经小脑幕入路能够充分显露术野并切除脑桥海绵状血管瘤,术中神经导航导引是手术成功的重要保证.掌握适当手术指征和微创技术,脑桥海绵状血管瘤可通过手术切除,预后良好。
- 李新星陈亮宇刘斯琪王彪王振泽刘云会
- 关键词：神经导航
- 胶质瘤干细胞的分离、培养及初步鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨人脑胶质瘤干细胞的培养和分离方法。方法:取9例脑胶质瘤患者的手术标本进行处理,采用B27培养基进行培养,碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子刺激细胞扩增;应用免疫组织化学染色对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定。结果:9例标本中共有7例成功培养出肿瘤细胞球,培养条件下呈悬浮状态生长,形成肿瘤细胞球,免疫细胞化学检测显示肿瘤球细胞表达胶质瘤干细胞的标志物CD133和Nestin,诱导分化后的肿瘤球细胞可以表达成熟神经细胞的标志物GFAP和TU-20。结论:体外的培养条件下,可以从胶质瘤组织中培养出胶质瘤干细胞,为胶质瘤的深入研究奠定基础。
- 李新星姚一龙李博洋刁宏宇刘云会
- 关键词：胶质瘤胶质瘤干细胞细胞培养
- miR-200b通过靶向CRKL抑制胶质瘤U251细胞增殖
- 2017年
- 目的研究hsa-miR-200b对人U251胶质瘤细胞增殖的影响及相关作用机制。方法将miR-200b过表达和表达沉默质粒分别稳定转染至胶质瘤U251细胞,qRT-PCR验证转染效率,CCK-8法检测U251细胞增殖水平变化,qRTPCR以及Western blot方法检测的CRKL的m RNA和蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-200b与CRKL基因3’UTR的结合位点。将CRKL过表达和表达沉默质粒载体分别稳定转染至U251胶质瘤细胞,使用CCK-8法检测U251细胞增殖水平变化。分别建立miR-200b和CRKL的稳定双转染U251细胞系,使用CCK-8法检测对各组细胞增殖水平的变化。结果与对照组相比,miR-200b过表达显著抑制胶质瘤U251细胞的增殖并且抑制CRKL在U251胶质瘤细胞的m RNA和蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证了miR-200b与CRKL基因3’UTR的结合位点;CRKL过表达显著增强胶质瘤U251细胞增殖能力;CRKL过表达有效阻断了miR-200b抑制胶质瘤U251细胞增殖的作用。结论 miR-200b能够通过靶向下调CRKL抑制胶质瘤U251细胞增殖。
- 陈亮宇杨旸刘云会
- 关键词：增殖
- 沉默XIST通过靶向miR-185抑制人胶质瘤U87细胞增殖被引量：1
- 2017年
- 目的探讨沉默长链非编码RNA XIST对人胶质瘤U87细胞增殖的影响及可能机制。方法 Lipo3000将XIST沉默质粒载体转染胶质瘤U87细胞后,Real-Time PCR检验转染效率;CCK-8法检测沉默XIST对U87细胞增殖的影响;Real-Time PCR检测转染XIST沉默载体后,U87细胞中miR-185的表达水平变化;双荧光素酶报告基因实验验证XIST与miR-185存在靶向结合;Lipo3000将miR-185过表达和沉默质粒载体分别转染U87细胞,Real-Time PCR检验转染效率;CCK-8法检测转转染miR-185后,U87细胞增殖能力的变化;Lipo3000将miR-185过表达和沉默质粒载体分别转染建立完成的XIST沉默U87细胞系,应用CCK-8法检测U87细胞的增殖水平变化。结果 XIST沉默显著降低了U87细胞的增殖能力,显著提高了miR-185在U87细胞中的表达水平。验证了XIST和miR-185存在着靶向结合。miR-185沉默显著提高了U87细胞增殖能力;显著阻断了沉默XIST下调U87细胞增殖能力的作用;miR-185过表达则作用相反。结论沉默XIST能够通过靶向miR-185,抑制胶质瘤U87细胞增殖。
- 陈亮宇杨旸刘云会
- 关键词：XIST
- 微小RNA-125b在胶质母细胞瘤中的表达及临床意义被引量：2
- 2016年
- 目的探讨微小RNA-125b在胶质母细胞瘤（GBM）中的表达及临床意义。方法选取16例GBM患者的肿瘤组织及瘤旁正常组织标本，采用荧光实时定量聚合酶链反应检测微小RNA-125b的表达情况。建立受试者工作特征（ROC）曲线，计算ROC曲线下面积（AUC）；采用Kaplan．Meier法进行生存分析，相关性采用Logistic回归分析。结果肿瘤组织微小RNA-125b表达显著高于瘤旁正常组织（6．91±2．05比3．86±2．89），差异有统计学意义（P=0．002）。微小RNA-125b区分肿瘤组织的AUC为O．88，95％CI为0．77～0．95，最佳临界值为3．70，敏感度为82％，特异度为81％。微小RNA-125b表达与患者的性别及年龄无相关性（P〉0．05），但与肿瘤直径有关（P=0．021）。微小RNA-125b高表达患者（微小RNA-125b表达水平高于平均水平，即〉6．91，9例）预后较低表达患者（≤6．91，7例）差（HR=2．45，95％CI 1．12～2．64，P=0．028）。结论微小RNA-125b可以作为胶质母细胞瘤预后判断的生物学标记物。
- 李新星陈亮宇张健刘云会
- 关键词：胶质母细胞瘤预后
- CXCR7在胶质瘤中的表达及其与预后的相关性
- 2016年
- 目的探讨CXCR7在胶质瘤中的表达及其与预后的相关性。方法收集89例不同病理级别胶质瘤,应用免疫组化方法检测CXCR7在胶质瘤中的表达。结果 23例患者的CXCR7呈强阳性染色(),24例呈中度阳性染色(),17例呈弱阳性染色(+),25例呈阴性染色(-),且CXCR7在胶质瘤组织中的表达与胶质瘤的病理级别呈正相关。较强的CXCR7染色患者的存活时间较短。结论 CXCR7可以做为胶质瘤病理级别分类及预后判断的生物学标记物。
- 李新星陈亮宇王文卿刁宏宇刘云会
- 关键词：胶质瘤CXCR7预后
- 人脑胶质瘤中microRNA-221的表达及临床意义被引量：3
- 2015年
- 目的探讨microRNA-221(miR-221)在胶质瘤中的表达及其与预后的相关性。方法收集不同级别胶质瘤及瘤组织旁正常组织标本,以定量PCR方法检测miR-221的表达。建立受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下的面积(AUC)来评估miR-221在胶质瘤组织和瘤组织旁正常组织中表达水平的差异。通过Kaplan-Meier法为高表达群体及低表达群体建立生存曲线,并用Log-rank检验评估两组生存曲线的差异。结果miR-221在胶质瘤组织中的表达显著高于正常组织,并且与胶质瘤的病理级别呈正相关。在生存分析中,miR-221高表达的胶质瘤患者预后较差。结论 miR-221可以作为胶质瘤病理级别分类及预后判断的生物学标记物。
- 李新星于奇田羽张健刁宏宇刘云会
- 关键词：胶质瘤MIR-221预后
- 内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性的信号机制
- 2014年
- 目的探索内皮一单核细胞激活多肽-Ⅱ（endothelial monocyte activating polypeptide-II，EMAP-II）增强血肿瘤屏障（blood—tumor barrier，BTB）通透性的相关信号机制。方法采集出生3—5d的Wistar胎鼠的大脑皮质，应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后，接种于培养皿中进行脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells，BMECs）原代培养；将BMECs与C6脑胶质瘤细胞共培养，构建体外BTB模型；共培养后的BMEC被随机分成5组（每组6例）：对照组、EMAP-Ⅱ组、H7＋EMAP—11组、C3 exoenzyme＋EMAP-II组和C3exoenzyme＋H7＋EMAP—II组。测定跨内皮阻抗值和辣根过氧化物酶流量评估各组BTB通透性变化情况；Western blot法检测BMECs上紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的表达水平变化；免疫荧光法检测OC-cludin和ZO-1在BMECs上的分布与表达。Western blot法检测BMECs上肌球蛋白轻链（myosin light chain，MLC）和磷酸化肌球蛋白轻链（phosphomyosin light chain，pMLC）的表达水平变化。结果与对照组相比较，EMAP-II组BTB的通透性明显增高，BMECs上occludin和ZO-1的表达水平明显降低，pMLC的表达水平明显增高；EMAP—II的上述作用受到蛋白激酶c（protein kinaseC，PKC）抑制剂H7或（和）RhoA抑制剂C3exoenzyme预处理的明显抑制。结论信号分子PKC和RhoA在EMAP—II增强BTB通透性过程中发挥着重要的作用，信号通路PKC—pMLC和RhoA—pMLC参与调控该过程。
- 李振刘啸白刘云会薛一雪王萍刘丽波
- 关键词：血肿瘤屏障通透性信号机制
