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广东省科技攻关计划(200635530005)
作品数:
1
被引量:3
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相关作者:
苏烨
黄亚东
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中国生物工程...
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2007
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融和蛋白GST-SUMO-MT在大肠杆菌中的表达、纯化及其活性研究
被引量:3
2007年
将编码融合蛋白GST-SUMO-MT的DNA片段连接到大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-GS-MT并转化到大肠杆菌Origami(DE3)中。20℃,1mmol/L的IPTG诱导20h后,获得分子量约为43kDa的融合蛋白,表达量占菌体上清总蛋白的38.4%。利用谷胱甘肽交联琼脂糖(glutathionesepharose4B)凝胶柱和SephardexG-25分子筛联用可以得到纯度为95%以上的融合蛋白,得率约为70mg/L。该融合蛋白可与GST抗体产生阳性反应。融合蛋白GST-SUMO-MT可以显著提高宿主对Cd2+、Zn2+和Cu2+离子聚积的能力,其耐受能力比对照组分别提高4.2倍、4倍及1.6倍。此外,原子吸收光谱法测定,每分子GST-SUMO-MT可以结合2~3个Cd2+离子。
黄亚东
苏烨
丁长才
张敏静
李校堃
苏志坚
关键词:
金属硫蛋白
融合蛋白
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