黑龙江省海外学人科研资助项目(1154h06)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 相关机构：哈尔滨医科大学哈尔滨医科大学附属第三医院更多>>
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- CX43腺病毒表达载体的构建及其在人胃癌BGC-823细胞系的表达
- 2012年
- 目的:构建并鉴定CX43-IRES2-EGFP的重组腺病毒小质粒表达载体,观察其在人胃癌BGC-823细胞系中的表达。方法:将目的基因CX43片段与IRES2-EGFP进行PCR拼接,重组到腺病毒穿梭载体pAd/CMV/V5-DEST上,构建成腺病毒表达载体pAd-CX43-IRES2-EGFP;经酶切后转染293A细胞进行包装,测定滴度;重组病毒转染人胃癌BGC-823细胞后,通过RT-PCR检测耐药基因MDR的变化,Westernblot检测CX43超表达。结果:经测序验证,腺病毒载体pAd-CX43-IRES2-EGFP构建成功。pAd-CX43-IRES2-EGFP病毒的滴度为:2.8×106ifu/ml。转染人胃癌BGC-823细胞后经Western blot检测到CX43蛋白超表达,耐药基因MDR受到抑制。结论:成功构建腺病毒载体pAd-CX43-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系,检测其对人胃癌BGC-823细胞系具有超表达CX43和抑制耐药基因MDR的作用,为CX43基因转染的研究及基于CX43为靶标的基因药物筛选平台的奠定了基础。
- 吴瑾刘文涛李永庆周红凤刘丹岳晓龙孙喜文石光跃赵艳滨王亚丽仇鑫
- 关键词：连接蛋白43腺病毒
