国家自然科学基金(81372461)
- 作品数：6 被引量：30H指数：4
- 相关作者：刘扬张柏和王跃如吴孟超王龙更多>>
- 相关机构：第二军医大学同济大学上海交通大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 甲胎蛋白腺病毒载体诱导的树突状细胞对人肝癌细胞HepG2的免疫治疗作用被引量：4
- 2015年
- 目的研究重组甲胎蛋白（AFP）特异性T细胞的体外抗肝细胞癌免疫活性及其机制。方法实验分为：空白对照HepG2组；CD8＋T＋AFP空载组；CD8＋T＋AFP过表达组；CD8＋T＋AFP空载＋JAK2抑制剂组；CD8＋T4-AFP过表达＋JAI（2抑制剂组。分离、鉴定DC细胞，构建AFP腺病毒并转染树突状细胞（dendriticcells，DC），活化AFP特异性的CD8＋T细胞，检测CD8＋T细胞对人肝癌细胞HepG2的影响。采用CCK8法检测细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况；ELISA法检测IL-2、IL-6、IL-6、IL-10、IFN-1（人干扰素1）、TNF—d、PFP（穿孔素）、granzymeB（颗粒酶）表达情况；蛋白印迹检测p-STAT3／STAT3、p-JAK2／JAK2、Bax／Bcl-2、Fas／Fasl表达情况。结果实验显示，AFP特异性CD8＋T细胞体外能有效抑制HepG2细胞增殖，上调1L-2、IFN-γ、TNF-α、PFP、granzymeB、Bax／Bcl-2的表达水平，显著抑制T细胞活化的负调控因子IL-10及p-STAT3／STAT3、P．JAK2／JAK2表达。结论活化的AFP特异性T细胞能显著抑制肝细胞癌增殖。其抗肿瘤机制可能是重组AFP腺病毒活化、促进T细胞增殖，通过升高Bax／bcl-2和促进穿孔素／颗粒酶通路并特异性杀伤HepG2。JAK2抑制剂在该机制中起到一定调控作用。
- 刘扬王跃如丁光辉杨庭松姚乐钱明平张柏和吴孟超LisaH.Butterfield
- 关键词：甲胎蛋白树突状细胞腺病毒
- 肝细胞癌胆管转移致阻塞性黄疸的外科治疗被引量：3
- 2016年
- 目的探讨原发性肝癌致阻塞性黄疸的原因及治疗方法。方法回顾性分析2003年9月至2014年8月收治的50例原发性肝癌致阻塞性黄疸的原因及治疗效果。结果 50例患者阻塞性黄疸均系肝癌引发胆总管癌栓所致。其中,45例进行了总胆管切开取癌栓T管引流术,同时行肝肿瘤切除22例、患侧肝动脉结扎者23例;5例进行了非手术治疗。在45例行手术治疗的患者中,17例肝左叶肿瘤患者术后平均生存11个月,28例肝右叶肿瘤患者生存7个月,总平均存活时间为9个月;5例非手术治疗患者平均生存时间仅3个月;手术患者较非手术患者平均存活时间明显延长(P<0.01)。结论外科手术明显延长阻塞性黄疸肝癌患者生存时间,改善其生活质量。
- 刘扬王跃如姚乐荀林娟庄英张柏和
- 关键词：肝细胞肿瘤阻塞性黄疸胆管癌栓
- 甲胎蛋白特异性肝癌疫苗体外杀伤HepG2肝癌细胞的分子机制被引量：2
- 2016年
- 目的制备甲胎蛋白（AFP）特异性CD8‘T淋巴细胞肝癌疫苗，检测其体外抗肿瘤免疫活性，探讨其分子作用机制。方法采用经AFP抗原决定簇肽（AFP542-550）或转染AFP慢病毒刺激树突状细胞（AFP542-550／Lenti-AFP-DC）的方法，体外活化AFP特异性CD8＋T细胞（AFP—CD8-CTL）。用抗人CDl34单抗／抗人CD28单抗分别封闭和活化AFP—CD8＋CTL，观察其体外杀伤HepG2细胞的作用以及IFN-Y、IL-2、穿孔素（Perforin）、颗粒酶B（GranzymeB）、FasL等细胞因子的释放，间接推测穿孔素．颗粒酶B在其抗肿瘤过程中的作用。结果抗人CDl34单克隆抗体封闭AFP—CD8＋-CTL后，AFP．CD8＋-CTL体外杀伤HepG2细胞产生的y干扰素、白介素-2、穿孔素／颗粒酶B等细胞因子明显减少（P〈0．05），而FasL下降不明显。应用抗人CD28单抗体外活化AFP-CD8-CTL后并与HepG2细胞共同培养后发现，AFP特异性T细胞肝癌疫苗杀伤HepG2肝癌细胞的效能显著增加（P〈0．05），而FasL增加不明显。结论抗人CDl34单克隆抗体可用于体外抑制AFP—CD8＋-CTL对肿瘤细胞的杀伤作用，而抗人CD28单克隆抗体可体外活化AFP—CD8＋CTL。AFP特异性CD8＋-T淋巴细胞肝癌疫苗杀伤HepG2细胞可能与穿孔素一颗粒酶B的释放有关。
- 刘扬王跃如丁光辉杨庭松姚乐荀林娟庄英张柏和陆崇德
- 关键词：甲胎蛋白肿瘤疫苗分子机制
- 甲胎蛋白特异性CD8＋T淋巴细胞肝癌疫苗杀伤肝细胞癌的分子机制被引量：5
- 2015年
- 目的 制备、检测甲胎蛋白（AFP）特异性CD8＋T淋巴细胞肝癌疫苗的抗肿瘤免疫活性,探讨肝癌疫苗作用的分子机制.方法 采用经过AFP抗原决定簇肽（AFP542-550）刺激或转染AFP慢病毒刺激的树突状细胞（AFP542-550/Lenti-AFP-DC）,体外活化AFP特异性CD8＋T细胞,并应用抗人CD134单克隆抗体体外封闭AFP-CD8＋-CTL.通过观察AFP-CD8＋-CTL体外杀伤HepG2细胞后IFN-γ、IL-2、穿孔素（Perforin）、颗粒酶B（Granzyme B）等细胞因子的释放,间接推测穿孔素-颗粒酶B机制的作用.结果 抗人CD134单克隆抗体封闭AFP-CD8＋-CTL后,AFP-CD8＋-CTL体外杀伤HepG2细胞产生的IFN-γ、IL-2、穿孔素（Perforin）、颗粒酶B（Granzyme B）等细胞因子明显减少（P＜0.05）.结论 AFP特异性CD8＋T淋巴细胞肝癌疫苗杀伤HepG2可通过穿孔素-颗粒酶B分子机制发挥作用.
- 刘扬王跃如丁光辉杨庭松王龙张柏和吴孟超Lisa H.Butterfield
- 关键词：肝细胞癌肿瘤疫苗分子机制
- 甲胎蛋白特异性肝癌疫苗体内杀伤肝癌细胞被引量：13
- 2014年
- 目的 探讨甲胎蛋白（AFP）肽片段或Lenti-AFP刺激的树突状细胞（DC）制备的肝癌疫苗用于肝癌免疫治疗的可行性.方法 采用慢病毒转染和AFP抗原决定簇肽制备的肝癌疫苗对4组荷瘤裸鼠（Lenti-AFP、AFP1、AFP542组及对照组）进行了体内肿瘤细胞杀伤实验,通过测定成瘤大小及相关细胞因子[白细胞介素（IL）-2和-10、干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α、穿孔素、颗粒酶B、Fas配体]的变化,观察不同治疗组对裸鼠皮下成瘤及其恶化的影响.结果 AFP特异性CD8＋T淋巴细胞和CD4＋T淋巴细胞肝癌疫苗能有效阻止裸鼠皮下肿瘤的生长,治疗组（Lenti-AFP、AFP1、AFP542组）肿瘤直径[分别为（7.03±2.78）、（11.00±2.57）、（8.87±3.49） cm]低于对照组（F肿瘤直径=6.13,P＜0.01）,肿瘤重量[分别为（0.478±0.225）、（0.398±0.125）、（0.298±0.099）、（0.228±0.132）g],也低于对照组（F肿瘤重量=5.38,P＜0.01）.各治疗组不同程度上调裸鼠血清中IL-2、干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α、穿孔素、颗粒酶B的水平,而对于T淋巴细胞活化的负调控因子IL-10,具有显著的抑制作用（P＜0.05）.结论 AFP特异性CD8＋ T/CD4＋T淋巴细胞疫苗能有效抑制荷人肝癌裸鼠体内肿瘤的生长.
- 刘扬王跃如王龙周波宋振顺张柏和吴孟超Lisa H.Butterfield
- 关键词：甲胎蛋白树突状细胞
- 血液甲胎蛋白mRNA对肝癌术后复发转移的影响：3年回顾性研究被引量：6
- 2014年
- 目的 探讨血液肝癌细胞相关甲胎蛋白（AFP） mRNA阳性与肝癌患者术后肿瘤复发或转移的关系.方法 应用巢式RT-PCR检测62例原发性肝癌患者术前1天周围静脉血液中AFPmRNA,术后随访3年.结果 24例术前血液检测AFPmRNA阳性,38例患者术前AFPmRNA呈阴性.术前血AFPmRNA阳性的患者术后1、2、3年肿瘤复发率分别为58.3％ （14/24）、75.0％（18/24）、100.0％ （24/24）;而术前血AFPmRNA阴性的患者术后1、2、3年肿瘤复发率则分别为23.6％ （10/38）、42.1％（16/38）、68.4％（26/38）,两者比较复发率差异具有统计学意义（P＜0.01）.术前血AFPmRNA阳性的患者术后3年有8.3％ （2/24）发生肺转移;而阴性患者术后3年内无一发生肺或其他远处转移（0.0％,0/38;P＜0.01）.结论 术前血液AFPmRNA阳性的肝癌患者较AFPmRNA阴性的肝癌患者术后更容易产生复发或远处转移.
- 刘扬王跃如王龙周波宋振顺ButterfieldLisaH.张柏和吴孟超
- 关键词：肝细胞癌
