福建省自然科学基金(2010J05088)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：张丹凤陈国平黄家福陈阳钟丽芬更多>>
- 相关机构：漳州师范学院漳州市农业局更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金漳州市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 嗜水气单胞菌AH1全菌灭活疫苗的初步研究被引量：3
- 2013年
- 本研究选取嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)AH1为研究对象,利用甲醛制备嗜水气单胞菌AH1全菌灭活疫苗,终浓度为0.06%甲醛可将嗜水气单胞菌AH1完全灭活;该灭活全菌疫苗腹腔注射小白鼠未见不良反应,在第21d免疫组小白鼠的血清凝集效价达28,而对照组没有出现凝集反应.在此基础上进行小白鼠免疫保护实验,结果表明该全菌灭活疫苗保护效果达100%.本实验将为我们进一步开发和应用嗜水气单胞菌全菌灭活疫苗奠定良好的理论和实践基础.
- 张丹凤陈国平钟丽芬
- 关键词：嗜水气单胞菌免疫保护
- 地热田碱性蛋白酶菌株的选育与酶性质的研究被引量：2
- 2011年
- 从温泉附近土样中成功分离到一株高温碱性蛋白酶产生菌株H-1,经初步鉴定为芽孢杆菌(Bacillus.)菌株H-1最佳产酶的发酵时间为67.5h,该酶在30～70℃酶活性随温度升高而增强,70℃酶活性达到最高,在pH7.0～11.0范围内较稳定,从菌株H-1液体发酵液中提取粗酶液,经CMC-I阳离子交换层析和SepHadex G-75凝胶层析,得到单一组分;通过Native-PAGE、SDS-PAGE电泳鉴定,粗酶至少含有3种碱性蛋白酶同工酶;单组分碱性蛋白酶的比活力为3875U,相对分子量约为31KDa.
- 黄家福潘裕添陈俊玉林荣榕徐宝丹余金富
- 关键词：碱性蛋白酶同工酶凝胶层析地热田
- 大肠杆菌nmpC基因的快速敲除
- 2013年
- 旨在利用Red重组系统和Xer重组系统获得大肠杆菌NmpC外膜蛋白基因删除菌株。采用PCR扩增nmpC基因片段,构建pMD-nmpC载体,EcoR I酶切并经Pfu补平酶切缺口后与difGm片段连接,得到重组质粒T-nmpC∷difGm,PCR扩增获得突变盒nmpC::difGm,电转化突变盒片段入大肠杆菌细胞,PCR扩增验证是否获得没有抗性标记的ΔnmpC基因删除菌株。结果显示,成功构建了重组质粒T-nmpC∷difGm,在Red重组酶和Xer重组酶的介导下,进行同源重组和抗生素标记去除,并经PCR验证得到ΔnmpC基因删除菌株。首次成功获得大肠杆菌ΔnmpC无抗生素标记基因删除菌株,该基因删除菌株可为深入研究NmpC的功能提供研究基础。
- 张丹凤陈国平华秀庭陈阳
- 关键词：RED重组系统大肠杆菌
- AmrB对嗜水气单胞菌氨基糖苷类抗生素耐药性的影响被引量：1
- 2013年
- AmrB是药物外排系统的重要成员,探讨AmrB与嗜水气单胞菌氨基糖苷类抗生素耐药性的关系,对研究嗜水气单胞菌耐药机制有重要意义。将amrB基因克隆至pET-28a载体上,双酶切和测序验证得到重组质粒amrB-pET-28a。对amrB-pET-28a/BL21进行诱导表达和镍柱纯化,制备得到效价为1∶6 400的兔抗AmrB抗血清。诱导获得嗜水气单胞菌AH1卡那霉素、链霉素和庆大霉素耐药菌株,Western blotting分析AmrB在耐药菌株中的表达量。Phoretix 1D和SPSS分析表明,AmrB的表达量在卡那霉素、链霉素和庆大霉素耐药菌株中显著地高于对照菌嗜水气单胞菌AH1,分别是对照的2.16、2.65和2.13倍,提示AmrB在嗜水气单胞菌对氨基糖苷类抗生素耐药过程中起重要作用,这将有助于了解嗜水气单胞菌耐药的分子机制。
- 张丹凤陈国平张国广黄家福华秀婷陈阳
- 关键词：嗜水气单胞菌耐药氨基糖苷类抗生素
