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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-06-0641)

作品数：18 被引量：38H指数：4
相关作者：童强松郑丽端蔡嘉斌蒋国松刘媛更多>>
相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属协和医院武汉市妇女儿童医疗保健中心更多>>
发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 18篇中文期刊文章

领域

  • 16篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 9篇细胞
  • 9篇基因
  • 5篇基因表达
  • 4篇凋亡
  • 4篇真核
  • 4篇真核表达
  • 4篇神经母细胞
  • 4篇神经母细胞瘤
  • 4篇细胞瘤
  • 4篇小鼠
  • 4篇母细胞
  • 4篇母细胞瘤
  • 4篇核表达
  • 3篇肿瘤
  • 3篇周期
  • 3篇胃癌
  • 3篇细胞周期
  • 2篇增殖
  • 2篇上皮
  • 2篇上皮细胞

机构

  • 18篇华中科技大学
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇武汉市妇女儿...

作者

  • 18篇童强松
  • 17篇郑丽端
  • 10篇蒋国松
  • 10篇蔡嘉斌
  • 9篇刘媛
  • 7篇曾甫清
  • 5篇顾朝辉
  • 4篇张桓瑜
  • 4篇董继华
  • 4篇王智宇
  • 3篇汤绍涛
  • 3篇阮庆兰
  • 2篇普佳睿
  • 2篇胡涛
  • 2篇胡波
  • 2篇杨春雷
  • 1篇吕清
  • 1篇王国斌
  • 1篇李时望
  • 1篇齐盟

传媒

  • 9篇中华实验外科...
  • 2篇中华小儿外科...
  • 1篇中华男科学杂...
  • 1篇药学学报
  • 1篇中国药理学通...
  • 1篇癌变．畸变．...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇华中科技大学...

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 5篇2010
  • 1篇2009
  • 6篇2008
  • 3篇2007
共 18 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
茉莉酸甲酯诱导人神经母细胞瘤细胞株BE(2)-C凋亡作用机制被引量：2
2008年
探讨茉莉酸甲酯对人神经母细胞瘤细胞株BE（2）-C的生长抑制作用及其对凋亡抑制蛋白家族成员XIAP和survivin表达的影响。1-2 mmol·L^-1茉莉酸甲酯处理BE（2）-C细胞6-24 h后，MTT法检测瘤细胞生长活性，克隆形成实验检测细胞增殖能力，PI单染流式细胞术检测细胞周期，AO/EB荧光染色法、Hoechst 33258荧光染色法、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡，半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）检测细胞周期素D1（cyclin D1）、X连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor ofapoptosis protein，XIAP）及survivin表达。结果表明，各浓度茉莉酸甲酯作用后，BE（2）-C细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制，1，1.5和2 mmol·L^-1茉莉酸甲酯作用24 h后，细胞生长抑制率为20.6%-85.5%（P〈0.01），IC50为1.35 mmol·L^-1；S期细胞比率增高，部分瘤细胞发生典型的凋亡形态学改变，早期凋亡细胞（FITC^＋PI^-）分别占13.51%、17.32%和24.59%（均P〈0.01），细胞死亡率分别为29.36%、54.73%和75.52%（均P〈0.01）；XIAP和survivin表达分别下调18.5%-68.9%和22.4%-48.7%（均P〈0.05），而cyclin D1表达无显著变化（P〉0.05）。可见，茉莉酸甲酯能通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制人神经母细胞瘤细胞株BE（2）-C的生长活性，下调XIAP和survivin基因表达可能是其作用机制之一。
蒋国松童强松曾甫清胡波郑丽端蔡嘉斌刘媛
关键词：茉莉酸甲酯神经母细胞瘤细胞周期阻滞凋亡X连锁凋亡抑制蛋白SURVIVIN
人pre-miR-145真核表达载体的构建及其对胃癌细胞游走、侵袭活性的影响被引量：3
2011年
目的构建人微小RNAl45（miR-145）前体的真核表达载体，探讨其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法根据人pre-miR-145序列，合成两条互补的寡核苷酸链，退火后连接人pPG-miR-EGFP载体，转化扩增后进行测序鉴定；重组质粒在阳离子脂质体Lipofectamine2000的介导下，瞬时转染人胃癌细胞株SGC-7901，实时定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞中miR．145表达水平，黏附实验和Transwell小室实验检测癌细胞游走、侵袭能力。结果所构建的pPG—miRl45-EGFP载体中插入基因片段与设计序列完全匹配；重组质粒转染SGC．7901细胞后，miR-145表达分别上调20．45倍（P〈0．01），细胞黏附能力分别下降51．5％（P〈0．01），细胞侵袭能力分别下降30．4％（P〈0．01）。结论成功构建人pre—miR-145真核表达载体，转染胃癌细胞过表达后，能抑制癌细胞的游走和侵袭能力。
张桓瑜梁铸林郑丽端童强松董继华
关键词：胃癌
RELMs家族及其生物学功能研究进展被引量：2
2008年
The resistin-like molecules(RELMs)are a novel protein family with tissue-specific distribution.Recent evidences suggest their important roles in type II diabetes mellitus,inflammation,immunological reactions and cell proliferation,which provoked many interests for the researchers.This overview summarizes the structure,tissue distribution,biological functions,regulatory pathways,and their relationship with diseases of these family members.
蔡嘉斌郑丽端童强松
关键词：抵抗素生物学功能基因表达调控
靶向人肝素酶短发卡状RNA表达载体的构建及其沉默作用
2010年
目的构建靶向人肝素酶（HPSE）的短发卡状RNA（shRNA）表达载体，探讨其基因沉默作用。方法根据人肝素酶mRNA序列设计shRNA，合成两条互补的寡核苷酸链，退火后连接人pGenesil-1载体，转化扩增后进行测序鉴定；重组质粒在阳离子脂质体Lipofectamine2000的介导下，瞬时转染人胃癌细胞株SGC-7901、人前列腺癌细胞株PC-3、人膀胱癌细胞株EJ，每种细胞分别设空白对照组、空载体pGenesil-Negative转染组、pGenesil-HPSEshRNA转染组3组，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Westernblot法检测各种细胞中肝素酶基因表达水平，黏附实验和transwell小室实验检测癌细胞游走、侵袭能力。结果所构建的shRNA载体插入基因片段与设计序列完全匹配，载体构建成功；重组质粒转染SGC-7901、PC-3、EJ细胞后，肝素酶mRNA表达分别下调78．6％（P〈0．01）、82．6％（P〈0．01）、81．9％（P〈0．01），肝素酶蛋白表达分别下调76．4％（P〈0．01）、85．9％（P〈0．01）、83．3％（P〈0．01），细胞黏附能力分别下降37．7％（P〈0．01）、44．6％（P〈0．01）、43．8％（P〈0．01），细胞侵袭能力分别下降66．8％（P〈0．01）、76．6％（P〈0．01）、80．5％（P〈0．01）。结论成功构建了靶向人肝素酶的shRNA表达载体，沉默肝素酶基因表达后，能抑制多种癌细胞的游走和侵袭能力。
蒋国松曾甫清郑丽端童强松董继华侯晓华
关键词：肝素酶短发卡状RNA肿瘤基因表达
缺氧诱导丝裂原因子在高氧诱导肺上皮和成纤维细胞凋亡中的作用及意义被引量：1
2013年
目的探讨缺氧诱导丝裂原因子（HIMF）在高氧诱导肺上皮和成纤维细胞凋亡中的作用及其意义。方法肺泡Ⅱ型上皮MLE-12细胞和成纤维NIH／3T3细胞分别转染靶向HIMF的小干扰RNA后，置于正常氧（21％O2）、高氧（85％O2）条件下培养3—18h，采用实时定量聚合酶链反应（Real．timePCR）法检测细胞中HIMFmRNA水平，运用吖啶橙-溴化乙锭染色法、Hochest33258染色法及膜联蛋白V（AnnexinV）-碘化丙锭（PI）双染流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果与对照组比较，高氧暴露3、6、9、18h后，MLE-12和NIH／3T3细胞中HIMFmRNA水平分别增高2．783—5．023倍（P〈0．05）、2．864～15．162倍（P〈0．05），细胞凋亡率增高1．5～2．3倍（P〈0．05）、1．1～2．1倍（P〈0．05）；沉默HIMF基因后，高氧诱导的MLE．12和NIH／3T3细胞凋亡率分别进一步升高1．5～2．5倍（P〈0．05）、1．3—2．0倍（P〈0．05）。结论HIMF基因可能通过对抗高氧诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞和成纤维细胞凋亡，参与高氧肺损伤的发病机制。
杨春雷张桓瑜普佳睿郑丽端童强松李爽
关键词：肺泡上皮细胞成纤维细胞小干扰RNA
小鼠缺氧诱导丝裂原因子基因启动子的结构与功能分析被引量：2
2008年
缺氧诱导丝裂原因子(hypoxia-induced mitogenic factor,HIMF)是一种肺组织特异性生长因子,可刺激肺细胞增生和再生,但HIMF基因表达调控的机制尚未明确.为探索HIMF基因转录调控机制,首先以小鼠基因组DNA为模板,通过PCR扩增方法获得-348^+61bp、-302^+61bp、-131^+61bp、-68^+61bp的HIMF启动子片段,再将其定向克隆入pGL3-Basic载体,构建荧光素酶报告基因载体,并制备转录因子ETS-1结合位点的突变或缺失体.在阳离子脂质体的介导下,报告基因载体分别瞬时转染正常氧浓度条件下培养的小鼠肺上皮MLE-12和MLE-15细胞、结肠癌CT26细胞.结果发现,各HIMF启动子片段在MLE-12、MLE-15细胞中均有活性,但在CT26细胞中活性缺失;-302^-131bp区存在HIMF启动子的核心调控元件.针对该区域ETS-1转录因子结合位点进行突变或缺失,能导致HIMF启动子活性显著降低;凝胶电泳迁移率实验表明,该区段能结合ETS-1.结果提示,转录因子ETS-1参与正常氧浓度下HIMF启动子活性的调控,为研究HIMF基因的转录调控机制奠定了实验基础.
郑丽端童强松蔡嘉斌蒋国松刘媛杜志勇董继华
关键词：启动子报告基因
茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK—N—SH的抑制增殖及诱导凋亡作用被引量：4
2008年
目的观察茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK—N—SH的抑制增殖及诱导凋亡作用，并比较茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用强度差异。方法1～10mmol／L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸分别处理SK-N-SH细胞后，NTT法检测细胞生长活性；克隆形成实验检测细胞增殖能力；PI单染法流式细胞术检测细胞周期；AO／EB荧光染色法、Hoechst33258荧光染色法、Annexin V-FITC／PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡。结果各浓度茉莉素作用后，SK-N—SH细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制，其中茉莉酸甲酯作用最强，1～10mmol／L茉莉酸甲酯作用24h后，细胞生长抑制率为（22．74～88．67）％，IC50为1．44mmol／L；2．5mmol／L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用后，细胞克隆形成能力分别降低87．00％、78．66％、39．00％，细胞周期示S期细胞比率显著增高，G0／G1期细胞比率下降，部分细胞发生典型的凋亡形态学改变；1．5～2．5mmol／L茉莉酸甲酯作用后，细胞凋亡率为（23．77—36，43）％。结论茉莉素能通过减弱瘤细胞增殖、诱导细胞周期阻滞和凋亡等机制抑制人神经母细恩情瘤细胞株的生长活性。
蒋国松童强松曾甫清郑丽端蔡嘉斌刘媛顾朝辉王智宇
关键词：茉莉素神经母细胞瘤增殖细胞周期脱噬作用
缺氧诱导丝裂原因子在小鼠支气管肺发育不良模型中的表达及意义被引量：2
2010年
目的 探讨缺氧诱导丝裂原因子（HIMF）在小鼠支气管肺发育不良（BPD）模型中的表达及意义.方法 32只新生昆明小鼠随机分为对照组（n=16）、高氧暴露组（n=16）,分别置于正常空气（21%,O2）及氧箱（85%,O2）中,于暴露后第7、14、21、28天每组随机选取4只,采用苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织形态学改变,运用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot方法检测肺组织中HIMF mRNA和蛋白表达水平.结果 对照组肺泡逐渐发育成熟,大小均匀,肺间质变薄 高氧暴露组肺泡隔增厚、肺泡融合,放射状肺泡计数减少31.1%～65.3% 与对照组比较,高氧暴露7、14、21 d后肺组织HIMF mRNA和蛋白水平分别增高2.435～2.528倍（P〈0.05）、2.45～5.42倍（P〈0.05）,而高氧暴露28 d后分别下调52.81%（P〈0.05）、74.60%（P〈0.05）.结论 成功建立小鼠BPD模型,HIMF基因表达异常可能参与BPD的发生、发展过程.
普佳睿吴泽华童强松胡涛梅红张桓瑜杨春雷郑丽端
关键词：支气管肺发育不良基因表达
TSEG-2基因真核表达载体的构建及其在细胞内的表达被引量：2
2010年
目的构建睾丸特异表达基因2（TSEG-2）的真核表达载体，探讨TSEG-2存细胞中的表达及其生物学功能。方法以小鼠睾丸组织cDNA为模版，设计携带HindⅢ和BamHI酶切位点的引物序列，聚合酶链反应（PCR）扩增基因片段，克隆至携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的真核表达载体pEGFP—N1；在阳离子聚合物聚乙烯亚胺（PEI）的介导下，重组质粒转染体外培养的精母细胞株GC-2spd48h后，荧光显微镜下观察TSEG-2基因在细胞内的表达定位，噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞生长活性，AO／EB荧光染色法、Hoechst33258荧光染色法、AnnexinV—FITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡，实时定量PCR测定Fas、bcl-2、bax表达水平。结果成功构建了TSEG-2与EGFP的融合表达载体pEGFP—TSEG2，转染GC-2spd细胞后可见胞质内绿色荧光蛋白表达。转染pEGFP—TSEG248h后，GC-2spd细胞生长抑制39．2％（P〈0．05），出现细胞凋亡形态学改变，凋亡率为28．3％（P〈0．05）；GC-2spd细胞中Fas和bcl-2的表达分别下调17．9％、64．8％（P〈0．05），而bax的表达上调25．1％（P〈0．05）。结论成功构建TSEG-2基因的真核表达载体，能在精母细胞株中表达并促进细胞凋亡。
胡涛王智宇童强松曾甫清陈晓春顾朝辉郑丽端
关键词：真核表达载体脱噬作用
茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y的生长抑制作用及其机制研究被引量：1
2008年
目的探讨茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y的生长抑制作用及其机制。方法0．5～2．5mmol·L^-1茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸分别处理SH—SY5Y细胞6～24h后，MTT法检测瘤细胞生长活性；PI单染流式细胞术检测细胞周期；Hoechst33258荧光染色法、AnnexinV-FITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡；RT—PCR检测PCNA、eyelinD1、N—myc基因表达。结果各浓度茉莉素作用后，SH-SYSY细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制，其中茉莉酸甲酯作用最强；0．5～2．5mmol·L。茉莉酸甲酯作用24h后，细胞生长抑制率为5．75％～88．7％（P〈0．01），IC50为L47mmol·L^-1；2．5mmol·L^-1茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用后，G2／M期细胞比率增高，部分瘤细胞发生典型的凋亡形态学改变，细胞凋亡率分别为78．9％（P〈0．01）、37．46％（P〈0．01）、8．32％（P〈0．01）；0．5～2．5mmol·L^-1茉莉酸甲酯作用24h后，PCNA、N-myc基因表达分别下调33．1％～61．8％（P〈0．01）、15．3％～50．6％（P〈0．01），而eyelin D1基因表达无变化（P〉0．05）。结论茉莉素能通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制人神经母细胞瘤细胞株的生长活性，下调PCNA、N-myc基因表达可能是其作用机制之一。
蒋国松童强松曾甫清胡波郑丽端蔡嘉斌刘媛顾朝辉王智宇
关键词：茉莉素神经母细胞瘤细胞周期阻滞凋亡
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