公共文化服务平台

共 8 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

体外RNA干扰下调黏着斑激酶表达对HSC—T6细胞黏附与迁移的影响被引量：6: 2009年; 目的探讨特异性阻断黏着斑激酶（FAK）表达对纤维连接蛋白刺激的肝星状细胞（HSCT6）黏附与迁移的影响。方法构建靶向FAK的RNA干扰重组体，在阳离子聚合物介导下转染大鼠肝星状细胞系HSC-T6，筛选出可高效抑制FAK表达的重组质粒；荧光实时定量PCR和Western blot检测FAK基因敲除效果；甲苯胺蓝染色法检测细胞黏附；划痕修复实验和改良的Boyden双腔系统检测细胞迁移。多组间均数差异性比较采用单因素方差分析。结果成功构建并筛选出可高效抑制FAK的质粒表达载体。质粒转染后，FAKmRNA和蛋白表达分别下降了76．82％和72．53％，同时，PFAK（Tyr^397）蛋白表达下降了62．71％；FAK表达下调可明显抑制HSC—T6细胞黏附，抑制率约58．69％；FAK基因沉默可显著抑制纤维连接蛋白诱导的HSC迁移，使细胞迁移距离降低了58．27％，跨膜迁移细胞数减少了83．70％。结论RNA干扰技术可选择性下调HSC中FAK的表达，并可显著抑制HSCT6的黏附和迁移。; 安君艳张晓岚姚冬梅敦志娜解淑蕊郝礼森; 关键词：黏着斑激酶 RNA干扰

黏着斑激酶相关非激酶对CFSC细胞基质金属蛋白酶-2及其抑制因子mRNA表达的影响被引量：5: 2008年; 目的探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对纤维连接蛋白刺激的肝星状细胞CFSC胶原代谢的影响及其分子机制。方法用体外细胞培养技术、脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染；采用Western blot方法测定FRNK蛋白表达，鉴定转染效果；用^3H Pro掺入技术测定CFSCI型胶原的合成；用RTPCR方法测定FRNK转染前后基质金属蛋白酶2（MMP-2）及其抑制因子（TIMP2）基因在CFSC中表达的变化情况。结果FRNK质粒成功转染CFSC，Ⅰ型胶原合成下降；MMP2基因表达上升，TIMP2基因表达下降，MMP2／TIMP2比值明显上升。结论外源性FRNK在CFSC内大量表达后，CFSC胶原表达减少；FRNK可能通过调节MMP2／TIMP2比值来促进CFSC的胶原降解。; 魏娟张晓岚姚冬梅霍晓霞申建刚敦志娜; 关键词：肝星状细胞明胶酶A 黏着斑激酶相关非激酶

膜型基质金属蛋白酶1在黏着斑激酶相关非激酶诱导肝星状细胞凋亡中的作用被引量：1: 2009年; 目的应用黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)表达质粒瞬时转染纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC),探讨膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)在FRNK诱导HSC凋亡中的作用。方法在体外,以FN刺激HSC增殖,采用脂质体介导的方法用FRNK表达质粒瞬时转染HSC,应用膜联蛋白/碘化丙啶双标记流式细胞术和透射电镜技术检测细胞的凋亡,蛋白免疫印迹及RT-PCR方法检测FRNK、FAK、p-FAK(Tyr397)、MT1-MMP蛋白及其mRNA表达。结果FRNK表达质粒成功转染HSC,在翻译后水平抑制FAK磷酸化。与空质粒组比较,FRNK表达质粒转染HSC 48小时后,HSC凋亡率由(9.28±1.05)%增加至(25.37±1.92)%(P<0.01)。FRNK抑制FAK磷酸化后在翻译和转录水平上调MT1-MMP表达,2.26±0.14 vs 1.09±0.15(P<0.01);1.58±0.18 vs1.00±0.10(P<0.01)。结论在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒可诱导HSC发生凋亡,上调MT1-MMP可能是其机制之一。; 申建刚安君艳桑荣霞魏娟霍晓霞张晓岚; 关键词：肝硬化细胞凋亡膜蛋白质类

FRNK高表达诱导HSC凋亡后MMP-2及TIMP-2的变化被引量：1: 2009年; 目的探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)诱导肝星状细胞(HSC)凋亡后基质金属蛋白酶-2及其抑制剂的变化。方法在体外,以纤维连接蛋白(FN)刺激HSC增殖,在脂质体介导下用FRNK表达质粒瞬时转染HSC,应用膜联蛋白/碘化丙啶双标记流式细胞术和透射电镜检测细胞的凋亡,Western blot检测FRNK、FAK、p-FAK(Tyr397)、MMP-2、TIMP-2蛋白表达。结果FRNK表达质粒成功转染HSC,在翻译后水平抑制FAK磷酸化。与空质粒组比较,FRNK表达质粒转染HSC 48 h后,HSC凋亡率由(9.28%±1.05%)增加至(25.37%±1.92%)(P<0.01);同时,FRNK在翻译水平上调MMP-2表达、抑制TIMP-2表达。结论在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒可诱导HSC发生凋亡,MMP-2/TIMP-2比值上调可能参与了该调节过程。; 申建刚张晓岚魏娟霍晓霞桑荣霞安君艳; 关键词：肝星状细胞黏着斑激酶相关非激酶基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶组织抑制剂-2

膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用: 目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对纤维连接蛋白（FN）刺激的肝星状细胞（HSC）膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养...; 魏娟张晓岚敦志娜赵春洪申建刚霍晓霞安君艳; 关键词：肝星状细胞黏着斑激酶黏着斑激酶相关非激酶膜型基质金属蛋白酶-1 胶原; 文献传递

膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用被引量：2: 2009年; 目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting法测定FRNK蛋白在瞬时转染时相应的表达,鉴定转染效果;分别应用Western blotting和RT-PCR方法测定MT1-MMP在HSC中的相应表达。结果:FRNK质粒成功转染HSC,于转染48h时,FRNK蛋白表达最强,P<0·05;FRNK转染后在基因水平上:MT1-MMP mRNA表达明显增加;翻译蛋白水平上:FRNK质粒转染HSC48h后,MT1-MMP蛋白表达量显著升高。结论:脂质体介导下FRNK质粒转染,可使外源性FRNK在HSC内大量表达,FRNK可能通过上调MT1-MMP值来抑制HSC胶原合成。; 魏娟张晓岚敦志娜赵春洪申建刚霍晓霞安君艳; 关键词：肝星状细胞黏着斑激酶黏着斑激酶相关非激酶膜型基质金属蛋白酶-1 胶原

FAK基因的RNA干扰对肝星状细胞生物活性的影响被引量：2: 2009年; 目的探讨靶向黏着斑激酶(FAK)基因的短发卡状RNA(shRNA)对大鼠肝星状细胞系HSC-T6活化与增殖的影响。方法分别设计2对有小发卡结构的DNA序列及1对非特异对照序列,构建重组质粒载体,经阳离子聚合物介导转染HSC-T6细胞。通过real-timePCR与Western blot进行筛选鉴定,改良MTT法观察细胞增殖,Western blot检测HSC活化的标志物α-SMA的表达。结果shRNA1、shRNA2均能抑制FAKmRNA和蛋白表达(P<0.05),其中shRNA2对FAK基因抑制率达76.82%,且可明显抑制HSC-T6细胞α-SMA的表达及细胞增殖。结论靶向FAK基因的shRNA可以抑制HSC-T6细胞的活化与增殖。; 安君艳张晓岚姚冬梅敦志娜解淑蕊郝礼森; 关键词：小干扰RNA 黏着斑激酶肝星状细胞

肝星状细胞的起源、分布与表型转变被引量：9: 2009年; 肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)是肝内一种具有多功能、变化不定的非实质细胞。肝脏损伤时静息期HSC活化为肌成纤维样细胞表型,其在肝纤维化(hepatic fibrosis)发生发展中发挥重要作用。对HSC起源、分布与表型转变的研究将为治疗与逆转肝纤维化提供新的方向。; 解淑蕊张晓岚; 关键词：肝星状细胞表型转变

黏着斑激酶与细胞迁移被引量：7: 2008年; 细胞迁移过程始于细胞前端板状伪足的形成、外周黏附的建立、细胞体的收缩和尾部的解离。黏着斑激酶是一种非受体酪氨酸蛋白激酶,通过其激酶活性和"脚手架"的功能在细胞迁移的各个过程中发挥关键作用。现重点介绍黏着斑激酶介导的信号转导通路及其在调控细胞迁移方面的研究进展。; 安君艳张晓岚; 关键词：黏着斑激酶细胞迁移信号通路

全选清除导出

共1页<1>

河北省自然科学基金(C2008001133)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

河北省自然科学基金(C2008001133)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈